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实验概要本实验介绍了PCR-ELISA的操作流程。PCR-ELISA是用免疫学方法检测PCR产物，这比常规用电泳方法及Southern blot要简便、省时，可同时处理大量标本，便于自动化。实验原理PCR-ELISA的原理是在做PCR扩增时应用生物素(biotin)标记的引物，这样PCR的产物就可结合到亲和素(avidin)包被的塑料板上，再用地高辛标记的探针与PCR产物杂交，然后就可以用抗地高辛的酶联反应检测。实验步骤1. PCR扩增按基本PCR技术做DNA扩增，只是所用的引物至少有一个是5′端用生物素标记的。通常可在DNA合成仪上直接合成5′端带生物素标记的引物。2. 地高辛标记的探针杂交将地高辛标记的DNA探针0.1μg稀释于90μl 50mmol/L TrisHCl，pH8.3,80mmol/L KCl中。取10μl PCR产物加到管中，加热至90℃，缓慢冷却至67℃。离心1s，置52℃水浴保温1h。3. 将杂交产物固定......阅读全文
因此组织不可用甲醛固定，可用甲醛、乙醇等。PPA对组织内抗原（先与IgG结合）的定位，反应时间可以延长，大鼠ELISA试剂盒便于渗透入组织细胞内，且没发现严重的物理吸附现象。在PPA实验中稀释液常用含0.5%（v/v）Tween20的0.02mol/L Ph 7.4 Tris-HC1缓冲液（2.42
实验概要本实验介绍了PCR-ELISA的操作流程。PCR-ELISA是用免疫学方法检测PCR产物，这比常规用电泳方法及Southern blot要简便、省时，可同时处理大量标本，便于自动化。实验原理PCR-ELISA的原理是在做PCR扩增时应用生物素(biotin)标记的引物，这样PCR的产物就可结
PCR或RT-PCR试剂盒的组成核酸提取试剂核酸扩增或逆转录-核酸扩增试剂产物检测试剂（有些使用全自动分析仪的PCR方法因其核酸扩增和检测同时完成，故无专门的产物检测试剂）影响PCR试剂盒质量的因素内在因素: 原材料、核酸提取方法、方法学设计影响PCR试剂盒质量的因素： 扩增所需的原材料寡核苷酸引物
摘 要：当代社会人类对食品安全的关注度越来越高，相应的食品检测技术也得到不断改善。其中生物技术挥了重要的作用，PCR技术、酶联免疫吸附技术（ELISA）、PCR-免疫技术（PCR-ELISA）、免疫亲合色谱（IAC）、生物芯片（Biochips） 等技术以各自的优点，被广泛地运用于食品检测领域。
摘要：当代社会人类对食品安全的关注度越来越高，相应的食品检测技术也得到改善。其中生物技术也挥了重要的作用，PCR技术、酶联免疫吸附技术（ELISA）、PCR-免疫技术（PCR-ELISA）、免疫亲合色谱（IAC）、生物芯片（Biochips）等技术以各自的优点，被广泛地运用于食品检测领域。&nb
摘要：检测监测技术是减少食源性疾病的有力保证,食品安全技术的运用首先体现在检测技术上,检测正是保障食品安全最为有效的手段。 1．食品安全离不开检测技术 检测监测技术是减少食源性疾病的有力保证,食品安全技术的运用首先体现在检测技术上,检测正是保障食品安全最为有效的手段。
定量PCR 定义 以参照物为标准对PCR终产物进行分析或对PCR过程的进行监测，来评估样本中靶基因的拷贝数，称为定量PCR相对定量→绝对定量， 手工操作→自动化检测， 灵敏度与特异性多有很大的提高。 定量PCR的可行性 定量一般是在PCR扩增的指数期进行的。 特定的待扩增基因片段 起始含量越大，则指
自ELISA问世20多年来，洗板由原来的手工操作，发展到简单的多头加液器，再形成自动化的洗板机，随着时间的推移，逐步融合了冲洗压力、冲洗距离、冲洗时间、震荡、涡流、底部冲洗、两点吸液、连续式冲洗等多种方式，增加了多规格微孔形状的选择等。一、洗板机机理的研究1、 快速的、与残留液量相关的直接稀释过程；
一、选购洗板机的注意事项 1、关键指标：残留量：<2uL 能否提供可选择的洗板环境：洗板次数、条数、浸泡时间等是洗板机的基本参数，一般均可满足。建议选择具有底部冲洗、两点吸液等功能的仪器；底部冲洗有利于减小微孔板底部的干扰性吸附；两点吸液可大大降低微孔液体残留量
据百度《3·15质量大数据报告》显示，今年网民最关注的消费问题中，食品安全居首。而这其中，“转基因食品安全吗？”“转基因食品可检测出来吗？”等一系列有关转基因的话题关注度高达60.24%。 而去年4月，湖北省武汉市一家大型超市检测出含有转基因成分的“Bt汕优63”大米曾引起轩然大波。虽然这种水
PCR-ELISA 一、原理 PCRELISA是用免疫学方法检测PCR产物，这比常规用电泳方法及Southerlot要简便、省时，可同时处理大量标本，便于自动化。PCR-ELISA的原理是在做PCR扩增时应用生物素(biotin)标记的引物，这样PCR的产物就可结合到亲和素(avidi
· Standard PCR Protocol (Molecular Biology Techniques Manual)The followings are described in
(三)扩增区下述工作在本区内进行：DNA或cDNA扩增。此外，已制备的DNA模板和合成的cDNA(来自样本制备区)的加入和主反应混合液(来自试剂贮存和制备区)制备成反应混合液等也可在本区内进行。在巢式PCR测定中，通常在第一轮扩增后必须打开反应管，因此巢式扩增有较高的污染危险性，第二次加样必须在本区
自ELISA问世20多年来，洗板由原来的手工操作，发展到简单的多头加液器，再形成自动化的洗板机，随着时间的推移，逐步融合了冲洗压力、冲洗距离、冲洗时间、震荡、涡流、底部冲洗、两点吸液、连续式冲洗等多种方式，增加了多规格微孔形状的选择等。一、洗板机机理的研究1、 快速的、与残留液量相关的直接
无论是用什么仪器设备，它都是有使用注意事项的，可能一个你不注意的小细节就能引发大问题，自动洗板设备BIOBASE-9621自动洗板机也不例外。正确使用仪器设备，不仅可以延长仪器使用寿命，还可以让后续的检测数据更加准确。今天带大家熟悉一下BIOBASE9621自动洗板机使用注意事项：1、在使用前先检查
(四)扩增产物分析区下述操作在本区内进行：扩增片段的测定。核酸扩增后产物的分析方法多种多样，如膜上或微孔板上探针杂交方法(同位素标记或非同位素标记)、琼脂糖凝胶电泳、聚丙烯酰胺凝胶电泳、Southern转移、核酸测序方法等。目前国内的商品试剂盒绝大部分均采用非同位素标记的微孔板上探针杂交方法，即PC
孔板夹心杂交法： 该法是通过一固定于微孔板的捕获探针与PCR产物的某一区域特 异杂交使产物的间接地固定于微孔板上，然后，再用一生物素 等非放射性标记物标记的检测探针与产物的另一特异性较一次 杂交，漂洗后显色即可判断结果。该法需要两个杂交过程来检测 一个产物，因此，其特异性较一次杂交的检测法高。该法
【摘 要】随着科学技术的迅猛发展，转基因食品大量出现，并且大量涌入市场。转基因食品到底对人们的健康有没有影响，至今还没有一个定论，因此，对转基因食品的检测受到了世界各国卫生组织机构的广泛关注。 随着现代科技的快速发展，以基因工程为代表的现代生物技术也取得了令人注目的成绩，特别是与
血液分子生物学检验技术主要包括PCR技术、DNA测序技术、限制性片段长度多态性（RFLP）、转基因技术及基因芯片（DNA-chip）技术等分子生物学技术。目前这些技术已应用于血液病基因分析、基因诊断、白血病分型、指导治疗、判断预后和微小残留病检测等方面。 （1）核酸分子杂交技术原理和方法 1）So
引言 一提到分子诊断，人们自然会想到核酸和基因。的确，分子诊断技术的发展与分子生物学的研究是分不开的，自1953年Watson和Crick发现DNA双螺旋结构以来，一系列分子生物学新技术相继出现，如Sanger测序、放射性核素和非放射性核素标记技术、电泳、层析、核酸纯化、核酸液相和固相杂交、基
聚合酶链反应（polymerase chain reaction, PCR）是微量核酸扩增的有效工具，由于其灵敏、特异、快速等优点，在医学上已广泛应用与病毒、细菌病原体及遗传病、肿瘤的早期诊断。随着PCR技术的发展，特别是病毒或肿瘤的治疗监测、疾病的诊断、机体基因表达调控方面，不仅需要检测其存在是否
2012年3月27~28日，由北京食品学会、北京食品协会联合主办的 “第五届中国北京国际食品安全高峰论坛(CBIFS)”在北京国家会议中心隆重召开。本届大会主要内容由主论坛、专题研讨会和产品展示会三部分组成。邀请来自中国食品安全行业的政府官员、企业领导及科学技术领域的60余位知名专
1、非竞争内标定量PCR从细胞类标本中提取靶基因（核酸）时，同时会提取大量与靶基因无关的DNA或RNA；可以把这些靶基因无关DNA或 RNA作为内标与靶基因同步扩增，即在同样的反应条件下，在一个反应试管内同步扩增来自同一标本的一段靶基因序列和另一段无关的内标序列，不享受同一引物和引物结合位点，内
实时荧光PCR检测技术众所周知，PCR（聚合酶链反应）技术自从1985年问世以来，经过十几年的发展，已成为实验室的常规技术。它是现代分子生物学研究中不可缺少的手段，是一种极为敏感的放大系统。相比于传统的临床诊断方法，核酸诊断是分子水平上的诊断技术，可以弥补传统临床诊断方法的某些缺陷，比如，核酸诊断能
众所周知，PCR（聚合酶链反应）技术自从1985年问世以来，经过十几年的发展，已成为实验室的常规技术。它是现代分子生物学研究中不可缺少的手段，是一种极为敏感的放大系统。相比于传统的临床诊断方法，核酸诊断是分子水平上的诊断技术，可以弥补传统临床诊断方法的某些缺陷，比如，核酸诊断能直接揭示病原体的存在，
【实验原理】聚合酶链式反应（polymerase chain reaction）即PCR技术是美国Cetus公司人类遗传研究所的科学家K.B.Mullis于1983年发明的一种体外扩增特定基因或DNA序列的方法。PCR具有很高的特异性、灵敏度，在分子生物学、基因工程研究、某些疾病的诊断以及临床标
【实验对象】特定的DNA序列。【试剂与器材】 引物(primer)，根据需扩增的DNA设计相应的引物；TagDNA聚合酶； 10×PCR缓冲液(随酶一起购买)；5mmol/L dNTP贮备液(商品化产品)；DNA模板(需扩增的 DNA)；双蒸水；矿物油；PCR反应管；微量移液器；离心机及PCR仪
实时荧光定量PCR在人感染猪流感诊断中的作用彭年才12 张镇西1 兰邹然3 黄兵3 李红东2 李明2 苗保刚2 1西安交通大学生物医学分析技术与仪器研究所 2西安天隆科技有限公司 3山东省动物疾病预防与控制中心200
1.免疫学检查有些寄生虫病难以根据症状或体征及病原检查作出诊断，此时需采取免疫学方法辅助诊断。在感染早期、轻度感染、单性感染（仅有雄虫）、隐性感染或由于特殊的寄生部位而使病原检查十分困难以及在流行病学研究中，免疫诊断具有突出的优点。所用的抗原包括同种抗原、生活史某期特异性抗原或基因工程抗原。根据反应
血液分子生物学检验技术主要包括PCR技术、DNA测序技术、限制性片段长度多态性（RFLP）、转基因技术及基因芯片（DNA-chip）技术等分子生物学技术。目前这些技术已应用于血液病基因分析、基因诊断、白血病分型、指导治疗、判断预后和微小残留病检测等方面。（1）核酸分子杂交技术原理和方法1）South