胞外转录反应
实验概要RNA聚合酶由一条多胜肽 (polypeptides)所构成,其在进行转录反应时所须辨认的启动子长度仅20bp左右,而且转录起始位置非常明确,转录效能良好,成了目前进行胞外转录反应时的最佳选择。要进行胞外转录反应时,仅需将目标基因次选殖 (subclone)至带有SP6,T3或T7启动子的转录载体,或者运用PCR技术在基因的一端加上SP6,T3或T7启动子的序列,即可运用对应的RNA聚合酶活性在试管内合成正义股或反义股RNA。以质体DNA为模版进行胞外转录反应前,应先用限制酶自目标基因的一端切开,限制酶内切好的质体DNA经phenol/chloroform萃取的后,即可用来进行胞外转录反应。主要试剂Plasmid DNA 酵解产物pBlueGus/HindIII 及pBlueGus/BamHI5×Transcription buffer (200 mM Tris-Cl,pH 8.0;40 mM ......阅读全文
植生生态所揭示胞外钙信号感受及植物抗旱新机制
植物学期刊Plant Cell近日在线发表了中科院上海生命科学研究院植物生理生态研究所植物分子遗传国家重点实验室离子组学研究组题为Arabidopsis histone methylase CAU1/PRMT5/SKB1 acts as an epigenetic suppressor
发现新型蛋白质和胞外多糖共同介导活性污泥菌胶团形成
活性污泥法是市政污水和工业废水净化处理的主流技术,超过90%的市政污水和50%的工业废水处理采用活性污泥法,而微生物菌胶团的形成是活性污泥法成功的关键。菌胶团形成菌所产生的胶质状胞外多聚物(简称EPS)是活性污泥菌胶团形成所必需的“黏合剂”。为此,中国科学院水生生物研究所邱东茹学科组对微生物菌胶
实现胞外衰老相关β半乳糖苷酶活性的快速灵敏检测
近日,中国科学院合肥物质科学研究院健康与医学技术研究所研究员杨良保课题组在胞外衰老相关β-半乳糖苷酶(SA-β-gal)活性灵敏检测方面取得新进展。相关研究成果发表在Analytical Methods上。 细胞衰老是生物衰老的潜在原因之一,也与原发性卵巢癌及多种衰老相关疾病相关。β-半乳糖苷
去极化和谷氨酸调节鲶鱼视网膜水平细胞胞外的碱化
视网膜是脊椎动物和一些头足纲动物眼球后部的一层非常薄的细胞层,它将光转化为神经信号,光受体的突触终端使水平和两极细胞互相联系。神经递质谷氨酸(Glu)的释放可能调节光感受的过程,这个过程的机制一直存在争论。美国卫斯理大学和MBL的科学家以鲶鱼视网膜水平细胞为实验材料,使用非损伤微测技术测定了多种物质
不同的胞外蛋白酶活性造成肿瘤特异的血清多肽组表...6
方法 血清样品制备 无已知恶性肿瘤的健康志愿者(男女均用,年龄23-56岁,见补充表1)和诊断为前列腺癌、乳腺癌或膀胱癌的患者的血清按照标准临床操作规程取自Sloan-Kettering纪念癌症中心[29],有关患者的年龄、性别及病理诊断的详情参见补充表1。所有采血操作均获得MSKCC制度审查和
不同的胞外蛋白酶活性造成肿瘤特异的血清多肽组表...3
特征选择发现68个肽离子特征可区别3个癌症组人群与正常组 对本技术的预期临床应用前景进行分析后,我们认为难以将取自不同时间及不同地点的人群标本的651个特征峰进行关联分析。因此,我们采用判别分析进行了特征选择,以选出差别最大的峰。分别将3组癌症标本与对照组的196个峰进行Mann-Whitney
不同的胞外蛋白酶活性造成肿瘤特异的血清多肽组表...5
癌症特异性肽段包括选自几种不同序列簇的肽段 图5中列出了69种血清肽段(匹配信息见图6)。其中61个对于至少一种癌症具有明显的MALDI-TOF MS离子标记能力(校正P < 0.0002),分别标成蓝色(前列腺癌)、绿色(膀胱癌)和红色(乳腺癌)。结果表明,三种癌症的特征肽段分别为前列
不同的胞外蛋白酶活性造成肿瘤特异的血清多肽组表...4
肽段标记物的序列簇来源于高丰度的血浆多肽和蛋白质前体 三个序列簇来源于天然产生的血浆多肽纤维蛋白肽A (FPA)、补体C3f和缓激肽,这些肽段分别产生自或是体内内源性途径早期血浆蛋白的胞外蛋白降解过程(缓激肽产生于高分子量激肽原被激肽释放酶降解的过程中),或产生于血浆制备过程中(纤维蛋白
不同的胞外蛋白酶活性造成肿瘤特异的血清多肽组表...1
不同的胞外蛋白酶活性造成肿瘤特异的血清多肽组表达模式Josep Villanueva, David R. Shaffer, John Philip, Carlos A. Chaparro, Hediye Erdjument-Bromage,Adam B. Olshen, Martin Fle
不同的胞外蛋白酶活性造成肿瘤特异的血清多肽组表...2
图2. 3个癌症组和正常组受试者血清多肽表达谱数据选择和比较分析。 (A) 各个癌症组分别与对照组进行Mann-Whitney U检验。只有校正P值小于0.00001的峰才能进入第二次筛选(峰强度中位数值> 500单位):如果可以通过1个癌症组或对照组的阈值,则此峰入选。(B) Venn图显示一
南京地理所湖泊水华蓝藻胞外聚合物环境效应研究取得进展
蓝藻胞外聚合物(EPS)是蓝藻细胞在生长繁殖过程中产生的一类高分子有机质,主要包含蛋白质、碳水化合物、脂类、腐殖酸类等物质,并富含羧基、氨基、脂基等有机官能团。由于EPS的多组分特征及多官能团结构,使得其极易与水体中污染物发生界面吸附络合作用。研究EPS与这些污染物的作用特征及机理,对于探讨污染
加州大学钟声团队:用“一滴血”检测胞外RNA液体活检方法
细胞外RNA(exRNA)作为一种新型液体活检标志物,因其广谱性及多样性近些年引起了科学家的广泛关注。此前研究发现,包括miRNA在内的小exRNA与某些疾病的临床治疗反应相关,但关于其他类型exRNAs的存在情况及其临床相关性研究仍十分有限。此外,血清中的exRNA经过提取步骤后,含量往往非常
研究揭示植物胞外囊泡运输miRNA跨界调控病毒感染虫媒的分子机制
大约 80% 的植物病毒依赖媒介昆虫进行传播,媒介昆虫体内的病毒稳态依赖于病毒载量与昆虫免疫系统之间的动态平衡,从而确保虫媒的生存和病毒的高效传播。小RNA介导的RNA干扰(RNAi)是真核生物中普遍存在的免疫调控通路,其中miRNA是一类长度约19-25 nt的非编码小RNA,主要参与基因转录
植物胞外ATP信号转导通过质膜NADPH氧化酶和Ca2+通道进行...
植物胞外ATP信号转导通过质膜NADPH氧化酶和Ca2+通道进行传递ATP是一种普遍的胞内能量,也作为胞外信号物质。胞外的ATP调节高等植物的生长和适应性。虽然胞外的ATP能够提高植物胞质中的自由Ca2+,但是这种机制一直不清楚。英国剑桥大学的科学家使用非损伤微测技术等手段,研究了拟南芥根对胞外AT
关于基因转录的转录因子介绍
转录因子(transcription factor)是起调控作用的反式作用因子。转录因子是转录起始过程中RNA聚合酶所需的辅助因子。真核生物基因在无转录因子时处于不表达状态,RNA聚合酶自身无法启动基因转录,只有当转录因子(蛋白质)结合在其识别的DNA序列上后,基因才开始表达。转录因子的结合位点
转录图谱的转录图谱的意义
在于它能有效地反应在正常或受控条件中表达的全基因的时空图。通过这张图可以了解某一基因在不同时间不同组织、不同水平的表达;也可以了解一种组织中不同时间、不同基因中不同水平的表达,还可以了解某一特定时间、不同组织中的不同基因不同水平的表达。人类基因组是一个国际合作项目:表征人类基因组,选择的模式生物的D
RNA复制、转录与逆转录
转录是以DNA为模板合成RNA的过程,经过转录DNA分子中的贮存信息传递到RNA分子中,再由mRNA做为模板合成蛋白质分子。逆转录也是从RNA的一个特定位置开始的,以RNA分子中的一条链为模板,在逆转录酶的作用下,以四种脱氧核苷酸为原料,合成方向仍是5'→3',完成cDNA的合成。大
RNA的转录和逆转录
转录是以DNA为模板合成RNA的过程,经过转录DNA分子中的贮存信息传递到RNA分子中,再由mRNA做为模板合成蛋白质分子。逆转录也是从RNA的一个特定位置开始的,以RNA分子中的一条链为模板,在逆转录酶的作用下,以四种脱氧核苷酸为原料,合成方向仍是5'→3',完成cDNA的合成。大
胞外信号通过ERK激酶磷酸化Lin28调控P19细胞增殖及分化
2月8日,国际学术期刊《生物化学杂志》(Journal of Biological Chemistry)在线发表了中国科学院生物化学与细胞生物学研究所高大明研究组题为Extracellular Signal-regulated Kinases (ERKs) Phosphorylate Lin28
红锥蝽卵子发生过程中胞外H+转运动力学的研究
关键词:H+, 离子选择电极(ion-selective probe) , 卵子发生(oogenesis)参考文献:Bjornsson CS, et al. The Journal of Experimental Biology,2004, 207, 2835-2844 全文下载:http://je
胞质分裂
胞质分裂是在二个新的子核之间形成新细胞壁,把一个母细胞(mother cell)分隔成二个子细胞(daughter cell)的过程。在一般情况下,核分裂和胞质分裂在时间上是紧接着的,但是在有些情况下,核分裂后不一定立即进行胞质分裂,而是延迟到核经过多次重复分裂后再形成细胞壁,例如经常在
胞质面
中文名称胞质面英文名称cytosolic face定 义质膜朝向细胞质的一面。应用学科细胞生物学(一级学科),细胞结构与细胞外基质(二级学科)
关于体外转录的转录条件介绍
转录模板必须满足: 1. 在基因组全长克隆过程中,在正向引物5‘末端添加T7启动子序列; 2. 以T7启动子作为体外转录启动子,在启动子后面靶位序列连续带有3个G,转录效率最 高; 3. 在正向引物5/端添加一个帽子G,有利于提高体外转录RNA分子的侵染活性。
转录因子的转录调控区的介绍
同一家族的转录因子之间的区别主要在转录调控区。 转录调控区包括转录激活区(transcription activation domain)和转录抑制区(transcription repression domain)二种。近年来,转录的激活区被深入研究。它们一般包含DNA结合区之外的30-10
荧光法研究啶虫脒与活性污泥胞外聚合物相互作用获进展
活性污泥处理法是污水处理厂的常用废水处理技术。活性污泥能够产生大量微生物胞外聚合物(EPS),其对污染物的去除具有重要作用。根据其物理形态,EPS可划分为溶解态和紧密结合态两种类型。已有研究表明,活性污泥EPS能够通过吸附、络合作用,有效去除废水中的重金属离子。但是,EPS与有机污
STTT:NK细胞来源的胞外体miR12493p改善实验型2型糖尿病
2型糖尿病(T2D)是最常见的代谢性糖尿病,其特征是高血糖(也称为高血糖)和胰岛素抵抗。遵循高脂肪饮食的人特别容易患肥胖症,这显然是导致人类胰岛素抵抗的最常见原因。胰岛素抵抗的症状包括脂肪细胞、肌肉细胞和肝细胞对胰岛素的敏感性降低,以及胰岛素信号的失调和葡萄糖、脂肪和蛋白质的代谢紊乱,最终导致T
髋外旋外展试验的概述
髋外旋外展试验是在患者仰卧位,屈曲膝关节,按压关节,检查侧骶髂关节处有无出现疼痛即为阳性。用于诊断骶髂关节病变。
关于转录因子的转录抑制区的介绍
也是转录因子调控表达的重要位点,但是对其作用机理研究尚不深入。可能的作用方式有三种:1)与启动子的调控位点结合,阻止其它转录因子的结合;2)作用于其它转录因子,抑制其它因子的作用;3)通过改变DNA的高级结构阻止转录的发生。 转录因子必须在核内作用,才能起到调控表达的目的。因此,转录因子上的核
气单胞菌属与邻单胞菌属
(一)气单胞菌属 气单胞菌属广泛分布于自然界,可从水源、土壤以及人的粪便中分离。本属细菌有的种可引起人类腹泻等多种感染。 1.生物学特性 (1)形态染色:革兰阴性短杆菌,大小为(1~4)μm×(0.1~1)/μm,菌体两端钝圆,单极鞭毛,运动极为活泼(除杀鲑气单胞菌外)。无芽胞,有窄的荚膜
核转录分析
实验材料 cDNA 0.45um 硝酸纤维素 尼龙膜 酵母 tRNA 试剂、试剂盒 PBS