牛肉膏蛋白胨培养基的制备、微生物的分离与纯化
实验目的:掌握培养基的配制原则与方法; 掌握划线分离纯化微生物的原理与方法 熟悉手提式高压灭菌器的使用方法和注意事项; 实验材料:器材:试管、三角瓶、烧杯、量筒、玻璃棒天平、牛角匙、高压蒸汽灭菌锅等。 试剂:牛肉膏、蛋白胨、NaCl、琼脂等 实验原理: 培养基是人工按一定比例配制的供微生物生长繁殖和合成代谢产物所需要的营养物质的混合物。培养基的原材料可分为碳源、氮源、无机盐、生长因素、能源和水。根据微生物的种类和实验目的不同,培养基要选择合适的配比关系;选择合适的理化性质;配后要及时灭菌。 牛肉膏蛋白胨培养基是一种应用最广泛和最普通的细菌基础培养基,有时又称为普通培养基。由于这种培养基中含有一般细胞生长繁殖所需要的最基本的营养物质,所以可供细菌生长繁殖之用。 高压蒸汽灭菌方法主要是通过升温使蛋白质变性从而达到杀死微生物的效果。 从混杂的微生......阅读全文
LB培养基与琼脂培养基之间的两大区别
区别一:琼脂 培养基就是加了琼脂粉凝结成固体的LB培养基。 固体的培养基用于细菌 涂板, 抗性筛选挑选单克隆 之用 液体的用于单克隆菌种扩大培养, 提取目的基因或者蛋白之用 区别之二:就是LB培养基是液体的,而营养琼脂 培养基(牛肉膏蛋白胨培养基) 是固体 具体的配方
基础培养基的制备
培养基是根据微生物 生长繁殖时对营养物质的需要而配制的营养制品,含有营养物质及适宜的酸碱度,经灭菌后使用。 常用的培养基按用途分为:基础培养基、营养培养基、鉴别培养基、选择培养基及厌氧培养基。按物理性状分为固体、半固体和液体三种。 实验目的: 了解常用的液体、固体、半固体培养基的成分、制备方法和用
蛋白胨、酵母膏、葡萄糖培养基的成分和适用范围
Peotone Glucose Yeast extract Medium PGY (蛋白胨、酵母膏、葡萄糖培养基)Peptone(蛋白胨) 10g Yeast extract (酵母膏) 5gGlucose (葡萄糖) 1g Distilled water (蒸馏水) 1L
高氏I号培养基的制备实验
实验方法原理 高氏I号培养基是用来培养和观察放线菌形态特征的合成培养基。如果加人适量的抗菌药 物(如各种抗生素、酚等),则可用来分离各种放线菌。此合成培养基的主要特点是含有多种化学成分已知的无机盐,这些无机盐可能相互作用而产生沉淀,如高氏I号培养基中的磷酸盐和镁盐相互混合时易产生沉淀,因此,
146种培养基配方[细菌培养基和植物培养基](六)
121、营养肉汤和葡萄糖培养基 (AS 100) 牛肉膏 10.0g 蛋白胨 10.0g 葡萄糖 10.0g NaCl 5.0g 琼脂 15.0-20.0g 蒸馏水 1000ml pH 7.0122、(Trypticase Soya Agar) 胰蛋白胨 17.0g 大豆胨 3.0g 葡萄糖 2.5
样品RNA的分离与纯化
含106个细胞液加等量纯化溶液[4mol/L胍基硫氰酸盐,25mmol/L柠檬酸pH7.0,0.5%肌氨酸(sarcosyl),0.1mol/l 2-巯基乙醇]。总体积为细胞沉淀4-5倍,混匀。加0.1体积2ml/L乙酸钠(pH4.1),1体积酚(重蒸水上封),0.2体积CIAA,混匀器剧烈
土壤细菌的分离与纯化
一 教学要求 通过从土壤中分离纯化细菌 ,初步掌握微生物的分离纯化方法和无菌操作技术。 二 实验原理 - 常用的分离纯化方法 microorganisms exist in Nature as mixed populations. However, to study microo
表达蛋白的分离与纯化
大肠杆菌表达蛋白以可溶和不溶两种形式存在,需要不同的纯化策略。现在,许多蛋白质正在被发现而事先并不知道它们的功能,这些自然需要将蛋白质分离出来后,进行进一步的研究来获得。分析蛋白质的方法学现已极大的简化和改进。必须承认,蛋白质纯化比起DNA克隆和操作来是更具有艺术性的,尽管DNA序列具有异乎寻常的多
表达蛋白的分离与纯化
[实验原理]大肠杆菌表达蛋白以可溶和不溶两种形式存在,需要不同的纯化策略。现在,许多蛋白质正在被发现而事先并不知道它们的功能,这些自然需要将蛋白质分离出来后,进行进一步的研究来获得。分析蛋白质的方法学现已极大的简化和改进。必须承认,蛋白质纯化比起DNA克隆和操作来是更具有艺术性的,尽管DNA序列具有
常用的分离与纯化方法
稀释混合倒平板法、稀释涂布平板法、平板划线分离法、稀释摇管法、液体培养基分离法、单细胞分离法、选择培养分离法等。其中前三种方法最为常用,不需要特殊的仪器设备,
标本DNA的分离与纯化
用5-10ml 1xNTE(NaCl 100mmol/L ,Tris-HCl 10mmol/l pH7.4,EDTa 1mmol/L pH8.0)调整细胞为2×107个(组织应切碎置液氮冰冻,高速搅切成粉末后,加入缓冲液)。加1/10-1/20体积(V)10mg/ml蛋白酶(Sigma Ⅷ型),
高氏I号培养基的制备实验
高氏I号培养基是用来培养和观察放线菌形态特征的合成培养基。如果加人适量的抗菌药 物(如各种抗生素、酚等),则可用来分离各种放线菌。实验方法原理高氏I号培养基是用来培养和观察放线菌形态特征的合成培养基。如果加人适量的抗菌药 物(如各种抗生素、酚等),则可用来分离各种放线菌。此合成培养基的主要特点是含有
大肠杆菌的生长曲线测定实验
细菌的生长曲线测定实验对于(1)细胞生长过程监控(2)细胞生长时态的观察等都有重要意义实验方法原理将一定数量的细菌,接种于适宜的液体培养基中,在适温下培养,定时取样测数,以菌数的对数为纵坐标,生长时间为横坐标,作出的曲线称为生长曲线。该曲线表明细菌在一定的环境条件下群体生长与繁殖的规律。一般分为延缓
常用的微生物培养基及配制方法
1.牛肉膏蛋白胨培养基(用于细菌培养) 牛肉膏3g,蛋白胨10g,NaCl 5g,水1000mL,pH7.4~7.6。 2.高氏1号培养基(用于放线菌培养) 可溶性淀粉20g,KNO3 1g,NaCl 0.5g,K2HPO4•3H2O 0.5g,MgSO4•7H2O0.5g,FeSO4•7
微生物实验培养基配制方法
1.牛肉膏蛋白胨培养基(用于细菌培养) 牛肉膏3g,蛋白胨10g,NaCl 5g,水1000mL,pH7.4~7.6。 2.高氏1号培养基(用于放线菌培养) 可溶性淀粉20g,KNO31g,NaCl 0.5g,K2HPO4•3H2O 0.5g,MgSO4•7H2O0.5g,FeSO4•7H
临床微生物培养基手册(三)
葡萄糖氧化发酵培养基(O/F) 成份: 蛋白胨 2.7克 氯化钠 5.0克 0.2%溴麝香酚兰 0.03克 琼脂 3克 KH2PO4 0.3克
从自然环境中分离和纯化噬菌体实验
实验方法原理因为噬菌体是专性寄生物,所以自然界中凡有细菌分布的地方,均可发现其特异的噬菌体的存在,亦即噬菌体一般是伴随着宿主细菌的分布而分布的,例如粪便与阴沟污水中含有大量大肠杆菌,故也能很容易地分离到大肠杆菌噬菌体;乳牛场有较多的乳酸杆菌,也容易分离到乳酸杆菌噬菌体等。虽然近年的研究表明,自由噬菌
从自然环境中分离和纯化噬菌体实验
实验方法原理 因为噬菌体是专性寄生物,所以自然界中凡有细菌分布的地方,均可发现其特异的噬菌体的存在,亦即噬菌体一般是伴随着宿主细菌的分布而分布的,例如粪便与阴沟污水中含有大量大肠杆菌,故也能很容易地分离到大肠杆菌噬菌体;乳牛场有较多的乳酸杆菌,也容易分离到乳酸杆菌噬菌体等。虽然近年的研究表明,自由噬
食品微生物实验室常见19种培养基配方汇总(三)
十四、EC肉汤成分:胰蛋白胨 20g3号胆盐(或混合胆盐)1.5g乳糖 5g磷酸氢二钾 4g磷酸二氢钾 1.5g氯化钠 5g蒸馏水 1000mL制法:将上述成分混合,溶解后,分装有发酵倒管的试管中,121℃高压灭菌15min。最终pH为6.9±0.2。 十五、四硫磺酸钠煌绿增菌液(TTB)基础培养基
厌氧微生物的培养
实验概要学习几种厌氧微生物的培养方法。实验原理 厌氧微生物在自然界分布广泛,种类繁多,作用也日益引起重视。培养厌氧微生物的技术关键是要使该类微生物处于除去了氧或氧化还原势低的环境中。 焦性没食子酸与碱性溶液作用后,形成碱性没食子酸盐,在此反应过程中能吸收氧气而造成厌氧环境;牛肉渣内既含有不饱和脂
微生物培养基的原理、制作和现象:蛋白胨水
蛋白胨水(靛基质试验用)成分 蛋白胨(或胰蛋白胨) 20g 氯化钠 5g 蒸馏水 1000mL pH7.4制法 按上述成分配制,分装小试管,121℃高压灭菌15min。 靛基质试剂 柯凡克试剂:将5g对二甲氨基苯甲醛溶解于75mL戊醇中。然后缓慢加入浓盐酸25
什么是CFU
指单位体积中的细菌、霉菌、酵母等微生物的群落总数。也指1 mL水样在牛肉膏蛋白胨琼脂培养基中,于37 ℃培养24 h后所生长的腐生性细菌菌落总数。在活菌培养计数中,由一个或多个生物体在固体培养基上生长繁殖形成的菌落称为菌落形成单位,表示活菌的数量。菌落形成单位的计数方法不同于一般的计数方法。一般直接
细菌液体培养基配方
(1)肉汤液体培养基(固体培养基成分,不加琼脂就是液体的了):1、成分:牛肉膏0.5g,蛋白胨1.0g,氯化钠0.5g,蒸馏水100mL,pH7.2~7.5。2、制法:加热溶解,调pH值,分装于三角瓶中121℃,20min高压灭菌。(2),LB培养基的配方如下: 蛋白胨(Tryptone) 10g/
水中细菌总数测定实验——平板菌落计数法
实验方法原理水中细菌总数测定是测定水中需氧菌、兼性厌氧菌和异养菌的总数。水中细菌总数可作为判定被检水样被有机物污染程度的标志,细菌数量越多,则水中有机质含量越大。本实验应用平板计数技术测定水中细菌总数。以1 ml水样在营养琼脂培养基中,于37 ℃培养24 h后所生长的细菌菌落的总数,作为水体受细菌污
水中细菌总数测定
实验方法原理 水中细菌总数测定是测定水中需氧菌、兼性厌氧菌和异养菌的总数。水中细菌总数可作为判定被检水样被有机物污染程度的标志,细菌数量越多,则水中有机质含量越大。本实验应用平板计数技术测定水中细菌总数。以1 ml水样在营养琼脂培养基中,于37 ℃培养24 h后所生长的细菌菌落的总数,作为水体受
细菌培养基的相关介绍
牛肉膏琼脂培养基 牛肉膏0.3g ,蛋白胨1.0g,氯化钠0.5g,琼脂1.5g,水100ml 在烧杯内加水100ml,放入牛肉膏、蛋白胨和氯化钠,用蜡笔在烧杯外作上记号后,放在火上加热。待烧杯内各组分溶解后,加入琼脂,不断搅拌以免粘底。等琼脂完全溶解后补足失水,用10%盐酸或10%的氢氧化
用比浊法测定大肠杆菌的生长曲线
实验概要了解细菌生长曲线的持点及测定原理,学会用比浊法测定细菌的生长曲线。实验原理将一定数量的细菌,接种于适宜的液体培养基中,在适温下培养,定时取样测数,以菌数的对数为纵坐标,生长时间为横坐标,作出的曲线称为生长曲线。该曲线表明细菌在一定的环境条件下群体生长与繁殖的规律。一般分为延缓期、对数期、稳定
庆大霉素琼脂(无需配套试剂)-配方
中文名庆大霉素琼脂(无需配套试剂) 配方英文名Gentamycin Agar(dispense with additives)用途用于霍乱弧菌的选择性分离培养标准配方(g/L)配方(每升) 含量 蛋白胨 10.0g 牛肉膏粉 3.0g 氯化钠
庆大霉素琼脂(无需配套试剂)-配方
中文名庆大霉素琼脂(无需配套试剂) 配方英文名Gentamycin Agar(dispense with additives)用途用于霍乱弧菌的选择性分离培养标准配方(g/L)配方(每升) 含量 蛋白胨 10.0g 牛肉膏粉 3.0g 氯化钠
庆大霉素琼脂培养基配方
序号025050中文名庆大霉素琼脂培养基配方 025050英文名Gentamycin Agar用途用于霍乱弧菌的选择性分离培养标准配方(g/L)配方(每升) 含量 蛋白胨 10.0g 牛肉膏粉 3.0g 氯化钠 5.0g 蔗糖