基本实验技术
I. Safety ProceduresA. ChemicalsA number of chemicals used in this laboratory are hazardous. All manufacturers of hazardous materials are required by law to supply the user with pertinent information on any hazards associated with their chemicals. This information is supplied in the form of Material Safety Data Sheets or MSDS. This information contains the chemical name, CAS#, health hazard d......阅读全文
PCR实验技术(二)
【方法】方法一、基本的PCR方法下面介绍的基本PCR方法可作为任何PCR扩增的一般指导和出发点。由于各种PCR反应条件(如PCR扩增次数、温度、Taq DNA聚合酶的浓度、引物、氯化镁以及模板DNA)变异极大,应根据具体情况,对各种PCR反应条件进行相应调整。1.按以下次序,将各成分加入0.2 ml
PCR实验技术(三)
【注意事项】1. PCR引物设计:引物设计可能是PCR扩增成功最关键的因素。如引物设计欠佳,可能导致扩增产物不足,甚至扩增失败,其原因是设计欠佳的引物可导致非特异扩增和/或形成引物二聚体,此又成为PCR反应的竞争性产物,从而进一步抑制PCR产物形成。在引物设计时必须考虑以下几个因素,其中最重要的是引
Northern-blot实验技术
一、经乙二醛和二甲基亚砜变性处理后进行的RNA电泳这一方法原于McMaster和Carmichael(1977)。 含有乙二醛-DMSO的凝胶比含有甲醛的凝胶更难于进行电泳,因为前者泳动速率较慢而且需将电泳液时行循环以避免电泳过程中形成过高的H+梯度。尽管上述两种凝胶具有近乎相等的分辨率(Mille
动物实验技术1
实验动物常用作病原微生物的分离和鉴定,进行动物接种实验应选择易感性高、健康的动物。常用的动物有小鼠、豚鼠和家兔。根据实验要求可通过皮下、皮内、肌肉、腹腔、静脉等途径注射。感染动物死亡后,必要时进行尸体解剖并作病原体的检查。 一、实验动物接种法 (一)小白鼠接种法 【
植物制片实验技术
实验概要 植物制片技术是植物显微技术的一个重要组成部分,在有关植物形态建成、植物杂交育种、作物病虫害防治、药用植物的培育和鉴别以及林木材性鉴定等多方面的研究工作中,都需要应用显微制片技术,本实验介绍了植物制片基本方法。 主要试剂 1. FAA固定液(福尔马林-冰醋酸
高级生化技术实验
1、鸡卵类粘蛋白的分离与纯化 2、SDS-PAGE电泳法测定蛋白质相对分子质量 3、凝胶过滤层析法测定蛋白质分子量 4、离子交换层析技术分离单核苷酸。
RNA干扰实验技术
实验概要本文介绍了RNA干扰的原理及基本实验方法,包括了siRNA的设计、siRNA的制备和siRNA的转染等方法,及RNA干扰实验中的注意事项。实验原理近年来的研究表明,将与mRNA对应的正义RNA和反义RNA组成的双链RNA(dsRNA)导入细胞,可以使mRNA发生特异性的降解,导致其相应的基因
动物实验技术2
2.于第①、②、③管内分别加乙型溶血性链球菌培养物、四联球菌培养物、生理盐水各0.5m1。 3.上述3支试管每管加入5%氯化钙0.2ml,摇匀,置37℃水浴10min,待血液凝固,再继续37℃水浴约30min,观察结果。 【结果】 l.观察时,可将小试管慢慢倾斜至30°
动物实验技术1
实验动物常用作病原微生物的分离和鉴定,进行动物接种实验应选择易感性高、健康的动物。常用的动物有小鼠、豚鼠和家兔。根据实验要求可通过皮下、皮内、肌肉、腹腔、静脉等途径注射。感染动物死亡后,必要时进行尸体解剖并作病原体的检查。一、实验动物接种法(一)小白鼠接种法【材料】1.小白鼠。2.无菌注射器(1ml
植物制片实验技术
实验概要植物制片技术是植物显微技术的一个重要组成部分,在有关植物形态建成、植物杂交育种、作物病虫害防治、药用植物的培育和鉴别以及林木材性鉴定等多方面的研究工作中,都需要应用显微制片技术,本实验介绍了植物制片基本方法。主要试剂1. FAA固定液(福尔马林-冰醋酸-酒精),又称万能固定液或称标准保全液。
真菌基本检验技术概述
真菌检验基本上可分为培养技术和非培养技术两大类。非培养技术又分为显微镜检查技术、生化免疫检查技术和分子生物学技术。前者是直接观察真菌形态,其中组织病理学检查为侵袭性真菌感染诊断的金标准;后者是检测真菌的抗原、抗体和核酸。这些技术的综合使用可大大地提高侵袭性真菌感染诊断的准确性。图1为常见的真菌检验技
原代细胞传代基本技术
1. 选用原代细胞生长状态好(90-95%),生长数量大于5×10⁵进行传代。2. 吸除原代细胞培养液。用含双抗的1×PBS(pH7.4)清洗细胞培养瓶2次。3. 3ml细胞消化液加入细胞培养瓶,轻轻摇动,使细胞消化液覆细胞培养瓶底。(建议使用赛奥斯的原代细胞消化液。)4. 细胞培养瓶置于5%CO2
激光技术的基本特性
激光被广泛应用是因为它的特性。激光几乎是一种单色光波,频率范围极窄,又可在一个狭小的方向内集中高能量,因此利用聚焦后的激光束可以对各种材料进行打孔。以红宝石激光器为例,它输出脉冲的总能量不够煮熟一个鸡蛋,但却能在3毫米的钢板上鉆出一个小孔。激光拥有上述特性,并不是因为它有与别的光不同的光能,而是它的
石蜡切片制作基本技术
石蜡切片 石蜡切片(paraffin section) 组织学常规制片技术中最为广泛应用的方法。石蜡切片不仅用于观察正常细胞组织的形态结构,也是病理学和法医学等学科用以研究、观察及判断细胞组织的形态变化的主要方法,而且也已相当广泛地用于其他许多学科领域的研究中。教学中,光镜下观察切片标本多数是石蜡
PCR技术基本反应步骤
PCR是Polymerase Chain Reaction(聚合酶链式反应)的首字母缩写,简单说来,PCR是由高温变性—低温退火—中温延伸三个基本反应步骤构成:01 DNA的变性成为单链模板DNA经加热至95℃左右一定时间后,使模板DNA双链解离成为单链,以便它与引物结合,为下轮反应做准备;02低温
石蜡切片的基本技术
说明石蜡切片法包括取材、固定、洗涤和脱水、透明、浸蜡、包埋、切片与贴片、脱蜡、染色、脱水、透明、封片等步骤。一般的组织从取材固定到封片制成玻片标本需要数日,但标本可以长期保存使用,为永久性显微玻片标本。取材应根据要求选取材料来源及部位。例如植物细胞有丝分裂多选取洋葱根尖,细胞分裂快又便于切取;猪的肝
透射电镜实验技术服务|实验技术服务
关键词:透射电镜实验技术服务|实验技术服务简介:世界*品牌透射电镜实验技术服务|实验技术服务原装,质量保证,价格优惠。透射电镜实验技术服务|实验技术服务——pCzn1质粒+Arctic Express宿主菌低温表达体系。我们具备丰富的蛋白表达设计经验及实验操作技巧,承诺客户不成功不收费。我们所有的实
细胞划痕实验(Wound-Healing)技术服务|实验技术服务
流程:1.先用marker笔在6孔板背后,用直尺比着,均匀得划横线,大约每隔0.5~1cm一道,横穿过孔。每孔至少穿过5条线。2.在空中加入约5X105个细胞,具体数量因细胞不同而不同,掌握为能铺满。3.第二天用头比着直尺,尽量垂至于背后的横线划痕,枪头要垂直,不能倾斜。4.用PBS洗细胞3次,去处
实验室分析技术快原子轰击源实验技术
1、靶和氩离子枪 用作靶的样品架安装在直接进样杆上,作为载体的靶材为金属材料,如银、铜、不锈钢等。样品架的斜面通常为25°~30°,中性原子束和产生的样品离子束之间的夹角一般为60°,靶的周围用小的金属圆筒包围以提供合适的电位有助于拉出二次离子。样品架还可制成可加热的方式,以研究温度的效应。由于溅
实验室有机实验的基本知识
1 有机实验:十大原则 一、拿到一个目标化合物,一定要好好做文献检索并调阅原文,如果是已知化合物,选择一般、不是很苛刻的条件(如需要特殊催化剂、严格无水无氧等)、易于工业化的工艺来做小试;如果没有相同的化合物,选择那些相似度高的工艺。 二、对于第一次做的反应,应该了解所有用到的原料的物理、
实验室实验动物设施基本要求
(1)选址宜选在环境空气质量及自然环境条件较好的区域。应避开自然疫源地;生产设施宜远离可能产生交叉感染的动物饲养场所;宜远离有严重空气污染、振动或噪声干扰的铁路、码头、飞机场、交通要道、工厂贮仓、堆场等区域。动物生物安全实验室与生活区的距离应符合“GB 19489 实验室 生物安全通用要求”和“GB
实验室光谱仪器红外显微成像技术的基本原理
FTIR显微成像技术是对一个选定区域(几十微米到数十毫米)的每一个点(像素)进行红外光谱测定,然后用计算机技术将这些点的红外光谱按区域进行二维或三维图谱绘制。该成像技术依赖于三方面:①扫描:②空间编码和解码:③红外显微镜及多通道检测器。当进行红外成像时,首先根据不同检测目的选择相应的检测器,并选择感
动物实验技术:转基因小鼠制备实验
1、 选取7~8周龄雌性小鼠,阴道口封闭,作为供体,下午3:00左右,每只小鼠腹腔注射PMSG(10 IU)。2、 47~48小时后,每只小鼠腹腔注射HCG(0.8 IU),并与正常公鼠合笼;另取数只适龄母鼠(2月龄以上)作为受体,阴道口潮红,与结扎公鼠合笼。3、第二天上午9:00前观察供体、受体,
PCR基本实验方法(二)
Recommended Reaction Conditions:Initial Conditions:Initial denaturation at start: 92 - 97oC for 3 - 5 min. If you denature at 97oC, denature sample on
PCR基本实验方法(一)
Recommended Reagent Concentrations:Primers: 0.2 - 1.0 uMNucleotides: 50 - 200 uM EACH dNTPDimethyl sulphoxide (DMSO): 0 - 10% (v/v)Taq polymerase: 0.5
原位PCR实验的基本方法
① 固定组织或细胞:将组织细胞固定于预先用四氟乙烯包被的玻片上,并用多聚甲醛处理,再灭活除去细胞内源性过氧化物酶。 ②蛋白酶K消化处理:用60ug/ml的蛋白酶K将固定好的组织细胞片55℃消化处理2h后,96℃2min以灭活蛋白酶K。 ③PCR扩增:在组织细胞片上,加PCR反应液,覆盖并加液
RIP-实验基本原理
(1)用抗体或表位标记物捕获细胞核内或细胞质中内源性的RNA结合蛋白。(2)防止非特异性的RNA的结合。(3)免疫沉淀把RNA结合蛋白及其结合的RNA一起分离出来。(4)结合的RNA序列通过microarray(RIP-Chip),定量RT-PCR或高通量测序(RIP-Seq)方法来鉴定。
PCR基本实验方法(二)
Recommended Reaction Conditions:Initial Conditions:Initial denaturation at start: 92 - 97oC for 3 - 5 min. If you denature at 97oC, denature sample on
PCR基本实验方法(五)
Cloning PCR ProductsT-A Cloning Strategy: Taq and other polymerases seem to have a terminal transferase activity which results in the non-templated ad
PCR基本实验方法(三)
Temperature Cycling:92 - 94oC for 30 - 60 sec (denature)37 - 72oC for 30 - 60 sec (anneal)72oC for 30 - 60 sec (elongate) (60 sec per kb target sequen