从患有利什曼病的狗的结肠中分离细胞并做流式细胞分析
实验概要犬感染寄生虫病时即使没有明显的病理变化，但对整个消化道的负担是显而易见的。本实验中，我们从患有利什曼病的犬肠道中分离固有层细胞，以进一步探讨肠道内的寄生虫与内脏感染发病是否密切相关。实验原理取狗的活检样本，用胶原酶II培养。向细胞悬液中加入细胞表面和细胞内标记物。这些标记物由以前对利什曼病肠系膜固有层细胞的研究所确定。标记物的确定依据是，在这些感染利什曼病的的组织，特别是持续感染的组织中，肠道感染不会引起病变。主要试剂1. 磷酸盐缓冲液(PBS -氯化钠; KH2PO4的Na2HPO4和蒸馏水)2. HBSS3. 不完整/完整的(小牛血清)RPMI培养基4. 肝素钠钠盐(HEPES，最低99.5％，Sigma -Aldrich公司)5. Ⅱ型胶原酶6. 皂素(Sigma公司，＃S-7900)7. BSA(牛血清白蛋白)8. Azida(2mM)主要设备1. 剪刀2. 钳子3. 培养皿4. 1.5，2.0，15和50毫升管......阅读全文
大鼠肝细胞分离实验
实验方法原理 经肝门静脉或肝门静脉分支插管，用无钙缓冲液灌洗肝 15 min，再用酶溶液灌洗 15 min。收集和洗涤细胞，计数有活力的肝细胞。试剂、试剂盒 L-15 Leibovitz 培养液Ham F12 培养液胞培养液HMM SF无钙 HEPES 缓冲液胶原蛋白酶液5% 戊巴比妥钠肝素仪器、耗
淋巴细胞的分离
实验方法原理 通过右旋糖酐促沉降作用去除红血细胞后，将枸橼酸或肝素抗凝的全血或血浆层加在致密的 Ficoll-Hypaque 层上面。离心后，大部分淋巴细胞位于 Ficoll-Hypaque 和血浆之间的界面。
皮肤干细胞的分离
皮肤干细胞的分离主要利用发现的相对特异的表面标志（如整合素家族成员和角蛋白家族成员）结合流式细胞术进行。
什么是原代细胞分离？
原代细胞分离是指使用酶、螯合剂（常用EDTA）以及机械方法处理动物组织，使其分散为单细胞悬液样品，后续在适当的培养体系下使分离的原代细胞进行生存、生长和繁殖的过程。针对不同物种的不同组织类型，其具体的操作流程也要进行调整，常规原代细胞分离流程为取样→预处理→分离处理→过滤清洗→后处理。
细胞膜怎么分离
针对于动物组织及细胞，目前有invent 的SM-005细胞质膜及组分分离试剂盒，不需要超高速离心，也不需要杜恩斯匀浆，只需要台式离心机，5次离心，就可以将细胞或组织分成细胞核，细胞浆，细胞器和细胞质膜。组织只需20mg，细胞2x10^7.
大鼠肝细胞分离实验
实验方法原理经肝门静脉或肝门静脉分支插管，用无钙缓冲液灌洗肝 15 min，再用酶溶液灌洗 15 min。收集和洗涤细胞，计数有活力的肝细胞。试剂、试剂盒L-15 Leibovitz 培养液Ham F12 培养液胞培养液HMM SF无钙 HEPES 缓冲液胶原蛋白酶液5% 戊巴比妥钠肝素仪器、耗材聚
巨噬细胞的分离方法
腹腔中分离 1、取6周左右的小鼠（或600克左右的豚鼠，或3公斤左右的家兔），剃去腹部的毛并消毒。腹腔注射1ml（豚鼠20ml，家兔200ml）无菌的液体石蜡或巯基乙酸肉汤或4%淀粉肉汤。3～4天以后收集腹腔细胞。 2、如要收集腹腔静置巨噬细胞，不注射刺激物，直接从一步开始。放血处死动物，以
细胞器分离原理
细胞器的分离,一般采用差速离心法,此法是利用细胞各组分质量大小不同,在离心管不同区域沉降的原理,分离出所需组分,分离得到的细胞器,其纯度可采用电子显微镜法、免疫学法或测定标志酶活力法进行鉴定.细胞器（organelle）一般认为是散布在细胞质内具有一定形态和功能的微结构或微器官。但对于“细胞器”这一
淋巴细胞的分离
取肝素抗凝血1ml加Hanks 液1：1 稀释后，沿管壁徐徐滴流叠加盛有2ml淋巴细胞分离液的试管内（注意勿与分离液混合，然后2000r/min 水平离心20min，管内分为4 层，自上而下依次为血浆，单个核细胞，颗粒白细胞、红细胞（图2—1）。用毛细管伸至单个核细胞层中（位于细胞分离液与血浆的界面
辐射法分离细胞集落
实验方法原理将培养瓶倒置放于 X 射线机或 60Co 源下，用铅块遮蔽需要的集落。实验材料D-PBS 0.25%胰蛋白酶
新鲜组织分离原代细胞
新鲜手术取得或冻存的组织于37 ℃ 快速复温，原代细胞培养工作液清洗3次，尽量修剪去除纤维组织，将组织块剪成约1 mm3大小的小块，弯头吸管吸取组织块均匀种植于75 cm2 培养瓶瓶底，瓶内加入少量原代细胞培养工作液，小心翻转培养瓶使组织块黏附于瓶底，置于37 ℃、5% CO2培养箱中培养6-8
血细胞分离技术（一）
采血 （一）材料与试剂1．抗凝剂（1）肝素：肝素是含硫酸基的粘多糖，常用其钠盐或钾盐，它能阻止凝血酶原转化为凝血酶，进而抑制纤维蛋白原形成纤维蛋白，从而阻止血液凝固。常用的肝素溶液浓度为1 000U/ml，市售肝素多为100U~126U／mg。（2）乙二胺四乙酸（EDTA）：是一种螯合剂。用生理
悬浮细胞克隆的分离
经验交流（0）实验方法原理用加样枪或 Pasteur 吸管吸取集落，移至培养瓶或多孔板的培养孔中。仪器、耗材生长培养基 多孔板
悬浮细胞克隆的分离
实验方法原理用加样枪或 Pasteur 吸管吸取集落，移至培养瓶或多孔板的培养孔中。仪器、耗材生长培养基多孔板培养瓶解剖显微镜移液器粗头笔黄色枪头实验步骤1. 用倒置显微镜观察培养皿中的细胞，用毡制粗头笔或 Nikon 标记笔标记出集落。2. 24 孔板的每一孔中加 1 ml 培养基。3. 解剖显微
细胞分离技术（Cell－Isolation）
一、离心技术离心是研究如细胞核、线粒体、高尔基体、溶酶体和微体，以及各种大分子基本手段。一般认为，转速为10~25Kr/min的离心机称为高速离心机；转速超过25Kr/min，离心力大于89Kｇ者称为超速离心机。目前超速离心机的最高转速可达100Kr/min，离心力超过500Kg。（一）、差速离心（
淋巴细胞的分离
实验方法原理 通过右旋糖酐促沉降作用去除红血细胞后，将枸橼酸或肝素抗凝的全血或血浆层加在致密的 Ficoll-Hypaque 层上面。离心后，大部分淋巴细胞位于 Ficoll-Hypaque 和血浆之间的界面。实验材料 肝素或枸橼酸抗凝的血液样本D-PBSAFicoll-Hypaque试剂、试剂盒
干细胞鉴定和分离
干细胞鉴定干细胞的功能是明确的。因此，分离和表征这种独立的细胞群体成为一项具有挑战性的任务。胚胎干细胞（ES）是植入前胚胎的内细胞群体，属于多能干细胞群体。干细胞研究主要有两种技术：一种是在体外成功培养人类胚胎干细胞。另一个重大突破是成人干细胞的侧向分化。干细胞的分离理想的分离干细胞群体应在体内确定
辐射法分离细胞集落
实验方法原理 将培养瓶倒置放于 X 射线机或 60Co 源下，用铅块遮蔽需要的集落。 实验材料 D-PBS 0.25%胰蛋白酶
树突细胞的分离实验
实验步骤基 本 方 案 1 塑 料 黏 附 和E A 玫 瑰 花结 富 集DC此种技术用于分离DC已经使用了很多年，其间只经过了微小的修改（Steinman衫aZ.， 1979)材 料（带V 项 目 见 附 录 1)胶原酶消化的脾脏细胞悬液（见辅助方案）高密度牛血清白蛋白（BSA) 溶液R P M
T细胞亚群的分离
T细胞亚群的分离分离T细胞亚群，包括各种CD抗原阳性的亚群、αβ型T细胞受体阳性的T细胞或γδ型T细胞、或者其它表面标志不同的T细胞亚群，通常需要有相应的特异性抗体。用直接或间接免疫荧光染色，通过FACS分离细胞；或用抗体包被的免疫磁珠，通过磁场分离细胞；或用抗体亲和层析柱分离细胞。
单核巨噬细胞的分离
单核巨噬细胞有粘附塑料或玻璃表面的特性，而淋巴细胞则无此特性，借此可将这两类细胞分开，其方法简述如下。将待分离的细胞悬液（如实物动物的腹腔液）加入适当大小的塑料或玻璃平皿内，置于37℃ C02 温箱内温育1 小时，然后用RPMI 1640 培基轻轻漂洗平皿表面，去除非粘附细胞，再将粘附有细胞的平皿表
如何分离细胞和细菌
通过离心分开细菌和细胞，相同的时间，细菌需要较高转速才沉积，而细胞只需几百至上千就可沉淀。
悬浮细胞的分离方法
组织材料若来自血液、羊水、胸水或腹水的悬液材料，zui简单的方法是采用1000r/min的低速离心10分钟，若悬液量大，可适当延长离心时间，但速度不能太高，延时也不能太长，以避免挤压或机械损伤细胞，离心沉淀用无钙、镁PBS洗两次，用培养基洗一次后，调整适当细胞浓度后再分瓶培养，若选用悬液中某些细胞，
原代细胞分离与培养
对于大部分科研人员来说，研究中一般用到均是现成的细胞系/株，我们只需要：进行细胞传代和保种。然而，这些细胞系常常由于体外长期培养，而丢失原有生物学特性，对药物处理的反应差距越来越大。因此，原代细胞的地位日渐凸显，Paper中若有了原代细胞的数据都会添色不少。然而，就小编亲生经历，原代细胞分离着实是个
辐射法分离细胞集落
实验方法原理将培养瓶倒置放于 X 射线机或 60Co 源下，用铅块遮蔽需要的集落。实验材料D-PBS0.25%胰蛋白酶仪器、耗材生长培养基X射线或钴源铅块实验步骤1. 选择想要的集落，用毡制粗头笔或 Nikon 标记笔做记号。2. 选出一块大小适当的铅块。3. 将培养瓶拿至放射源处。4. 将培养瓶倒
辐射法分离细胞集落
实验方法原理 将培养瓶倒置放于 X 射线机或 60Co 源下，用铅块遮蔽需要的集落。实验材料 D-PBS0.25%胰蛋白酶仪器、耗材 生长培养基X射线或钴源铅块实验步骤 1. 选择想要的集落，用毡制粗头笔或 Nikon 标记笔做记号。2. 选出一块大小适当的铅块。3. 将培养瓶拿至放射源处。4. 将
免疫细胞的分离技术
淋巴细胞的分离取肝素抗凝血1ml加Hanks 液1：1 稀释后，沿管壁徐徐滴流叠加盛有2ml淋巴细胞分离液的试管内（注意勿与分离液混合，然后2000r/min 水平离心20min，管内分为4 层，自上而下依次为血浆，单个核细胞，颗粒白细胞、红细胞（图2—1）。用毛细管伸至单个核细胞层中（位于细胞分离
单个核细胞的分离
实验概要外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cell，PBMC)主要指淋巴细胞和单核细胞，是免疫学实验最常用的细胞，也是进行T细胞和B细胞分离纯化的重要环节。本实验介绍了两种单个核细胞的分离方法。实验原理PBMC的密度与血液中的其他成分不同。红细胞和粒细胞的密
小鼠巨噬细胞的分离
基 本 方 案 1 小鼠腹腔巨噬细胞的分离材料小鼠，洁 净 环 境 中 饲 养（最好置层流柜中饲养）7 3 % (m /V ) 豚 蛋 白 胨 或 者 3 % (W V r) Brewer 硫 基 乙 酸 盐 肉 汤（Brewerthioglycollate medium，分离炎性腹腔巨嗤细胞用）7
单核细胞分离技术
（一）铁粉吸附法 1．材料及试剂 （1）铁粉或羰基铁粉（Atomergic chemetals）99％的纯度，颗粒小于60µm（Goodfellow Metals）。 （2）强磁铁（马蹄形）。 （3）一块小棒状磁铁（约1cm长）。 （4）毛细吸管等。 2．操作