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实验概要本实验介绍了PCR-ELISA的操作流程。PCR-ELISA是用免疫学方法检测PCR产物，这比常规用电泳方法及Southern blot要简便、省时，可同时处理大量标本，便于自动化。实验原理PCR-ELISA的原理是在做PCR扩增时应用生物素(biotin)标记的引物，这样PCR的产物就可结合到亲和素(avidin)包被的塑料板上，再用地高辛标记的探针与PCR产物杂交，然后就可以用抗地高辛的酶联反应检测。实验步骤1. PCR扩增按基本PCR技术做DNA扩增，只是所用的引物至少有一个是5′端用生物素标记的。通常可在DNA合成仪上直接合成5′端带生物素标记的引物。2. 地高辛标记的探针杂交将地高辛标记的DNA探针0.1μg稀释于90μl 50mmol/L TrisHCl，pH8.3,80mmol/L KCl中。取10μl PCR产物加到管中，加热至90℃，缓慢冷却至67℃。离心1s，置52℃水浴保温1h。3. 将杂交产物固定......阅读全文
一、选购洗板机的注意事项 1、关键指标：残留量：<2uL 能否提供可选择的洗板环境：洗板次数、条数、浸泡时间等是洗板机的基本参数，一般均可满足。建议选择具有底部冲洗、两点吸液等功能的仪器；底部冲洗有利于减小微孔板底部的干扰性吸附；两点吸液可大大降低微孔液体残留量