基本实验技术

I. Safety ProceduresA. ChemicalsA number of chemicals used in this laboratory are hazardous. All manufacturers of hazardous materials are required by law to supply the user with pertinent information on any hazards associated with their chemicals. This information is supplied in the form of Material Safety Data Sheets or MSDS. This information contains the chemical name, CAS#, health hazard d......阅读全文

基本实验技术

I. Safety ProceduresA. ChemicalsA number of chemicals used in this laboratory are hazardous. All manufacturers of hazardous materials are required by

FISH-技术基本实验

实验方法原理试剂、试剂盒70%乙醇SSC磷酸盐缓冲溶液(PBS)Hemo-De清理试剂蛋白酶溶液仪器、耗材水浴锅增湿器玻片实验步骤一、制备培养的中期细胞标本1.在一个独立小室里放置一个水浴锅和一台增湿器。湿度应大约50%,如果房间湿度计显示低于45%,则应使用加湿器。2.预热水浴锅至67℃±2℃,在

FISH-技术基本实验

基本方案             实验方法原理 试剂、试剂盒 70%乙醇 SSC

FISH-技术基本实验

实验方法原理 试剂、试剂盒 70%乙醇SSC磷酸盐缓冲溶液(PBS)Hemo-De清理试剂蛋白酶溶液仪器、耗材 水浴锅增湿器玻片实验步骤 一、制备培养的中期细胞标本1.在一个独立小室里放置一个水浴锅和一台增湿器。湿度应大约50%,如果房间湿度计显示低于45%,则应使用加湿器。2.预热水浴锅至67℃±

动物实验基本技术1

第一节 实验动物的抓取和固定在进行实验时,为了不损伤动物的健康,不影响观察指标,并防止被动物咬伤,首先要限制动物的活动,使动物处于安静状态,工作人员必须掌握合理的抓取固定方法。抓取动物前,必须对各种动物的一般习性有所了解。操作时要小心仔细、大胆敏捷、熟练准确、不能粗暴,不能恐吓动物,同时,要爱惜动物

动物实验基本技术2

第三节 实验动物的麻醉方法麻醉(anesthesia)的基本任务是消除实验过程中所至的疼痛和不适感觉,保障实验动物的安全,使动物在实验中服从操作,确保实验顺利进行。一、常用的麻醉药(一)常用局部麻醉剂:普鲁卡因,此药毒性小,见效快,常用于局部浸润麻醉,用时配成0.5%~1%;利多卡因,此药见效快,组

动物实验基本技术2

第三节 实验动物的麻醉方法 麻醉(anesthesia)的基本任务是消除实验过程中所至的疼痛和不适感觉,保障实验动物的安全,使动物在实验中服从操作,确保实验顺利进行。 一、常用的麻醉药 (一)常用局部麻醉剂:普鲁卡因,此药毒性小,见效快,常用于局部浸润麻醉,用时配成0.5%

动物实验基本技术3

第七节 实验动物的处死当实验中途停止或结束时,实验者应站在实验动物的立场上以人道的原则去处置动物,原则上不给实验动物任何恐怖和痛苦,也就是要施行安乐死。安乐死是指实验动物在没有痛苦感觉的情况下死去。实验动物安乐死方法的选择取决于动物的种类与研究的课题。一、蛙 类常用金属探针插入枕骨大孔,破坏脑脊髓的

动物实验基本技术1

第一节 实验动物的抓取和固定在进行实验时,为了不损伤动物的健康,不影响观察指标,并防止被动物咬伤,首先要限制动物的活动,使动物处于安静状态,工作人员必须掌握合理的抓取固定方法。抓取动物前,必须对各种动物的一般习性有所了解。操作时要小心仔细、大胆敏捷、熟练准确、不能粗暴,不能恐吓动物,同时,要爱惜动物

动物实验基本技术2

第五节 实验动物的采血法实验研究中,经常要采集实验动物的血液进行常规质量检测、细胞学实验或进行生物化学分析,故必须掌握正确的采集血液的技术。采血方法的选择,主要决定于实验的目的和所需血量以及动物种类。一、大鼠、小鼠的采血方法(一)剪尾采血:需血量很少时常用本法,如作红、白细胞计数、血红蛋白测定、制作

动物实验基本技术3

第七节 实验动物的处死当实验中途停止或结束时,实验者应站在实验动物的立场上以人道的原则去处置动物,原则上不给实验动物任何恐怖和痛苦,也就是要施行安乐死。安乐死是指实验动物在没有痛苦感觉的情况下死去。实验动物安乐死方法的选择取决于动物的种类与研究的课题。一、蛙 类常用金属探针插入枕骨大孔,破坏脑脊髓的

动物实验基本技术2

第五节 实验动物的采血法实验研究中,经常要采集实验动物的血液进行常规质量检测、细胞学实验或进行生物化学分析,故必须掌握正确的采集血液的技术。采血方法的选择,主要决定于实验的目的和所需血量以及动物种类。一、大鼠、小鼠的采血方法(一)剪尾采血:需血量很少时常用本法,如作红、白细胞计数、血红蛋白测定、制作

动物实验基本技术4

三、实验动物的准备本文主要叙述制备转基因鼠的实验程序。(一)不育雄性公鼠:结扎公鼠与母鼠交配以后产生假孕母鼠。受结扎的公鼠需8周以上,对种系无特殊要求。在正式实验前,结扎公鼠需与性成熟的雌性小鼠交配,反复交配两次或三次,经检查雌体有阴道栓,但均不怀孕产仔,则证明结扎成功。结扎公鼠使母鼠产生阴道栓的能

FPLC技术基本实验原理

  FPLC(fast protein liquid Chromatography)为一种特殊的GX液相层析(HPLC,high pressureliquid chromatography)装置,快速分离纯化和定量测定蛋白质组分是它的主要用途。他的本原理相同于HPLC,就是在高压条件下(20—200

实验技术:细胞培养基本技术

一、操作规程:1.实验前,无菌室及无菌操作台用紫外灯照射30-60分钟灭菌,用70%酒精擦拭无菌操作台面,并开启无菌操作台风机运转10分钟后,才可开始实验操作.每次操作只处理一株细胞,以免造成细胞交叉污染.实验结束后,将实验物品带出工作台。如需要继续进行下一个实验,则用70%酒精擦拭无菌操作台面,再

实验技术:细胞培养基本技术

   细胞培养   一、操作规程:   1.实验前,无菌室及无菌操作台用紫外灯照射30-60分钟灭菌,用70%酒精擦拭无菌操作台面,并开启无菌操作台风机运转10分钟后,才可开始实验操作.每次操作只处理一株细胞,以免造成细胞交叉污染.实验结束后,将实验物品带出工作台。如需要继续进行下一个实验,则用

动物实验的基本操作技术

动物实验的基本操作技术实验动物(experimental animals)是指经过人工饲养、繁育,对其携带的微生物及寄生虫实行控制,遗传背景明确或者来源清楚,应用于科研、教学、生产和检定以及其他科学实验的动物。这些个体具有较好的遗传均一性、对外来刺激的敏感性和实验再现性。 一、常用实验动物的种类

生物化学实验基本技术—破碎技术

除了某些细胞外的多肽激素和某些蛋白质与酶以外,对于细胞内或多细胞生物组织中的各种生物大分子的分离纯化,都需要事先将细胞和组织破碎,使生物大分子充分释放到溶液中,并不丢失生物活性。不同的生物体或同一生物体的不同部位的组织,其细胞破碎的难易不一,使用的方法也不相同,如动物脏器的细胞膜较脆弱,容易破碎,植

生物化学实验基本技术:破碎技术

除了某些细胞外的多肽激素和某些蛋白质与酶以外,对于细胞内或多细胞生物组织中的各种生物大分子的分离纯化,都需要事先将细胞和组织破碎,使生物大分子充分释放到溶液中,并不丢失生物活性。不同的生物体或同一生物体的不同部位的组织,其细胞破碎的难易不一,使用的方法也不相同,如动物脏器的细胞膜较脆弱,容易破碎,植

生物化学实验基本技术:破碎技术

除了某些细胞外的多肽激素和某些蛋白质与酶以外,对于细胞内或多细胞生物组织中的各种生物大分子的分离纯化,都需要事先将细胞和组织破碎,使生物大分子充分释放到溶液中,并不丢失生物活性。不同的生物体或同一生物体的不同部位的组织,其细胞破碎的难易不一,使用的方法也不相同,如动物脏器的细胞膜较脆弱,容易破碎,植

生物化学实验基本技术:破碎技术

除了某些细胞外的多肽激素和某些蛋白质与酶以外,对于细胞内或多细胞生物组织中的各种生物大分子的分离纯化,都需要事先将细胞和组织破碎,使生物大分子充分释放到溶液中,并不丢失生物活性。不同的生物体或同一生物体的不同部位的组织,其细胞破碎的难易不一,使用的方法也不相同,如动物脏器的细胞膜较脆弱,容易破碎,植

动物实验的基本操作技术2

5.非纯系动物(no-sheer series)一般是指任意交配繁殖的杂种动物。此类动物具有生命力旺盛、适应性强、繁殖率高、生长快、易于饲养管理等优点。其缺点是个体差异大、反应性不规则、实验结果的重复性差。由于其中包含有最敏感的与最不敏感的两种极端的个体,因此适用于筛选性实验。杂种动物比较经济、教学

原代细胞基本实验技术小结

  A 原代细胞分离技术   取人或动物体内(或胚胎)的组织,将其剪碎至1mm3的组织块,再采用的如下方法进行分离培养:   一、悬浮细胞的分离方法   1、将血液、羊水、胸水或腹水等悬液直接转至离心管中,1000rpm/分钟离心5分钟。   2、去掉上清,离心沉淀用无钙、镁的PBS

实验动物外科基本操作技术

1. 切开根据实验要求确定手术部位切口的大小。切开时先绷紧皮肤,将刀刃与皮肤垂直,用力要得当,1 次切开皮肤全层,切缝整齐而不偏斜。切开皮肤及皮下组织时,要求按解剖层次切开,尽量避开血管并注意止血,避免损伤深层的重要组织器官。2. 止血止血是手术操作中的重要环节。手术过程中止血完善与否,不仅直接影响

动物实验的基本操作技术1

实验动物实验动物(experimental animals)是指经过人工饲养、繁育,对其携带的微生物及寄生虫实行控制,遗传背景明确或者来源清楚,应用于科研、教学、生产和检定以及其他科学实验的动物。这些个体具有较好的遗传均一性、对外来刺激的敏感性和实验再现性。一、常用实验动物的种类和特点(一)狗(do

原代细胞基本实验技术小结(一)

A 原代细胞分离技术 取人或动物体内(或胚胎)的组织,将其剪碎至1mm3的组织块,再采用的如下方法进行分离培养: 一、悬浮细胞的分离方法 1、将血液、羊水、胸水或腹水等悬液直接转至离心管中,1000rpm/分钟离心5分钟。 2、去掉上清,离心沉淀用无钙、镁的PBS清洗后1000rpm/分钟离心5分钟

原代细胞基本实验技术小结(二)

D 原代细胞传代技术 一、贴壁细胞的消化法传代 1、吸除或倒掉瓶内旧培养液。 2、加入1ml左右消化液(胰蛋白酶或与EDTA混合液)轻轻摇动培养瓶,使瓶底细胞都浸入溶液中。 3、消化2-5分钟后把培养瓶放置在显微镜下进行观察,发现原贴壁的细胞逐渐趋于圆形,在还未漂起时,弃去消化液,加入培养液终止消化

实验离心技术的基本计算法(一)

一、一般计算设离心转头以匀角速度ϖ在离心室中等速旋转,悬浮在离心管或转头中溶剂内的颗粒(被分离的)的密度为σ,溶剂(或梯度材料)的密度为ρ,粘性系数为η。颗粒所在位置与旋转中心距离r,颗粒本身体积为V。根据经典的牛顿力学基本原理,质量为m的颗粒受到的离心力为:用 N=rpm=转/分来表示定义 RCF

实验离心技术的基本计算方法

一、一般计算设离心转头以匀角速度ϖ在离心室中等速旋转,悬浮在离心管或转头中溶剂内的颗粒(被分离的)的密度为σ,溶剂(或梯度材料)的密度为ρ,粘性系数为η。颗粒所在位置与旋转中心距离r,颗粒本身体积为V。根据经典的牛顿力学基本原理,质量为m的颗粒受到的离心力为:用 N=rpm=转/分来表示定义 RCF

实验离心技术的基本计算法(二)

也可以表达为四、沉降时间计算:(1)、一般分析沉降时间可以对t的积分求得:设颗粒起始位置的rmin,沉降终了位置为 rmax,从 rmin沉降到 rmax所需要的时间为:很明显如果给出了沉降时间就可以算出沉降系数: 对现代离心机,ω2 Ts在离心过程中可自动计算,这样计算就十分简单,针对(11)式,