胞外转录反应

实验概要RNA聚合酶由一条多胜肽 (polypeptides)所构成,其在进行转录反应时所须辨认的启动子长度仅20bp左右,而且转录起始位置非常明确,转录效能良好,成了目前进行胞外转录反应时的最佳选择。要进行胞外转录反应时,仅需将目标基因次选殖 (subclone)至带有SP6,T3或T7启动子的转录载体,或者运用PCR技术在基因的一端加上SP6,T3或T7启动子的序列,即可运用对应的RNA聚合酶活性在试管内合成正义股或反义股RNA。以质体DNA为模版进行胞外转录反应前,应先用限制酶自目标基因的一端切开,限制酶内切好的质体DNA经phenol/chloroform萃取的后,即可用来进行胞外转录反应。主要试剂Plasmid DNA 酵解产物pBlueGus/HindIII 及pBlueGus/BamHI5×Transcription buffer (200 mM Tris-Cl,pH 8.0;40 mM ......阅读全文

tRNA转录加工过程

主要加工方式是切断和碱基修饰。真核生物tRNA前体一般无生物学特性,需要进行加工修饰。加工过程包括:(1)剪切和拼接tRNA前体在tRNA剪切酶作用下,切成一定大小的分子。大肠杆菌RnaseP特异切割tRNA前体5′旁侧序列,3′-核酸内切酶如RnaseF可将tRNA前体3′端一段序列切下来。Rna

RNA-大量转录合成

实验材料 模板 DNA 或质粒试剂、试剂盒 TE TE 饱和酚 氯仿异内醇 3mol LNaAc 无水乙醇 5X 转录缓冲液 lOOmmoL LDTT RNasin rATPrGTPrUTPrCTP SF6T3 或 T7RNA 聚合酶 异戊醇 DNase 7.5mol L 乙酸铵 无水乙醇 乙醇实验

转录的过程介绍

在转录过程中,DNA模板被转录方向是从3′端向5′端;RNA链的合成方向是从5′端向3′端。RNA的合成一般分两步,第一步合成原始转录产物(过程包括转录的启动、延伸和终止);第二步转录产物的后加工,使无生物活性的原始转录产物转变成有生物功能的成熟RNA。但原核生物mRNA的原始转录产物一般不需后加工

转录物的概念

中文名称转录物英文名称transcript定  义在DNA模板上由RNA聚合酶催化转录生成的mRNA。应用学科遗传学(一级学科),分子遗传学(二级学科)

RNA-标准转录反应

实验材料 模板 DNA 或质粒试剂、试剂盒 TE 异丙醇 3mol LNaAc 无水乙醇 5×转录缓冲液 l00 mmol L DTT RNasin rATPrGTPrUTP 各 2.5 mmol L [α42P] rCTP SPGT3 或 T7RNA 聚合酶 TE-饱和的酚氯仿异戊醇 DN

3.3-核转录分析

核转录失控分析时,在体外将细胞核分离出来,然后在放射性同位素标记的核苷酸存在下进行转录,所合成的 KNA 均因掺入同位素而被标记,此混合 RNA 与固定在硝酸纤维素滤膜 h 的某一特定甚因的 DNA 探针杂交,就可以反映出该基因的转录狀态和转录速率。实验材料cDNA0.45um 硝酸纤维素 尼龙膜酵

转录图谱的定义

转录图谱是在识别基因组所包含的蛋白质编码序列的基础上绘制的结合有关基因序列、位置及表达模式等信息的图谱。在人类基因组中鉴别出占具2%~5%长度的全部基因的位置、结构与功能,最主要的方法是通过基因的表达产物mRNA反追到染色体的位置。

转录的定义介绍

转录(Transcription)是遗传信息从DNA流向RNA的过程。即以双链DNA中的确定的一条链(模板链用于转录,编码链不用于转录)为模板,以A、U、C、G四种核糖核苷酸为原料,在RNA聚合酶催化下合成RNA的过程。作为蛋白质生物合成的第一步,进行转录时,一个基因会被读取并被复制为mRNA,即特

什么是转录中止?

转录终止: 当RNA链延伸到转录终止位点时,RNA聚合酶不再形成新的磷酸二酯键,RNA-DNA杂合物分离,转录泡瓦解,DNA恢复成双链状态,而RNA聚合酶和RNA链都被从模板上释放出来,这就是转录的终止(termination。

转录组测序原理

而转录组测序即是利用高通量测序技术,将细胞或组织中的全部或部分mRNA, miRNA, lnc RNA 进行测序分析的技术。通过RNA-seq,也就是转录组测序,可以帮助我们了解各种比较条件下所有基因的表达差异包括:正常组织与肿瘤组织;药物治疗前后的表达差异;发育过程中,不同发育阶段,不同组织的表达

RNA-大量转录合成

            实验材料 模板 DNA 或质粒 试剂、试剂盒 TE   TE 饱和酚   氯仿

RNA-标准转录反应

            实验材料 模板 DNA 或质粒 试剂、试剂盒 TE 异丙醇 3mol LNaAc

转录物的定义

中文名称转录物英文名称transcript定  义在DNA模板上由RNA聚合酶催化转录生成的mRNA。应用学科遗传学(一级学科),分子遗传学(二级学科)

共转录的定义

中文名称共转录英文名称cotranscription定  义(1)原核生物的基因以多顺反子或操纵子形式存在,被转录为一个共同的信使核糖核酸(mRNA)。(2)通过基因操作使不同的基因同时在细胞或组织中一起转录。应用学科生物化学与分子生物学(一级学科),基因表达与调控(二级学科)

什么是转录作图?

中文名称转录作图英文名称transcription mapping定  义标明转录物序列在基因组上的位置。应用学科遗传学(一级学科),基因组学(二级学科)

rRNA转录加工过程

主要加工方式是切断。真核细胞的rRNA基因(rDNA)属于一种被称为丰富基因(redundant gene)族的DNA的序列,即染色体上一些相似或完全一样的纵列串联基因(tandem gene)单位的重复。由不能转录的间隔区(spacer)把这些单位分隔开。在这里,间隔区与内含子是不同的概念。在分类

合胞体的定义

含有由一层细胞膜包绕的多个核的一团细胞质,这通常是由于发生了细胞融合或一系列不完全细胞分裂周期所致。

细菌的芽胞染色

 (一)实验目的:学习细菌的芽胞染色法  (二)实验原理:细菌的芽胞具有厚而致密的壁,透性低,不易着色,若用一般染色法只能使菌体着色而芽胞不着色(芽胞呈无色透明状)。芽胞染色法就是根据芽胞既难以染色而一旦染上色后又难以脱色这一特点而设计的。所有的芽胞染色法都基于同一个原则:除了用着色力强的染料外,还

细菌的芽胞染色

    (一)实验目的:学习细菌的芽胞染色法  (二)实验原理:细菌的芽胞具有厚而致密的壁,透性低,不易着色,若用一般染色法只能使菌体着色而芽胞不着色(芽胞呈无色透明状)。芽胞染色法就是根据芽胞既难以染色而一旦染上色后又难以脱色这一特点而设计的。所有的芽胞染色法都基于同一个原则:除了用着色力强的染料

胞质融合的概念

中文名称胞质融合英文名称plasmogamy定  义两个或多个细胞在细胞核未发生融合情况下,发生的原生质融合的现象。应用学科遗传学(一级学科),细胞遗传学(二级学科)

鼻疽假单胞菌简介

  是马和人鼻疽的病原体,又名鼻疽杆菌,可经口、呼吸道或伤口感染。在实验室采用的血清学诊断方法中,以补体结合反应为最普遍,其特异性也最高。对马类感染的诊断可采用(马)鼻疽菌素(mallein)进行变态反应试验。人的鼻疽常因与开放性的鼻疽患畜直接接触而引起,或在实验室因操作不慎而感染,过去常致死,现可

胞苷的物理参数

熔点 210.0~220.0℃比旋度: +31~+35°干燥失重:≤0.5%炽灼残渣:≤0.1%重金属:≤10ppm含量(UV):98.0~101.5%纯度(HPLC):≥99.0%

什么是胞内运输?

胞内运输(intracellular transport)是真核生物细胞内膜结合细胞器与细胞内环境进行的物质交换。包括细胞核、线粒体、叶绿体、溶酶体、过氧化物酶体、高尔基体和内质网等与细胞内的物质交换。

胞苷的用途说明

药品合成原料和生化试剂。用于CTP、CDP-胆碱、2′、3′-二去氧胞苷、阿糖胞苷等的制备。贮存条件:室温密封干燥保存危险说明安全等级:S24/25

什么是胞质分裂?

胞质分裂(bāo zhì fēn liè)意思是有丝分裂或减数分裂之后发生的细胞质的分裂。在细胞分裂末期时,通常于核分裂之后接着发生的胞质体(cytoplast)的分裂。有时只把胞质分裂称为细胞分裂,但是“胞质分裂”(cytokine-sis)与“细胞分裂”(cell division)必须加以区别

胞间运输的定义

中文名称胞间运输英文名称intercellular transport定  义物质通过细胞连接或胞间连丝的移动过程。应用学科细胞生物学(一级学科),细胞生理(二级学科)

赖胞苷的定义

中文名称赖胞苷英文名称lysidine定  义转移核糖核酸中发现的一种稀有核苷。应用学科生物化学与分子生物学(一级学科),核酸与基因(二级学科)

什么是胞质分裂?

胞质分裂(bāo zhì fēn liè)意思是有丝分裂或减数分裂之后发生的细胞质的分裂。在细胞分裂末期时,通常于核分裂之后接着发生的胞质体(cytoplast)的分裂。有时只把胞质分裂称为细胞分裂,但是“胞质分裂”(cytokine-sis)与“细胞分裂”(cell division)必须加以区别

胞内共生的定义

中文名称胞内共生英文名称endosymbiosis定  义一种生物以互利的形式共生在另一种生物细胞中的现象。如原生动物细胞中的共生细菌。应用学科细胞生物学(一级学科),细胞生理(二级学科)

流式胞内染色protocol

一、surface marker染色1、收获细胞,0.5-1x10e6/tube,用FACS Buffer 2ml洗涤一次,倾倒后滤纸吸干管口液体。2、加入预先配置好的你需要染的surface marker的抗体混合液(即CD3,CD4,CD8抗体mixture),充分混匀,室温下孵育20分钟。3、