拟南芥突变体纯合植株的获得
实验概要本实验利用农杆菌转化侵染野生型拟南芥获得变体纯合植株。实验材料拟南芥(Arabidopsis thaliana, Col-0),培养条件,长日照为16h光照/8h黑暗,22oC;短日照为8h光照/16h黑暗,22oC。实验步骤1. 拟南芥基因组的小量提取 1) 取0.2 g拟南芥叶片,于液氮中研磨成粉; 2) 转入1.5 mL离心管中,加入800 uL 2XCTAB提取缓冲液,充分混匀,65oC保温30 min,其间不时摇动; 3) 加入200uL氯仿,轻轻颠倒离心管混匀,室温下12000 rpm,离心l 0 min; 4) 取上清,转入新的1.5 mL离心管中,加入200 uL氯仿,轻轻颠倒离心管混匀,室温下12000 rpm,离心l 0 min; &nb......阅读全文
拟南芥突变体纯合植株的获得
实验概要本实验利用农杆菌转化侵染野生型拟南芥获得变体纯合植株。实验材料拟南芥(Arabidopsis thaliana, Col-0),培养条件,长日照为16h光照/8h黑暗,22oC;短日照为8h光照/16h黑暗,22oC。实验步骤1. 拟南芥基因组的小量提取 1) 取0.2 g拟南芥叶片,
我国学者揭示MoCo是导致植株穗发芽及植株纯合致死表型
众所周知,穗发芽是影响水稻、小麦等主要农作物产量和品质的重要因素之一。近年来,由于极端气候频繁出现,作物穗发芽现象呈现普遍递增的态势,即使在黑龙江寒带水稻生产区近年来穗发芽也出现上升势头。日前,中科院东北地理与农业生态研究所与东北农业大学等单位合作,在黑龙江省杰出青年基金及国家重点研发计划的资助
拟南芥转基因植株的鉴定
实验概要本实验介绍了拟南芥转基因植株的初步鉴定方法,包括:阳性苗的筛选,GUS基因表达分析,组织PCR和RT-PCR分析。主要试剂0.2%的Triton X-100,10%的次氯酸钠,含20 mg/L Hygromycin的MS培养基,X-Gluc,75%乙醇,0.25 N NaOH,0.25
拟南芥转基因植株PCs含量的测定
实验概要本实验测定了转基因拟南芥总谷胱甘肽(GSH)含量、非蛋白巯基(NPT)含量。主要试剂200 uM CdSO4,5% sulfosalicylic acid(含6. 3 mM diethylenetriaminepentaacetic acid ),Co-enzyme working
纯合克隆筛选
1.融化杂合突变ES细胞 ,ES/LIF培养液培养,每2~3天传代,实验开始把细胞 接种到三个100mm铺有凝胶碟皿中,每皿接种1~2×106 细胞 。为筛选需用一个以上的ES杂合突变细胞系,因不同细胞系的转化效率不全相同,另外对检测细胞表型也需如此。 2.每皿细胞分别加入1.0~2.0m
纯合克隆筛选
纯合克隆筛选1.融化杂合突变ES细胞,ES/LIF培养液培养,每2~3天传代,实验开始把细胞接种到三个100mm铺有凝胶碟皿中,每皿接种1~2×106细胞。为筛选需用一个以上的ES杂合突变细胞系,因不同细胞系的转化效率不全相同,另外对检测细胞表型也需如此。2.每皿细胞分别加入1.0~2.0mg/ml
中国农大权威期刊发表CRISPR研究
通过CRISPR/Cas9基因组编辑系统的组成型过量表达而产生的拟南芥突变体,通常在T1代是嵌合体。七月二十一日,来自中国农业大学的研究人员在国际生物学权威期刊《Genome Biology》发表的一项研究中,利用卵细胞特异性的启动子,来驱动Cas9的表达,并以很高的效率获得了多个靶基因的非嵌合
拟南芥sos突变体在盐胁迫下的离子流模式
SOS信号转导途径在植物离子平衡和耐盐中非常重要。SOS模型认为高Na+引起了胞内自由Ca2+的升高,激活了Ca2+结合蛋白编码的SOS3的表达,影响到下游的反应。SOS3激活了相连的SOS2(丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶),SOS2/SOS3复合体调节盐忍耐因子编码的SOS1(质膜Na+/H+反向转运体
染色体的纯合性
中文名称纯合性英文名称homozygosity定 义同源染色体的相对位置上具有相同基因的状态。应用学科遗传学(一级学科),细胞遗传学(二级学科)
纯合分型细胞技术的概念
中文名称纯合分型细胞技术英文名称homozygous typing cell technique;HTC technique定 义一种HLA细胞学分型技术。即用已知HLA-Dw型别的(灭活)纯合子细胞(刺激细胞)和受检者细胞(反应细胞)进行单向混合淋巴细胞培养,若不发生或仅发生弱的增殖反应,表明受
纯合分型细胞技术的定义
中文名称纯合分型细胞技术英文名称homozygous typing cell technique;HTC technique定 义一种HLA细胞学分型技术。即用已知HLA-Dw型别的(灭活)纯合子细胞(刺激细胞)和受检者细胞(反应细胞)进行单向混合淋巴细胞培养,若不发生或仅发生弱的增殖反应,表明受
调节植物响应光周期开花的分子机制阐明
无论对被子植物还是对动物来说,植物开花时间调控的重要性不言而喻,但在这个过程中仍存在诸多未解之谜。中科院昆明植物研究所研究人员与上海大学合作,最新阐明了植物通过协调一氧化碳的活性与稳定性以调节开花时间的分子机制。 植物响应季节变化的开花时间,通常是通过植物对日照长度变化的感知来完成的。在基因高
纯合分型细胞技术特点和应用
中文名称纯合分型细胞技术英文名称homozygous typing cell technique;HTC technique定 义一种HLA细胞学分型技术。即用已知HLA-Dw型别的(灭活)纯合子细胞(刺激细胞)和受检者细胞(反应细胞)进行单向混合淋巴细胞培养,若不发生或仅发生弱的增殖反应,表明受
单碱基编辑系统在植物中建立mRNA剪接操控新方法
mRNA前体的剪接是高等生物体内基因转录后加工的重要过程,传统mRNA的剪接遵循“GU-AG”法则,即主要剪接体包含三个保守的剪接位点,即位于内含子5’端的“GU”、3’端的“AG”和靠近3’端的分支点“A”。剪接体通过选择一种或多种剪接位点可将mRNA前体加工为一种或多种成熟的mRNA,即组成
SlSCL3在番茄萜烯生物合成和腺毛发育的调控中的作用
2021年6月18日,The Plant Journal在线发表了德国莱布尼茨植物生物化学研究所所长Alain Tissier教授为通讯作者的题为“The Scarecrow-Like Transcription Factor SlSCL3 Regulates Volatile Terpene
转基因植株的表型分析及组织化学分析
实验概要本实验将转基因拟南芥和水稻种子诱导发芽培养后进行了表型分析和GUS组织化学分析。主要试剂1. Tween-20(Sangon,上海)2. MS培养基3. 70%的酒精4. 20%漂白剂5. GUS反应缓冲液:主要设备1. LED光照培养箱(E-3 0 LED growth chamber,P
曹树青教授课题组找到土壤耐受重金属毒害关键基因
土壤重金属污染是全球性的重要环境问题之一,被污染土壤中的重金属可被农作物吸收进入食物链,严重影响食品安全并危及人类健康。植物修复基因工程是解决土壤重金属污染的重要途径之一,其中,寻找和发掘耐受重金属毒害且调控重金属超量积累的关键基因并阐明其作用机理,是植物修复基因工程获得成功并从源头上控制农产品
土壤耐受重金属毒害关键基因找到
土壤重金属污染是全球性的重要环境问题之一,被污染土壤中的重金属可被农作物吸收进入食物链,严重影响食品安全并危及人类健康。植物修复基因工程是解决土壤重金属污染的重要途径之一,其中,寻找和发掘耐受重金属毒害且调控重金属超量积累的关键基因并阐明其作用机理,是植物修复基因工程获得成功并从源头上控制农产品
北大教授用CRISPR技术定点改造水稻基因
长期以来,科学家们一直想按照人类的设计定点改造特定基因以提高水稻的产量和质量,但定点基因改造技术在水稻等植物中一直没有突破。 CRISPR-Cas 系统定点突变水稻基因 北京大学生命科学学院的瞿礼嘉教授实验室利用最新的CRISPR-Cas系统成功地实现了对水稻特定基因的定点突变,效率
曹树青小组植物响应重金属信号转导研究获进展
土壤重金属污染是全球面临的重要环境问题之一。近日,合肥工业大学教授曹树青课题组的一项研究,首次揭示了植物响应重金属镉胁迫信号转导的分子调控机制,为土壤重金属污染植物修复基因工程提供了新的技术途径和基因资源。该成果在线发表于《新植物学家》。 我国有近20%的耕地存在镉、砷、汞、铅、镍、铜等重金属
蓝光诱导黄化野生型和向光素突变体拟南芥幼苗的H+和...
蓝光诱导黄化野生型和向光素突变体拟南芥幼苗的H+和Ca2+流 AbstractIon flux kinetics associated with blue light (BL) treatment of two wild types (WTs) and the phot1, phot2 and ph
版纳园研究揭示转录因子WRKY57调控拟南芥干旱耐受能力
干旱是限制农作物产量和品质的重要环境因子之一,但是植物对干旱耐受性的潜在分子机制却仍不清楚。据报道,WRKY转录因子在植物适应非生物胁迫过程中起着重要的作用。WRKY蛋白质是一个转录调控因子大家族,在拟南芥中有74个成员,大量研究证实,WRKY基因家族各成员参与调控植物的抗逆反应及其信号转导途径
乙烯和脱落酸对HrpNEa诱导拟南芥抗蚜与抗旱的对比实验
实验概要本研究描述了脱落酸(abscisic acid,ABA)和乙烯在HrpNEa诱导下不同情形各自的作用。实验原理HrpNEa是植物病原细菌E. amylovora产生的一种多效型蛋白,用其处理拟南芥能激发脱落酸和乙烯信号介导的抗旱和抗虫过程。ABA和乙烯两种激素都参与了种子萌发和根生长,但在植
上海生科院揭示新RNA剪接因子调控植物脱落酸信号途径
9月25日,国际学术期刊Nature Communications 在线发表了中国科学院上海生命科学研究院上海植物逆境生物学研究中心朱健康研究组题为An Arabidopsis PWI and RRM motif-containing protein is critical for pre-mR
植物离体叶片失水表型观察及其失水率测定实验
实验方法原理植物水分散失的主要器官是叶片,其中又主要是通过气孔来实现的。因此,离体叶片水分的散失情况在很大程度上反映了整体植株的水分状态。离体叶片暴露于空气中,由于水分的扩散而又得不到及时的补充,叶片会出现萎焉表型,随着时间的延长而加剧。同时,通过称重法可以定量地测定出叶片在不同时间段失水的程度(失
植物离体叶片失水表型观察及其失水率测定实验
实验方法原理 植物水分散失的主要器官是叶片,其中又主要是通过气孔来实现的。因此,离体叶片水分的散失情况在很大程度上反映了整体植株的水分状态。离体叶片暴露于空气中,由于水分的扩散而又得不到及时的补充,叶片会出现萎焉表型,随着时间的延长而加剧。同时,通过称重法可以定量地测定出叶片在不同时间段失水的程度(
植物离体叶片失水表型观察及其失水率测定实验
实验方法原理植物水分散失的主要器官是叶片,其中又主要是通过气孔来实现的。因此,离体叶片水分的散失情况在很大程度上反映了整体植株的水分状态。离体叶片暴露于空气中,由于水分的扩散而又得不到及时的补充,叶片会出现萎焉表型,随着时间的延长而加剧。同时,通过称重法可以定量地测定出叶片在不同时间段失水的程度(失
农杆菌介导转化拟南芥
实验概要1. 学习真核生物的转基因技术及农杆菌介导的转化原理。2. 掌握农杆菌介导转化拟南芥 的实验方法,了解拟南芥的生理特点及在基因工程实验中应用实验原理拟南芥(Arabidopsis thaliana)是一种十字花科植物,二年生草本,高7~40厘米,花期3~5月。广泛用于植物遗传学、发育生物学和
细胞质基因受核基因的控制举例玉米埃型条斑的遗传
玉米埃型条斑的遗传:玉米第7染色体上有一个条纹基因ij,当起处于隐性纯合时(ijij),能引起质体突变率增加,使正常的质体突变为败育的质体,不能全部形成叶绿素,表现出白色和绿色相间的条斑性状的植株或是白化苗不能成活。当条斑为母本与正常株IjIj为父本杂交时,其F1(Ijij)表型由种:绿色苗、条斑苗
我国学者发现Hippo通路成员MOB1调控茉莉酸及植物发育
Hippo信号通路在调控动物细胞分裂、器官大小和肿瘤发生方面起重要作用,是当前动物和医学领域的研究热点,但是植物中相关研究还比较少。MOB1是该通路的核心成员,在酵母、动物和植物中高度保守。程佑发研究组前期发现拟南芥MOB1A在生长素介导的植物生长发育过程中起重要作用(Cui et al., 2