AFLP技术

实验概要本实验介绍了AFLP(amplified fragment length polymorphism)技术。AFLP是一种建立在PCR基础上的限制性片断长度多态性分析,是一种重要而有效的分子标记技术。主要试剂AFLP试剂盒、测序胶、银染试剂主要设备PCR仪、银染设备实验步骤1. 总DNA提取(略)2. DNA酶切 DNA模板(200ng/ul) 1.25ul Mse I &nb......阅读全文

扩增片段长度多态性技术的原理和特点

AFLP 是 RFLP 与PCR相结合的产物,其基本原理是先利用限制性内切酶水解基因组 DNA 产生不同大小的 DNA 片段,再使双链人工接头的酶切片段相连接,作为扩增反应的模板 DNA,然后以人工接头的互补链为引物进行预扩增,最后在接头互补链的基础上添加 1—3个选择性核苷酸作引物对模板 DNA

妊娠期急性脂肪肝的病因分析

  AFLP的病因不明。由于AFLP发生于妊娠晚期,只有终止妊娠才有痊愈的希望,故推测是妊娠引起的激素变化,使脂肪酸代谢发生障碍,致游离脂肪酸堆积在肝细胞和肾、胰、脑等其他脏器,造成多脏器损害。近年来已有多例复发病例和其子代有遗传缺陷报道,故有人提出可能是先天遗传性疾病。此外,病毒感染、中毒、药物(

妊娠急性脂肪肝的病因分析

  AFLP的病因不明。由于AFLP发生于妊娠晚期,只有终止妊娠才有痊愈的希望,故推测是妊娠引起的激素变化,使脂肪酸代谢发生障碍,致游离脂肪酸堆积在肝细胞和肾、胰、脑等其他脏器,造成多脏器损害。近年来已有多例复发病例和其子代有遗传缺陷报道,故有人提出可能是先天遗传性疾病。此外,病毒感染、中毒、药物(

妊娠期高血压疾病肝损和HELLP综合征的简介

  AFLP的肾曲小管上皮细胞有游离脂肪酸沉积,肾曲小管重吸收障碍导致水钠潴留,出现恶心、呕吐、高血压、蛋白尿、水肿等类似于妊娠期高血压疾病的表现。同时重症妊娠期高血压疾病亦可出现肝功能、肾功能和凝血功能的障碍。当进一步发展,出现HELLP综合征时,其临床表现和实验室检查与AFLP十分相似。两者之间

二次PCR需要注意什么问题

二次PCR实际上与AFLP基本一样,做AFLP一般要进行预扩增和选择性扩增,而选择性扩增就是二次PCR。 有时在预扩增后直接取样品做选择性扩增,条带数很少,而且在PAGE觉上染色不明显,背景很深。预扩增后的产物稀释至少10-20倍,有时甚至要稀释100倍才能在选扩时候扩增出来DNA条带,这样扩增出来

DNA指纹法

DNA Fingerprinting (David F. Betsch)the theory, procedures and applications  ·         DNA Fingerprinting (Polyarylamide Gel) (Caltech)BAC DNA sample

DNA分子标记技术研究进展(一)

遗传标记在遗传学的建立和发展过程中有着举足轻重的作用,随着遗传学的进一步发展和分子生物学的异军突起,遗传标记先后相应地经历了形态标记、细胞学标记、生化标记和DNA分子标记四个发展阶段。前三种标记都是以基因表达的结果为基础的,是对基因的间接反映;而DNA分子标记则是DNA水平遗传变异的直接反映,它具有

农作物种子纯度鉴定方法综述4

4.2 SSR(Simple sequence repeat,简单序列重复标记)由Moore等于1991年创立。SSR即微卫星DNA,是一类由几个(多为1~5个)碱基组成的基序(motif)串联重复而成的DNA串联重复序列,其长度一般较短,广泛分布于基因组的不同位置,如(cA)n、(AT)n、(GG

关于遗传多态现象的现多态性介绍

  1、遗传多态现象的现多态性— 扩增片段长度(AFLP)多态性标记:AFLP是将PCR技术与RFLP结合的一种方法,通过对基因组DNA酶切片段的选择性扩增来检测DNA酶切片段长度的多态性。  2、遗传多态现象的现多态性— 微卫星多态性标记(SSRP):基于PCR技术的DNA标记,多态性是由同一座位

cDNA

·         cDNA Synthesis (Crawford Lab)mRNA can be converted into DNA (copy DNA, cDNA) by annealing oligo-dT to the 3' poly-A tail that occurs on

什么是扩增片段长度多态性?

扩增片段长度多态性(AFLP)是1993年荷兰科学家Zabeau和Vos发展起来的一种检测DN A多态性的新方法。

基因可隆的方法

Serial Analysis of Gene Expression (SAGE) SAGE is a powerful tool that allows the analysis of overall gene expression patterns with digital analysis. 

癌遗传学

Serial Analysis of Gene Expression (SAGE) SAGE is a powerful tool that allows the analysis of overall gene expression patterns with digital analysis. 

急性妊娠脂肪肝的病理

  AFLP的病理改变为肝脏大小正常或轻度缩小,色黄质软,光滑,切面油腻。组织学改变主要是弥漫性肝细胞脂肪变性和脂肪浸润,脂肪变性是微囊泡状,脂肪变可侵及整个肝小叶,汇管区可有炎细胞浸润,也可见少量肝细胞坏死和淤胆。

扩增片段长度多态性的概念简介

扩增片段长度多态性(AFLP)Amplified Fragment Length Polymorphism对基因组DNA进行双酶切,形成分子量大小不同的随机限制片段,再进行PCR扩增,根据扩增片段长度的多态性的比较分析,可用于构建遗传图谱、标定基因和杂种鉴定以辅助育种。

扩增片段长度多态性的基本介绍

扩增片段长度多态性(AFLP)Amplified Fragment Length Polymorphism,对基因组DNA进行双酶切,形成分子量大小不同的随机限制片段,再进行PCR扩增,根据扩增片段长度的多态性的比较分析,可用于构建遗传图谱、标定基因和杂种鉴定以辅助育种。

为什么琼脂糖凝胶电泳可以分离和鉴定核酸

可以,琼脂糖凝胶电泳可以通过限制性酶切多态性(rflp)或者扩增片断多态性(aflp)来鉴定检测的dna。就是不同dna被特定的限制性内切酶切出来的片断大小是不一样的,在琼脂糖凝胶电泳跑出来的条带也不一样,如果是相同的dna,结果就一样。

为什么琼脂糖凝胶电泳可以分离和鉴定核酸

可以,琼脂糖凝胶电泳可以通过限制性酶切多态性(rflp)或者扩增片断多态性(aflp)来鉴定检测的dna。就是不同dna被特定的限制性内切酶切出来的片断大小是不一样的,在琼脂糖凝胶电泳跑出来的条带也不一样,如果是相同的dna,结果就一样。

妊娠急性脂肪肝的相关介绍

  妊娠期急性脂肪肝(AFLP)又称”产科急性假性黄色肝萎缩”、“妊娠特发性脂肪肝“、“妊娠期肝脏脂肪变性”等。妊娠期急性脂肪肝是妊娠晚期特有的致命性少见疾病。该病起病急骤,病情变化迅速,可发生在妊娠28~40周,多见于妊娠35周左右的初产妇,妊娠期高血压疾病、双胎和男胎较易发生。临床表现与暴发性肝

关于妊娠期急性脂肪肝的基本介绍

  妊娠期急性脂肪肝(AFLP)又称”产科急性假性黄色肝萎缩”、“妊娠特发性脂肪肝“、“妊娠期肝脏脂肪变性”等。妊娠期急性脂肪肝是妊娠晚期特有的致命性少见疾病。该病起病急骤,病情变化迅速,可发生在妊娠28~40周,多见于妊娠35周左右的初产妇,妊娠期高血压疾病、双胎和男胎较易发生。临床表现与暴发性肝

微卫星标记法的特点

与其它标记技术相比,具有以下特点:首先,在每个微卫星DNA 两端的序列多是相对保守的单拷贝序列,尤其在亲缘关系相近的物种间是保守的,而且在一些紧密相关的物种中其重复单位和重复次数具有一定的相似性。其次,这些小的、串联排列的重复序列经常是通过核苷酸链的滑动错配或者其它未知的过程来改变它们的长度,从而导

急性重症病毒性肝炎的简介

  肝脏衰竭是急性重症病毒性肝炎的主要表现,临床上与AFLP极为相似,应特别注意鉴别。急性重症病毒性肝炎的血清免疫学检查往往阳性(包括肝炎病毒的抗原和抗体检测);转氨酶极度升高,往往>1000U/L;尿三胆阳性。血尿酸升高不明显,白细胞计数正常,肾功能异常出现较晚。外周血涂片无幼红细胞及点彩细胞。肝

表达序列标签的应用

EST作为表达基因所在区域的分子标签因编码DNA序列高度保守而具有自身的特殊性质,与来自非表达序列的标记(如AFLP、RAPD、SSR 等)相比更可能穿越家系与种的限制,因此EST标记在亲缘关系较远的物种间比较基因组连锁图和比较质量性状信息是特别有用。同样,对于一个DNA序列缺乏的目标物种,来源于其

生物学术语表达序列标签的方法

EST作为表达基因所在区域的分子标签因编码DNA序列高度保守而具有自身的特殊性质,与来自非表达序列的标记(如AFLP、RAPD、SSR 等)相比更可能穿越家系与种的限制,因此EST标记在亲缘关系较远的物种间比较基因组连锁图和比较质量性状信息是特别有用。同样,对于一个DNA序列缺乏的目标物种,来源于其

水生所揭示出异育银鲫“中科3号”培育形成的机制

  异育银鲫“中科3号”是中国科学院水生生物研究所桂建芳研究员等在鉴定出可区分银鲫不同克隆系的分子标记,证实银鲫同时存在单性雌核生殖和有性生殖双重生殖方式的基础上,利用银鲫双重生殖方式,从D系银鲫(♀)与A系银鲫(♂)交配所产后代中筛选出少数优良个体,再经雌核生殖增殖扩群,经多代生长对比养殖试验评价

关于微卫星标记的相关特点介绍

  SSR 操作简单,仅需微量组织,即可使DNA 降解,进行有效地分析鉴定。其标记带型简单,记录条带一致,客观明确,PCR 技术的利用,使微卫星标记技术实现操作自动化。  与其它标记技术相比,具有以下特点:首先,在每个微卫星DNA 两端的序列多是相对保守的单拷贝序列,尤其在亲缘关系相近的物种间是保守

关于妊娠脂肪肝的基本介绍

  多在第一胎妊娠34—40周时发病,病情严重,预后不佳,母婴死亡率分别达80%与70%。临床表现为严重呕吐、黄疸上腹痛等,很难与暴发性病毒肝炎区别。及时终止妊娠可使病情逆转,少数可经自然分娩或剖腹产而脱险。  医院肝病专家介绍说,妊娠期急性脂肪肝又称产科急性假性黄色肝萎缩,是妊娠晚期特有的致命性少

关于脆性X综合症的诊断与防治介绍

  根据本病典型的临床症状可基本作出诊断。利用染色体核型分析,可对脆性X综合征进行确诊。脆性X染色体的检出率受培养基成分和时间的影响。去除培养基中的叶酸或添加诱变剂有利于检出。女性杂合子的检出率随年龄而降低。利用Southern杂交或扩增片段长度多态性(AFLP)检测方法可对脆性X综合征作出准确的基

简述脆性X综合征的诊断与防治

  根据本病典型的临床症状可基本作出诊断。利用染色体核型分析,可对脆性X综合征进行确诊。脆性X染色体的检出率受培养基成分和时间的影响。去除培养基中的叶酸或添加诱变剂有利于检出。女性杂合子的检出率随年龄而降低。利用Southern杂交或扩增片段长度多态性(AFLP)检测方法可对脆性X综合征作出准确的基

非荧光标记的遗传标记分析技术

近年来,美国GENTEON公司采用激光致导的动态荧光检测技术(Dynamic fluorescence),结合多通道毛细管电泳技术,研制出Capella 400型全自动基因分析系统。该仪器采用动态荧光检测技术,彻底消除了传统荧光DNA标记检测的高成本和复杂性,可精确有效到检测未经标记的单链或双链核苷