LipoproteinAnalysisWeek2:Electrophoresis2
Preparation of stacking gelPrepare a 7.5 ml of 3% stacking gel in a small beaker using the following amounts of appropriate reagents.Stockfinal conc.Amount to use0.5 M Tris-HCl0.125M 1.88 ml10 % Acryl:Bis* 3% 2.25 ml10% SDS0.1% 0.075 ml10% APS 0.1% 0.10 mlH2O 3.19 mlTEMED 0.00067% 10 µl*Use the 10 % stock solution!3. When the polymerization of resolving gel is complet......阅读全文
Apoptosis:-A-Laboratory-Manual-of-Experimental-Methods-Andrea-Cossarizza
THE CELL 1. Morphological aspects of apoptosis Walter Malorni, Stefano Fais & Carla Fiorentini 2. Cell cycle Miriam Capri & Daniela BarbieriTHE NUCLEU
江桂斌院士:Environmental--Food-Analysis:Problem--Challenges
2014年4月21日下午,第十届全国生物医药色谱及相关技术学术交流会大会报告在威海召开。来自中国科学院生态环境研究中心环境化学与生态毒理学国家重点实验室的江桂斌院士带来了题为《Environmental & Food Analysis:Problem & Challeng
In-Vivo-Imaging-of-Far2
In vivo bio-imaging Mice were anesthetized and placed in a custom-made bed, which allowed stable and reproducible imaging of the legs. In vivo scann
Interleukin6-Induced-Acute-Phenotypic-Microenvironment-Promote...(二)
As a primary component of circulatory system, serum is the major reservoir of thousands of proteins secreted or “leaked” from a broad spectrum of
基于PCR技术的染色质沉淀分析2
METHOD Analysis of precipitated chromatin fractions (from Chromatin Immunoprecipitation on Unfixed Chromatin from Cells and Tissues to Analyze Histone
Critical-Appraisal-of-the-MTT-Assay-in-the-Presence-of-Rottlerin-3
LDH assay LDH assay was performed in culture medium of untreated confluent cells by using a commercial kit (Sclavo Diagnostics, Siena) based on the
沉淀反应实验:免疫电泳(immune-electrophoresis)实验
免疫电泳实验免疫电泳实验是先将抗原物质在琼脂凝胶中做电泳分离,然后于凝胶槽中加入抗体血清。使抗原抗体进行双向扩散,在比例适宜部位形成特异的抗原抗体沉淀弧线。每条沉淀弧线代表一组抗原抗体复合物,故可用抗原成分分析;且可以根据其迁移率与抗体所出现的特异反应进行鉴定。1、材料(1)待检标本(抗原):正常人
凝胶电泳(gel-electrophoresis)的注意事项
影响电泳分离的主要因素:待分离生物大分子的性质:待分离生物大分子所带的电荷、分子大小和性质都会对电泳有明显影响。一般来说,子带的电荷量越大、直径越小、形状越接近球形,则其电泳迁移速度越快。2. 缓冲液的性质:缓冲液的pH值会影响待分离生物大分子的解离程度,从而对其带电性质产生影响,溶液pH值距离
关于沉淀反应—火箭电泳(rocket-electrophoresis)-的简介
火箭电泳(rocket electrophoresis) 若在单向琼脂扩散基础上,加入抗原后,将琼脂板置电场中,使抗原置于负极即向正极定向扩散,在与板中的抗体结合而形成锥形沉淀峰,形似火箭,故名火箭电泳。沉淀峰的高度与抗原浓度成正比。由于在电场作用下,促使带负电荷多的抗原泳动,故火箭电泳需时短,
DNA酶切及凝胶电泳(gel-electrophoresis)
材料、设备及试剂 一、 材料 λDNA: 购买或自行提取纯化; 重组T-vector质料或pUC19质粒; EcoRI酶及其酶切缓冲液: 购买成品; HindⅢ酶及其酶切缓冲液: 购买成品;琼脂糖(Agarose): 进口或国产的电泳用琼脂糖均可。 二、 设备 水平式电泳装置,电泳仪,台式高
凝胶电泳(gel-electrophoresis)常见问题分析
琼脂糖凝胶电泳检测DNA时,跑出的带后面出现拖尾现象,什么原因造成的?参考见解: DNA带模糊:1、 DNA降解??避免核酸酶污染。2、 DNA上样量过多??减少凝胶中DNA上样量。3、 所用电泳条件不合适??电泳时电压不应超过20V/cm,温度<30℃,巨大DNA链,温度应<15℃,核查所用电泳缓
凝胶电泳(gel-electrophoresis)操作注意事项
1.缓冲系统:在没有离子存在时,电导率最小,DNA不迁移,或迁移极慢,在高离子强度的缓冲液中,电导很高并产热,可能导致DNA变性,因此应注意缓冲液的使用是否正确。长时间高压电泳时,常更新缓冲液或在两槽间进行缓冲液的循环是可取的。2.琼脂糖:不同厂家、不同批号的琼脂糖,其杂质含量不同,影响DNA的迁移
Pathology-and-Autopsy-of-a-mouse
if mouse is found deadif mouse is a newborn or < 1 wk of ageIf mouse is alive or moribund and above one week of ageRoutine dissectionFormalin fixation
An-Integrative-Procedure-for-Apoptosis-Identification-and-Measurement
IntroductionApoptosis is a normal physiological phenomenon put forward by Kerr [1]. It plays an important role in embryonic development, maintenance o
常用实验仪器名称中英文对照表(二)
其他 Other/Miscellaneous 流动分析与过程分析 Flow Analytical and Process Analytical Chemistry 气体分析 Gas Analysis 基本物理量测定 Basic Physics 样品处理 Sample Handl
实验室分析常用的缩写中英文对照和概念介绍
缩略语英文名称中文名称AAAamino acid analysis氨基酸分析AASatomic absorption spectrophotometry原子吸收分光光度法AEDatomic emission detection原子发射检测AESatomic emission spectrometry
Peptide-map-prediction
Peptide map predictionIn identifying peptides from proteins with a known sequence, it is often useful to be able to predict how a peptide will migrate
Peptide-map-prediction
In identifying peptides from proteins with a known sequence, it is often useful to be able to predict how a peptide will migrate during electrophoresi
芯片实验室及发展趋势(三)
③蛋白质分析 Duffy等[16]利用CD盘式塑料阵列芯片采用离心的方式进行了碱性磷酸酶分析,每个样品检测只需3mL试剂,几分钟内可分析几十个样品。瑞典的GYROS公司已生产出类似的产品并进行了肌球蛋白、IgG、IgA分析[17]。近来Burke 和Regnier[18]在芯片上利用电泳辅助微分
Life-Technologies提供全面的毛细管基因测序仪解决方案
Genetic Analyzer Instruments, Accessories & Associated ReagentsNo One Else Offers the Full SequenceApplied Biosystems equips all of its genetic analyz
甲醛洋菜胶体电泳(formaldehydeagarose-gel-electrophoresis)
甲醛洋菜胶体电泳 (formaldehyde-agarose gel electrophoresis)甲醛是一种常用的RNA 变性剂。在进行甲醛洋菜胶体电泳分析时,必须先配制含有甲醛的洋菜胶体,RNA 也必须先以甲醛及formamide 进行变性处理,以确保其二度结构充分被打开。由于甲醛可能
双向电泳(twodimensional-electrophoresis)完整操作步骤
(一)第一向等电聚焦从冰箱中取-20℃冷冻保存的水化上样缓冲液(I)(不含DTT,不含Bio-Lyte)一小管(1ml/管),置室温溶解。2. 在小管中加入0.01g DTT, Bio-Lyte 4-6、5-7各2.5ml,充分混匀。3. 从小管中取出400ml水化上样缓冲液,加入100ml样品,充
DNA酶切及凝胶电泳(gel-electrophoresis)1
第一节 概 述 一. DNA的限制性内切酶酶切分析 限制性内切酶能特异地结合于一段被称为限制性酶识别序列的DNA序列之内或其附近的特异位点上,并切割双链DNA。它可分为三类:Ⅰ类和Ⅲ类酶在同一蛋白质分子中兼有切割和修饰(甲基化)作用且依赖于ATP的存在。Ⅰ类酶结合于识别位点并随机的切割识别位
毛细管电泳及其应用(capillary-electrophoresis,-CE)
一、毛细管电泳的概述:毛细管电泳又称高效毛细管电泳,它是在熔融的石英毛细管(内径为25~100m)中进行电泳,其管内填充缓冲液或凝胶,是近年来进展最快的分析方法之一。毛细管电泳是电泳技术和现代微柱分离相结合的产物,它具有效率更高、速度更快、样品和试剂消耗量特少的特性。毛细管电泳仪的基本结构:1、
琼脂糖凝胶电泳(agarose-gel-electrophoresis)介绍
主要试剂:核酸电泳缓冲液有三种,即Tris-硼酸(TBE)、Tris-乙酸(TAE)和Tris-磷酸(TPE).TBE与TPE缓冲容量高,DNA分离效果好,但TPE在DNA段回收时含磷酸盐浓度高,容易使DNA沉淀.TAE缓冲容量低,但价格较便宜,因而推荐选用TBE.缓冲液中的EDTA可螯合二价阳离子
Protocol-for-Protein-Extraction-for-proteomics
Protocol for Protein Extraction10 % w/v TCA/ acetone/ 0.07 % v/v -MercaptoethanolPlant cells are rich in compounds that interfere with the 2DE separat
RNA点线杂交
RNA点线杂交(Dot and Slot blotting)· RNA dot blot and slot blot (Beverly Faulkner-Jones)This methods allows the rapid analysis of numerous small sa
实验仪器名称中英文对照表
仪器中文名称 仪器英文名称 英文缩写 原子发射光谱仪 Atomic Emission Spectrometer AES
酶活性分析(enzymatic-activity-analysis)法检定蛋白质
表现出来的酶GUS可以水解其基质衍生物pNPG,所产生的黄色生成物p-nitrophenol,可供活性测定 (Jefferson et al, 1986);仪器用具:ELISA光度计 (Dynatech);微量滴定盘 (microtiter plate, Nunc F96 Maxisorb 4424
顽拗性植物组织的蛋白质组学研究(苯酚法提取蛋白质)
1. 前言提取蛋白质是蛋白质组学研究的第一步。植物组织的蛋白质含量较低,并且存在多种非蛋白质成分,如细胞壁及贮藏多糖、脂质和酚类化合物,使蛋白质的提取难度增大 。植物蛋白质的可溶性与它们的细胞内定位关系密切,传统的蛋白质提取方法是用水合缓冲液、去垢剂或直接沉淀法 [1] 。除了普遍使用的 TCA