胞外转录反应

实验概要RNA聚合酶由一条多胜肽 (polypeptides)所构成,其在进行转录反应时所须辨认的启动子长度仅20bp左右,而且转录起始位置非常明确,转录效能良好,成了目前进行胞外转录反应时的最佳选择。要进行胞外转录反应时,仅需将目标基因次选殖 (subclone)至带有SP6,T3或T7启动子的转录载体,或者运用PCR技术在基因的一端加上SP6,T3或T7启动子的序列,即可运用对应的RNA聚合酶活性在试管内合成正义股或反义股RNA。以质体DNA为模版进行胞外转录反应前,应先用限制酶自目标基因的一端切开,限制酶内切好的质体DNA经phenol/chloroform萃取的后,即可用来进行胞外转录反应。主要试剂Plasmid DNA 酵解产物pBlueGus/HindIII 及pBlueGus/BamHI5×Transcription buffer (200 mM Tris-Cl,pH 8.0;40 mM ......阅读全文

CCAAT转录因子

中文名称CCAAT转录因子英文名称CCAAT transcription factor定  义可与启动子中的CCAAT元件发生特异性相互作用的转录因子。应用学科细胞生物学(一级学科),细胞遗传(二级学科)

核转录分析

实验材料 cDNA0.45um 硝酸纤维素 尼龙膜 酵母 tRNA试剂、试剂盒 PBS NP-40 裂解缓: 20XSSC LNaOH 甘油储存缓冲液 10X 转录缓冲液 核苷酸:ATPGTPCTP 200uCi「α32P]-UTP 10XSET 蛋占酶 K 无 RNase 的 DNase

RNA-反转录

 实验材料 poly(A)+RNA反转录酶鼠源反转酶 或禽源反转录酶试剂、试剂盒 oligo(dT)12-18 lmol LTris-Cl 1mol LTris-Cl lmol LKC1 25 mmol LMgCl2 dNTP 混合物 0.lmol LDTT RNasin实验步骤 一材料与设备1)p

辅助转录因子

中文名称辅助转录因子英文名称ancillary transcription factor定  义协助RNA聚合酶同启动子结合,并促进已结合的RNA聚合酶启动转录速率的转录因子。应用学科细胞生物学(一级学科),细胞遗传(二级学科)

RNA-反转录

            实验材料 poly(A)+RNA 反转录酶 鼠源反转酶  或禽源反转录酶 试剂、试剂盒 oligo

核转录分析

            实验材料 cDNA 0.45um 硝酸纤维素 尼龙膜 酵母 tRNA 试剂、试剂盒 PBS

转录因子组成

真核生物在转录时往往需要多种蛋白质因子的协助。一种蛋白质是不是转录结构的一部分往往是通过体外系统看它是否是转录起始所需要的。一般这些促成转录起始所需的转录结构包括三个重要的组成部分:亚基RNA聚合酶的亚基,它们是转录必须的,但并不对某一启动子有特异性。复合物某些转录因子能与RNA聚合酶结合形成起始复

转录的特点

转录时,细胞通过碱基互补的原则来生成一条带有互补碱基的mRNA,通过它携带密码子到核糖体中可以实现蛋白质的合成。与DNA的复制相比,转录有很多相同或相似之处,亦有其自己的特点。转录中,一个基因会被读取并复制为mRNA。就是说,以特定的DNA片段作为模板,以DNA依赖的RNA聚合酶作为催化剂,合成前体

转录组测序与转录表达谱测序的异同

转录组测序可以得到特定条件下所有mRNA转录本的丰度信息,从而发现新的转录本和可变剪接体基因表达谱(gene expression profile):指通过构建处于某一特定状态下的细胞或组织的非偏性cDNA文库,大规模cDNA测序,收集cDNA序列片段、定性、定量分析其mRNA群体组成,从而描绘该特

转录组测序和全转录组测序的区别

全转录组广义上是指细胞在特定状态下所能转录出来的 所有RNA的总和,包括mRNA和非编码RNA 。借助高通量测序技术,可以全面获取样本中转录产物信息,结合竞争性内源RNA ( ceRNA)机制, 进行联合分析,深入挖掘转录水平调控网络。转录组测序的研究对象为特定细胞在某一功能状态下所能转录出来的所有

RNA的转录与逆转录相关介绍

转录是以DNA为模板合成RNA的过程,经过转录DNA分子中的贮存信息传递到RNA分子中,再由mRNA做为模板合成蛋白质分子。逆转录也是从RNA的一个特定位置开始的,以RNA分子中的一条链为模板,在逆转录酶的作用下,以四种脱氧核苷酸为原料,合成方向仍是5'→3',完成cDNA的合成。大

胞化学基础​氢键

氢原子与电负性大的原子X以共价键结合,若与电负性大、半径小的原子Y(O F N等)接近,在X与Y之间以氢为媒介,生成X-H…Y形式的一种特殊的分子间或分子内相互作用,称为氢键。[X与Y可以是同一种类分子,如水分子之间的氢键;也可以是不同种类分子,如一水合氨分子(NH3·H2O)之间的氢键]。

铜绿假单胞菌

一、细菌的传播与致病    假单胞菌普遍存在,而在潮湿环境尤甚。铜绿假单胞菌是存在于人类中最常见的一种假单胞菌,它偶尔可在腋下和肛门生殖道周围的正常皮肤,但除非给服抗生素,在粪中甚为罕见。该菌通常伴随毒力较强的细菌存在于病灶中,但偶尔也可单独引起暴露于外部的组织感染.假单胞菌感染通常发生于医院内。洗

单细胞数据挖掘算法方面取得新进展

图 SEVtras高效识别单细胞转录组数据中的胞外小囊泡  在国家自然科学基金项目(批准号:32025009、32130020等)资助下,中国科学院北京生命科学研究院赵方庆团队在单细胞数据挖掘算法方面取得新进展,研究成果以“SEVtras识别单细胞转录组中液滴分辨率的胞外小囊泡(SEVtras de

原代外植

            实验方法原理 将组织切碎并浸洗,组织块接种于培养瓶或皮氏培养皿的表面,加入少量含高浓度血清(40 %~50 % ) 的培养基,表面张力使标本保持原位,直到它们自发地贴附于表面,随后细胞开始生长。

原代外植

实验方法原理将组织切碎并浸洗,组织块接种于培养瓶或皮氏培养皿的表面,加入少量含高浓度血清(40 %~50 % ) 的培养基,表面张力使标本保持原位,直到它们自发地贴附于表面,随后细胞开始生长。试剂、试剂盒生长培养基                                        

原代外植

实验方法原理将组织切碎并浸洗,组织块接种于培养瓶或皮氏培养皿的表面,加入少量含高浓度血清(40 %~50 % ) 的培养基,表面张力使标本保持原位,直到它们自发地贴附于表面,随后细胞开始生长。试剂、试剂盒生长培养基皮氏平皿仪器、耗材镊子手术刀移液器离心管容器实验步骤1. 将组织移入新鲜、无菌 BSS

信使RNA的反转录酶与反转录过程

  定义:以反义RNA为模版,通过反转录酶,进行的RNA转录  1.概念反转录是以RNA为模板合成DNA的过程,也称逆转录。这是DNA生物合成的一种特殊方式。  2.反转录酶与反转录过程  反转录过程由反转录酶催化,该酶也称依赖RNA的DNA聚合酶(RDDP),即以RNA为模板催化DNA链的合成。合

RNA复制的转录与逆转录的过程介绍

  转录是以DNA为模板合成RNA的过程,经过转录DNA分子中的贮存信息传递到RNA分子中,再由mRNA做为模板合成蛋白质分子。逆转录也是从RNA的一个特定位置开始的,以RNA分子中的一条链为模板,在逆转录酶的作用下,以四种脱氧核苷酸为原料,合成方向仍是5'→3',完成cDNA的合成

髋外旋外展试验的注意事项

  不合宜人群:无。  检查前禁忌:无特殊禁忌。  检查时要求:检查放松心情,应该积极面对,并积极配合检查。

髋外旋外展试验的临床意义

  异常结果:检查结果为阳性,即被检查侧骶髂关节处出现疼痛即为阳性,说明有骶髂关节病变。  需要检查的人群:骶髂关节疼痛的人群。

腭部外周神经外胚瘤病例报告

 原始神经外胚瘤(primitive neuroectodermal tumor,PNET)是起源于多能神经嵴细胞的恶性程度极高的肿瘤。是Ewing's的家族肿瘤的成员之一,临床少见,可分为外周型和中枢型两类,其中外周原始神经外胚瘤(peripheral primitive neuroectoder

髋外旋外展试验的检查过程

  患者仰卧位,被检查一侧下肢膝关节屈曲,髋关节屈曲、外展、外旋,将足架在另一侧膝关节上,使双下肢呈“4”字形。检查者一手放在屈曲的膝关节内侧,另一手放在对侧髂前上棘前面,然后两手向下按压。

简述胞浆型抗中性粒细胞胞浆抗体的原理

  抗中性粒细胞胞浆抗体(mllineutrophil cytoplasmic antibodies,ANCA)是指与中性粒细胞及单核细胞胞浆成分发生反应的抗体。用中性粒细胞作为抗原片,待检血清中的抗中性粒细胞胞浆抗体与中性粒细胞胞浆结合,洗片后加入荧光素标记的抗人IgG,反应后洗片,用荧光显微镜观

关于胞浆型抗中性粒细胞胞浆抗体的简介

  抗中性粒细胞胞浆抗体(mllineutrophil cytoplasmic antibodies,ANCA)是指与中性粒细胞及单核细胞胞浆成分发生反应的抗体。对血管炎的诊断、分类、疗效观察、病情活动、复发和预后具有重要意义。根据间接免疫荧光法,可将ANCA分为胞浆型(cANCA)、核周型(pAN

转录物的概念

中文名称转录物英文名称transcript定  义在DNA模板上由RNA聚合酶催化转录生成的mRNA。应用学科遗传学(一级学科),分子遗传学(二级学科)

什么是转录作图?

中文名称转录作图英文名称transcription mapping定  义标明转录物序列在基因组上的位置。应用学科遗传学(一级学科),基因组学(二级学科)

转录图谱的原理

所有生物性状和疾病都是由结构或功能蛋白质决定的,而已知的所有蛋白质都是由mRNA编码的,这样可以把mRNA通过反转录酶合成cDNA或称作EST的部分的cDNA片段,也可根据mRNA的信息人工合成cDNA或cDNA片段,然后,再用这种稳定的cDNA或EST作为“探针”进行分子杂交,鉴别出与转录有关的基

转录水平的调控

该模型认为在整合基因的5’端连接着一段具有高度专一性的DNA序列,称之为传感基因。在传感基因上有该基因编码的传感蛋白。外来信号分子和传感蛋白结合相互作用形成复合物。该复合物作用于和它相邻的综合基因组,亦称受体基因,而转录产生mRNA,后者翻译成激活蛋白。这些激活蛋白能识别位于结构基因(SG) 前面的

转录因子活性ELISA

转录因子活性ELISA是建立在ELISA基础上的高灵敏度的检测方法,比EMSA的灵敏度高l0倍,在5h内就能完成。不涉及放射性和凝胶电泳,安全简便,而且这种微孔板的形式能同时检测1—96个样品。ArrayStarTM转录因子活性ELISA试剂盒可以快速、灵敏地检测细胞核提取物中转录因子的DNA结合活