从患有利什曼病的狗的结肠中分离细胞并做流式细胞分析
实验概要犬感染寄生虫病时即使没有明显的病理变化,但对整个消化道的负担是显而易见的。本实验中,我们从患有利什曼病的犬肠道中分离固有层细胞,以进一步探讨肠道内的寄生虫与内脏感染发病是否密切相关。实验原理取狗的活检样本,用胶原酶II培养。向细胞悬液中加入细胞表面和细胞内标记物。这些标记物由以前对利什曼病肠系膜固有层细胞的研究所确定。标记物的确定依据是,在这些感染利什曼病的的组织,特别是持续感染的组织中,肠道感染不会引起病变。主要试剂1. 磷酸盐缓冲液(PBS -氯化钠; KH2PO4的Na2HPO4和蒸馏水)2. HBSS3. 不完整/完整的(小牛血清)RPMI培养基4. 肝素钠钠盐(HEPES,最低99.5%,Sigma -Aldrich公司)5. Ⅱ型胶原酶6. 皂素(Sigma公司,#S-7900)7. BSA(牛血清白蛋白)8. Azida(2mM)主要设备1. 剪刀2. 钳子3. 培养皿4. 1.5,2.0,15和50毫升管......阅读全文
淋巴细胞分离液可以分离哪些细胞?
淋巴细胞分离液主要用于分离人外周血淋巴细胞的分离,也适用于大多数哺乳动物单个核细胞的分离。具有低毒、高得率、高纯度等特点。 有专业的小动物脾脏淋巴细胞分离出来液试剂盒。通常试剂盒构成:全血及机构封闭液150ml体细胞清洗液150ml实验试剂C100ml实验试剂F100ml使用说明1份。重庆市华雅干
PBMC细胞分离液分离原理
PBMC(peripheral blood mononuclear cell),外周血单个核细胞,顾名思义,其主要细胞类型为血液里边具有单个核的细胞,主要包括淋巴细胞(T\B),单核细胞,吞噬细胞,树突状细胞和其他少量细胞类型。其中淋巴细胞占很大一部分。 人外周血单核细胞分离自外周血。在二十一
细胞分离技术
1. 从原代组织中分离细胞 将组织块分离(散)成细胞悬液的方法有多种,zui常用的是机械解离细胞法、酶学解离细胞法以及螯合剂解离细胞法。 从原代组织中获得单细胞悬液的一般方法是酶解聚。细胞暴露在酶中的时间要尽可能的短,以保持zui大的活性。下列步骤可以解聚整个组织,获得较高产量的有活性细胞。 (1
用淋巴细胞分离液分离单个核细胞
用淋巴细胞分离液分离单个核细胞1)分离外周血中的单个核细胞(PBMC)1.抽取正常人静脉血加到肝素抗凝管中,加等量含5~10IU/ml肝素的无血清缓冲液悬浮细胞。将细胞悬液小心加在与血液等量的淋巴细胞分离液上,室温中,水平离心500×g 20分钟。此时离心管中形成5层:最上面是血浆,血浆层和淋巴细胞
Namocell单细胞分离仪应用介绍——藻类单细胞分离
Namocell单细胞分离仪最新应用:随着人们对环境研究的不断深入,研究人员逐渐将目光转向藻类的单细胞层面:有些需要对藻类进行单细胞级别的分析(如藻类单细胞测序等),也有需要对单细胞藻类进行培养。这样就面临一个棘手的问题,那就是如何获取藻类的单个细胞。通常实验室里的方式,是在显微镜下用毛细管吸取。这
如何用淋巴细胞分离液分离单个核细胞?
淋巴细胞分离液可用于体外分离外周淋巴血细胞,也可以从其他来源中分离单核细胞,包括脐带血细胞和骨髓细胞,适用于从血液及组织匀浆中分离所需细胞,在医疗和医学生物中广泛应用。其他人及动物多种比重细胞分离液。 如何用淋巴细胞分离液分离单个核细胞? 1)分离外周血中的单个核细胞 1.抽取正常人静脉血加
单细胞研究指南:细胞分离
多细胞生物的每个细胞都携带着相同的遗传学信息。不过,近年来蓬勃发展的单细胞研究告诉我们,每一个细胞都是独一无二的。不同类型的细胞激活特定组合的机制,即使是同类型细胞,基因表达也会出现差异。 那么,细胞之间的哪些差异有生物学意义,哪些差异来自于技术偏好呢?要获得可靠的结果又需要研究多少细胞呢?这
按细胞比重分离B细胞
按细胞比重分离B细胞1.将2~3ml含3×107纯化的B细胞(B细胞>90%)的细胞悬液加到3ml Percoll溶液(比重1.074)上,水平离心1000×g 20分钟。2.吸去无细胞上清液,交界面的低密度B细胞和大部分Percoll溶液。由于此时细胞沉淀非常松散,需留下约0.2ml Percol
小鼠feeder细胞分离
You will need:13.5 day pregnant mouse (we use MTK NEO inbred white mice)2 sets sterile instrumentsone containing a pair of curved forceps and a pair o
白细胞的分离
(一)血液中红细胞与白细胞比例约600~1000:1,两者的比重不同其沉降速度亦异,通常用两种方法加以分离。 本法是利用血细胞自然沉降率的分离法,采集血液后应及时抗凝,通常选用肝素抗凝法。肝素能阻止凝血酶原转化为凝血酶,从而抑制纤维蛋白原形成纤维蛋白而防止血液凝固。操作原则是将含抗凝血的试管直立静
细胞分离的定义
中文名称细胞分离英文名称cell separation定 义将组织材料分散制成细胞悬液后,从中获取目的细胞的过程。应用学科细胞生物学(一级学科),细胞培养与细胞工程(二级学科)
原代细胞分离技术
1. 悬浮细胞的分离方法 1) 将血液、羊水、胸水或腹水等悬液直接转至离心管中,1000rpm/分钟离心5分钟。 2) 去掉上清,离心沉淀用无钙、镁的PBS清洗后1000rpm/分钟离心5分钟。此步重复两次。 3) 用培养基重悬,调整适当细胞浓度后分瓶培养。 4) 如选用悬液中某种细胞,
免疫细胞的分离
免疫细胞的分离: (1)外周血单个核细胞的分离 外周血中单个核细胞(淋巴细胞和单核细胞)的比重与红细胞、多核白细胞及血小板不同,介于1.075-1.090之间,因而可利用一种比重介于1.075-1.092之间而近于等渗的溶液作密度梯度离心,使一定比重的细胞按相应密度梯度分布而加以分离。常用的
原代细胞分离技术
取人或动物体内(或胚胎)的组织,将其剪碎至1mm3的组织块,再采用的如下方法进行分离培养:一、悬浮细胞的分离方法1、将血液、羊水、胸水或腹水等悬液直接转至离心管中,1000rpm/分钟离心5分钟。2、去掉上清,离心沉淀用无钙、镁的PBS清洗后1000rpm/分钟离心5分钟。此步重复两次。3、用培养基
细胞分离纯化技术
Percoll不连续密度梯度沉淀法分离纯化淋巴细胞和淋巴母细胞实验方法原理Percoll是一种包有乙烯吡咯烷酮的硅胶颗粒。渗透压很低(
巨噬细胞的分离
一、从小鼠、豚鼠或家兔腹腔中分离巨噬细胞1.取6周左右的小鼠(或600克左右的豚鼠,或3公斤左右的家兔),剃去腹部的毛并消毒。腹腔注射1ml(豚鼠20ml,家兔200ml)无菌的液体石蜡或巯基乙酸肉汤或4%淀粉肉汤。3~4天以后收集腹腔细胞。2.如要收集腹腔静置巨噬细胞,不注射刺激物,直接从这一步
细胞分离纯化技术
Ficoll密度梯度离心法分离外周血单个核细胞 Percoll不连续密度梯度沉淀法分离纯化淋巴细胞和淋巴母细胞 实验方法原理 常用来分离人外周血单个
细胞分离纯化技术
实验方法原理 常用来分离人外周血单个核细胞(PBMC)的分层液比重是 1.077±0.001 的 聚 蔗糖(Ficoll)-泛影葡胺(Urografin)(F/H)分层液。Ficoll是蔗糖的多聚体,呈中性,水性高,平均分子量为400000,当密度为1.2 g/ml仍未超出正常生理性
原代细胞分离技术
实验概要本文介绍了原代细胞分离技术,包括悬浮细胞的分离方法和实体组织材料的分离方法。实体组织材料的分离方法有机械分散和消化分离两种。实验步骤1. 悬浮细胞的分离方法 1) 将血液、羊水、胸水或腹水等悬液直接转至离心管中,1000rpm/分钟离心5分钟。 2) 去掉上清,离心沉淀用无钙、镁的P
血细胞分离技术
采血 (一)材料与试剂 1.抗凝剂 (1)肝素:肝素是含硫酸基的粘多糖,常用其钠盐或钾盐,它能阻止凝血酶原转化为凝血酶,进而抑制纤维蛋白原形成纤维蛋白,从而阻止血液凝固。常用的肝素溶液浓度为1 000U/ml,市售肝素多为100U~126U/mg。 (2)乙二胺四乙酸(EDTA):是
细胞分离纯化技术
Ficoll密度梯度离心法分离外周血单个核细胞 Percoll不连续密度梯度沉淀法分离纯化淋巴细胞和淋巴母细胞 实验方法原理 常用来分离人外周血单个
单细胞分离技术
单细胞测序日趋火爆的原因很大程度上得益于单细胞分离技术的不断完善。这一讲,我们将跟大家一起回顾传统的单细胞分离技术,并重点介绍单细胞分离技术的新宠微孔芯片技术及微流控技术。图1为目前常见单细胞分离设备。图1:目前常见单细胞分离设备传统单细胞分离技术相信许多实验人员,都见过下面我们要介绍的传统的单细胞
血细胞分离技术
实验概要血细胞是免疫学研究或临床检验常用的检测对象或试验材料,分离和纯化血细胞是实验室中的基本技术。目前分离血细胞的技术大多是根据各种细胞群特有的大小、沉降率、粘附性和吞噬能力等设计而成。实验原理外周血液中的红细胞与白细胞的比例在几百甚至上千比一,两类细胞的大小和密度不同,其沉降速度也就不同,红细胞
淋巴细胞分离液的分离原理
外周血中单个核细胞和单核细胞,其体积、形态和密度与其他细胞不同。淋巴细胞分离液是一种密度介于1.075∽1.090之间而近似于等渗的溶液,用它做密度梯度离心,使一定密度的细胞按相应密度梯度分布,从而将各种血细胞加以分离。
你知道淋巴细胞分离液可以分离哪些细胞吗?
有专业的小动物脾脏淋巴细胞分离出来液试剂盒。通常试剂盒构成:全血及机构封闭液150ml体细胞清洗液150ml实验试剂C100ml实验试剂F100ml使用说明1份。重庆市华雅干细胞技术是国内合资生产型经济实体。本公司主要生产和销售以生物工程糖类为主体,集有机,无机,生化等各类精细化学试剂生产企业。检
T-细胞及B-细胞的分离
将淋巴细胞悬液通过尼龙棉柱,B 细胞粘附于尼龙棉上,T细胞则不粘附,先用RPMI l640 培基洗脱尼龙棉柱,流下的细胞悬液含有丰富的T 细胞。然后用力反复挤压尼龙柱、挤出粘附在尼龙棉上的B 细胞,并用少量的RPMI l640 培基洗脱,此细胞悬液含有丰富的B 细胞。尼龙柱(塑料管)的长短和尼龙棉的
植物细胞的质壁分离与分离复原
一、原理 生长的植物细胞是一个渗透系统,活细胞的原生质及其表层具有分别透性,原生质层内部含有一个大液泡,具有一定的溶质势。当细胞与外界高渗溶液接触时,细胞内的水分外渗,原生质随着液泡一起收缩而发生质壁分离,其后,当与清水(或低渗溶液)接触,或当外面的溶质进入时,具有液泡的原生质体就又吸水而发生
成年大鼠心室肌肉细胞的分离和培养实验_分离ARVM细胞
实验材料鼠试剂、试剂盒KH 缓冲液混合气体仪器、耗材对流工作台或层流式超净台乙醚罩冷凝器循环水浴和水浴摇床圈型架蠕动泵台式医用离心机无菌烧杯ColorpHast pH 试纸实验步骤一、ARVM 细胞分离的准备工作1. 准备如下设备及器材:对流工作台或层流式超净台乙醚罩冷凝器循环水浴和水浴摇床带夹的圈
稀有细胞和少量细胞的单细胞分离
对于单细胞转录组学,单细胞蛋白组学和单细胞基因组学而言,高效的单细胞获取方式至关重要。传统的流式细胞分选仪是一种常用的细胞分离工具,但是在实际操作过程中一些技术壁垒。除了操作难度高之外,细胞在传统流式中分离时需要经过相当长度的共用管路,从而产生了大量的死体积。为了弥补这些损失,就往往需要用到大量的
稀有细胞和少量细胞的单细胞分离
对于单细胞转录组学,单细胞蛋白组学和单细胞基因组学而言,高效的单细胞获取方式至关重要。传统的流式细胞分选仪是一种常用的细胞分离工具,但是在实际操作过程中一些技术壁垒。除了操作难度高之外,细胞在传统流式中分离时需要经过相当长度的共用管路,从而产生了大量的死体积。为了弥补这些损失,就往往需要用