DNA分子标记技术研究进展（一）
遗传标记在遗传学的建立和发展过程中有着举足轻重的作用，随着遗传学的进一步发展和分子生物学的异军突起，遗传标记先后相应地经历了形态标记、细胞学标记、生化标记和DNA分子标记四个发展阶段。前三种标记都是以基因表达的结果为基础的，是对基因的间接反映；而DNA分子标记则是DNA水平遗传变异的直接反映，它具有能对各个发育时期的个体、各个组织、器官甚至细胞作出“中性”以及操作简便等特点。正是这些特点，奠定了它极其广泛的应用基础。DNA分子标记本质上是指能反映生物个体或种群间基因组中某种差异的特异特DNA片段[1]。DNA分子标记大多以电泳谱带的形式表现生物个体之间DNA差异，通常也称为DNA的指纹图谱。在过去10多年中，分子标记技术得到了突飞猛进的发展，至今已有几十种分子标记技术相继出现，并在基因库构建、基因克隆、基因组作图、基因定位、作物遗传育种、植物亲缘关系鉴别等各个研究领域得到了广泛的应用。 1．第一代分子标记1.1&nbs......阅读全文
DNA分子标记技术研究进展（一）
遗传标记在遗传学的建立和发展过程中有着举足轻重的作用，随着遗传学的进一步发展和分子生物学的异军突起，遗传标记先后相应地经历了形态标记、细胞学标记、生化标记和DNA分子标记四个发展阶段。前三种标记都是以基因表达的结果为基础的，是对基因的间接反映；而DNA分子标记则是DNA水平遗传变异的直接反映，它具有
DNA分子标记技术研究进展（二）
2．第二代分子标记2.1 SSR标记技术 在真核生物基因组中存在许多非编码的重复序列，如重复单位长度在15～65个核苷酸的小卫星DNA(Minisatellite DNA)，重复单位长度在2～6个核苷酸的微卫星DNA(Microsatellite DNA)。小卫星和微卫星DNA分布
基于数字PCR的单分子DNA定量技术研究进展（一）
摘要 数字PCR是一项针对单分子目标DNA的绝对定量技术。该技术是将含有DNA模板的反应溶液分配到大量独立的反应室中并且发生扩增反应，通过统计反应室中的阳性信号来定量DNA的拷贝数。DNA样品在反应室中随机和独立分布是单分子成功扩增和准确定量D NA拷贝数的关键因素。本文综述了数字PCR的发展历
DNA快速检验全球研究进展（一）
影视作品《神探狄仁杰》中狄仁杰征求助手李元芳的意见从而借对话引出对案情分析的桥段，其中会包含对遇害者的情况分析诊断，也就是“古代法医”的部分工作。1247年（中国南宋理宗淳祜七年），时任湖南提点刑狱兼大使行府参议官的宋慈编写完成《洗冤集录》，这是世界历史上第一本以死亡方式系统编辑的法医学著作。《洗冤
SSR分子标记技术及其在构建玉米DNA指纹库上的应用2
2玉米DNA指纹库的构建2． 1利用SSR分子标记构建玉米DNA指纹库目 前，国内外对玉米种质鉴定采用的遗传标记仍以形态标记为主，参考同工酶和种子贮藏蛋白标记。但形态标记的表现受环境影响较大，鉴定工作量大，周期长，受季 节限制。同工酶和种子贮藏蛋白标记多态性不够丰富，同工酶还存在组织和器官特异性，取
SSR分子标记技术及其在构建玉米DNA指纹库上的应用1
SSR分子标记技术及其在构建玉米DNA指纹库上的应用 康丽丽 周鸿飞(沈阳农业大学农学院) 玉 米是一种重要的饲用、粮用和工业加工作物，在国民经济中占有重要的地位。玉米育种方法的改进对农业发展具有重要意义。长期以来，育种家们大多数是借用易于 鉴别的形态学和同工酶等遗传标记来辅助育种，并取得了很大成功
基于数字PCR的单分子DNA定量技术研究进展（二）
2 qPCR与dPCR比较研究 qPCR是目前DNA定量研究的主要技术，该技术通过在PCR反应体系中加入荧光结合染料(SYBR green I) 或荧光标记的探针( 如TaqMan Probes) ，利用实时积累的荧光信号监测整个扩增过程，最后通过标准曲线对未知模板进行定量分析，以此来评估
基于数字PCR的单分子DNA定量技术研究进展（三）
3.2 dPCR在转基因植物检测方面的研究 转基因植物及相关食品的定量分析主要测定转入基因的相对含量。目前常用qPCR作为核酸定量方法。dPCR可以不需要校准物而准确测量低拷贝的DNA分子。Corbisier 等用dPCR分析了提取于MON810玉米种子的外源检测基因和hmg基因的拷贝数，验证了dP
基于数字PCR的单分子DNA定量技术研究进展（四）
NGS 是一种识别和确认未知致病菌的前景广阔的技术，然而其在生物防御和公共健康应用等方面的时效性，却往往因为缺乏快速、有效、可靠的自动DNA样品制备方法而受到限制。为了突破这种限制，Kim 等设计了一种基于流体分布元件的数字微流体(DMF) 平台，使得多子系统模块能够进入自动NGS库样品
微卫星DNA分子标记及其应用（一）
微卫星（Microsatellite，MS）又称短串联重复（Short Tandem Repeats，STR）或简单序列重复（Simple Sequnce Repeat，SSR），是指基因组中以少数几个核苷酸（多数为2-4个）为单位多次串联重复组成的长达几十个核苷酸的序列。其中最常见的是双核
现代分子育种研究进展
从过去到现在，世界各国的顶尖育种工程师们一直都在为未来的发展提供更好的产品而努力。祖辈们和上一代的园丁们精心挑选出最适合当地条件的作物种子并加以妥善保存，以期在来年或今后更长的时间内能获得好的收成。以番茄为例，在经过几十年的选择性育种后，各种地方品种的种子表现出了明显的特定区域特征。这些品种随着时间
DNA快速检验全球研究进展（三）
芯片毛细管电泳具有进样量少，灵敏度高，分析速度快等特点，非常适合法医DNA-STR的快速检验。毛细管电泳芯片由于尺寸小，可施加较大场强，所以在几秒钟内就可完成对样品的分离，微阵列毛细管电泳芯片可实现高通量检测则成为目前学者研究的热点。2002年Emrich CA等[31]报道的将高通量384孔毛
线粒体DNA甲基化研究进展
DNA 甲基化是表观遗传修饰的重要方式之一. 线粒体是真核细胞内的关键细胞器, 线粒体DNA(mtDNA)编码部分线粒体基因, 其 mtDNA 的甲基化修饰可能引起所编码基因的异常表达, 从而参与调节生理和病理过程. 近期来自西安交通大学生命科学与技术学院的研究人员就目前 mtDNA 甲基化及其
DNA快速检验全球研究进展（二）
2.2 快速扩增检验一种常用的快速扩增研究方法是选用合适的快速酶并结合快速循环程序对现有的常规试剂盒进一步优化，以达到缩短PCR扩增时间为目的。如2008年Vallone等[13]将PyroStart和SpeedSTAR两种酶结合使用，PyroStart酶（Fermentas，Glen Burn
DNA分子杂交原理
DNA分子杂交的原理是,具有互补碱基序列的DNA分子,可以通过碱基对之间形成氢键等,形成稳定的双链区.如果两DNA有一段相同碱基的话,就能形成氢键,且形成稳定的双链区
重组DNA分子的转化实验原理和实验步骤（一）
1实验原理DNA重组分子在体外构建完成后，必须导入特定的受体细胞，使之无性繁殖并高效表达外源基因或直接改变其遗传性状，这个导入过程及操作统称为重组DNA分子的转化。对于不同的受体细胞，往往采取不同的转化战略。1.1 DNA重组分子的常用转化方法1.1.1 Ca 2 诱导转化1970年Mandel和H
DNA分子杂交的意义
分类学上不同物种的DNA分子之间可以进行分子杂交，但是，远缘物种的DNA分子之间进行杂交分子的可能性远比近缘物种的要小得多。例如，细菌与真核细胞DNA分子之间形成杂交分子的可能性很小；不同细菌的 DNA分子之间杂交时，能形成某些互补片段；人的DNA分子与小鼠的 DNA分子之间杂交时，只有少量的人DN
量子点标记技术实现分子马达在活细胞的示踪
基于量子点的单分子荧光示踪技术，对于体外研究分子马达在细胞骨架上的行走模式具有重要意义。目前对于细胞内分子马达运动特性的研究，是通过对内吞体、黑素体等细胞器的示踪而间接实现的。这些细胞器通过分子马达运输，因此，对细胞器的运动监测可间接分析分子马达的运动特性。巴黎第六大学Giovanni Capp
分子印迹微萃取技术的研究进展
微萃取技术是一种将分析物高效萃取富集于微体积的聚合物或有机溶剂中,集采样、萃取、浓缩、进样于一体的无(少)溶剂、易于与其他技术在线联用的样品前处理方法。分子印迹聚合物是一种具有强大分子识别功能的材料,具有高效的选择特异性,可从复杂样品中选择性分离富集目标分析物,在微萃取技术中得到了广泛的应用。本文综
血流感染分子诊断的研究进展
血流感染(blood stream infection)是一种严重的全身感染性疾病,其中仅有30%~40%的血流感染者可以通过培养的方式发现致病菌[ 1, 2]。引起血流感染的微生物包括细菌、真菌、病毒及寄生虫,阳性血培养可为临床提供病原学诊断的依据。血流感染初期的24 h内,若未能及时
AFLP标记技术
实验概要AFLP也是通过限制性内切酶片段的不同长度检测DNA多态性的一种DNA分子标记技术。但AFLP是通过PCR反应先把酶切片段扩增,然后把扩增的酶切片段在高分辨率的顺序分析胶上进行电泳,多态性即以扩增片段的长度不同被检测出来(附图)。实验中酶切片段首先与含有与其共同粘末端的人工接头连接,连接后的
RFLP标记技术
实验概要DNA分子水平上的多态性检测技术是进行基因组研究的基础。RFLP(Restriction Fragment Length Polymorphism,限制片段长度多态性)已被广泛用于基因组遗传图谱构建、基因定位以及生物进化和分类的研究。RFLP是根据不同品种（个体）基因组的限制性内切酶的酶
RAPD标记技术
实验概要运用随机引物扩增寻找多态性DNA片段可作为分子标记。这种方法即为RAPD(randomly amplifiled polymorphic DNA,随机扩增的多态性DNA.)该RAPD技术建立于PCR基础上，它是利用一系列(通常数百个)不同的随机排列碱基顺序的寡聚核苷酸单链(通常为十聚体)
RNAi的研究进展（一）
RNA干扰(RNA interference ,RNAi) 现象是一种进化上保守的抵御转基因或外来病毒侵犯的防御机制。将与靶基因的转录产物mRNA 存在同源互补序列的双链RNA(double strand RNA ,dsRNA) 导入细胞后,能特异性地降解该mRNA ,从而产生相应的功能表型缺失
Nat－Chem：一种分子能直接剪断DNA摧毁癌细胞
日前，美国耶鲁大学的研究人员发现一种由海洋细菌产生的物质能够通过破坏DNA的方式杀灭癌细胞，新发现为低剂量化疗药物的研发铺平了道路。相关论文发表在5月11日出版的《自然·化学》杂志上。 物理学家组织网5月13日（北京时间）报道称，这种物质名为lomaiviticin A，先前已经被
DNA－－RNA－寡聚核苷酸的准确分子质量测定（一）
1. 前言随着人们对核酸结构和功能的深入了解,特异性结合或者裂解致病基因的核酸药物也逐渐成为了药物研究的新热点, 核酸药物的作用效率高、应用范围广，可以对传统药物进行补充，并且在前期的临床诊断中也可以起到重要的指示作用。核酸药物主要是指各种具有不同功能的寡聚核糖核苷酸（RNA）或者寡聚脱氧核糖核
简述DNA分子杂交的意义
分类学上不同物种的DNA分子之间可以进行分子杂交,但是,远缘物种的DNA分子之间进行杂交分子的可能性远比近缘物种的要小得多。例如,细菌与真核细胞DNA分子之间形成杂交分子的可能性很小；不同细菌的 DNA分子之间杂交时,能形成某些互补片段；人的DNA分子与小鼠的 DNA分子之间杂交时,只有少量的人
于军：DNA分子之神奇
如果我告诉你，DNA也许并不是生命起源初始时必需的大分子(基本上包括核苷酸、蛋白质和多糖)“建筑材料”，你相信吗?如果我告诉你，DNA是被它的“兄弟”——大分子RNA(组成RNA和DNA的基本单元在分子结构上只差一个氧原子)“挟持”到生命的“最小独立复制单元”——细胞里来的，你相信吗?如果我告诉
简述DNA分子杂交的意义
分类学上不同物种的DNA分子之间可以进行分子杂交,但是,远缘物种的DNA分子之间进行杂交分子的可能性远比近缘物种的要小得多。例如,细菌与真核细胞DNA分子之间形成杂交分子的可能性很小；不同细菌的 DNA分子之间杂交时,能形成某些互补片段；人的DNA分子与小鼠的 DNA分子之间杂交时,只有少量的人
DNA分子克隆的几个概念
在体外将DNA分子片段与载体DNA片段连接，转入细胞获得大量拷贝的过程中DNA分子克隆(或基因克隆)。其基本步骤包括：制备目的基因→将目的基因与载体用限制性内切酶切割和连接，制成DNA重组→导入宿主细胞→筛选、鉴定→扩增和表达。载体（vecors）在细胞内自我复制，并带动重组的分子片段共同增殖，从而