甲醛洋菜胶体电泳(formaldehydeagarosegelelectrophoresis)
甲醛洋菜胶体电泳 (formaldehyde-agarose gel electrophoresis)甲醛是一种常用的RNA 变性剂。在进行甲醛洋菜胶体电泳分析时,必须先配制含有甲醛的洋菜胶体,RNA 也必须先以甲醛及formamide 进行变性处理,以确保其二度结构充分被打开。由于甲醛可能是一种致癌物质,配制胶体及进行电泳分析时都应在抽气橱里小心操作;进行电泳时所使用的缓冲液为 MOPS (3-[N-morpholino] propanesulfonic acid)。此外,含有甲醛的洋菜胶体比较滑溜,容易破裂,在移动胶体时应特别留神。由于rRNA 占细胞RNA总量的80~85%,以ethidium bromide 染色后,呈现于胶体上的两个主要RNA色带应该分别是large 与small rRNAs (真核生物为28S 与18S,原核生物为23S 与16S);散布于small rRNA 附近,呈淡淡sm......阅读全文
甲醛洋菜胶体电泳(formaldehydeagarose-gel-electrophoresis)
甲醛洋菜胶体电泳 (formaldehyde-agarose gel electrophoresis)甲醛是一种常用的RNA 变性剂。在进行甲醛洋菜胶体电泳分析时,必须先配制含有甲醛的洋菜胶体,RNA 也必须先以甲醛及formamide 进行变性处理,以确保其二度结构充分被打开。由于甲醛可能
甲醛洋菜胶体电泳
甲醛洋菜胶体电泳 (formaldehyde-agarose gel electrophoresis)甲醛是一种常用的RNA 变性剂。在进行甲醛洋菜胶体电泳分析时,必须先配制含有甲醛的洋菜胶体,RNA 也必须先以甲醛及formamide 进行变性处理,以确保其二度结构充分被打开。由于甲醛可能是一种致
甲醛洋菜胶体电泳
实验概要本实验介绍了甲醛洋菜胶体电泳 (formaldehyde-agarose gel electrophoresis)的操作流程。实验原理甲醛是一种常用的RNA 变性剂,进行电泳时所使用的缓冲液为MOPS (3-[N-morpholino] propanesulfonic acid)。由于r
甲醛洋菜胶体电泳实验
甲醛洋菜胶体电泳 (formaldehyde-agarose gel electrophoresis)甲醛是一种常用的RNA 变性剂。用于(1)RNA的分离测定(2)RNA提纯。实验方法原理rRNA 占细胞RNA总量的80~85%,以ethidium bromide 染色后,呈现于胶体上的两个主要R
甲醛洋菜胶体电泳实验
甲醛洋菜胶体电泳 实验方法原理 rRNA 占细胞RNA总量的80~85%,以ethidium bromide 染色后,呈现于胶体上的两个主要RNA色带应该
甲醛洋菜胶体电泳实验
实验方法原理 rRNA 占细胞RNA总量的80~85%,以ethidium bromide 染色后,呈现于胶体上的两个主要RNA色带应该分别是large 与small rRNAs (真核生物为28S 与18S,原核生物为23S 与16S);散布于small rRNA 附近,呈淡淡smear
Native-gel-electrophoresis(非变性电泳)
Native gel electrophoresis Under native PAGE conditions, polypeptides retain their higher-order structure and often retain enzymatic activity and inte
DNA的凝胶电泳(gel-electrophoresis)
一、原理琼脂糖或聚丙烯酰胺凝胶是分离和纯化DNA片段的标准方法。聚丙烯酰胺凝胶电泳适用于分离小分子的核酸;琼脂糖凝胶孔径较大,被应用于大分子核酸的分离和纯化。在一定浓度的琼脂糖凝胶介质中,DNA分子的电泳迁移率与其分子量的常用对数成反比。当用低浓度的荧光嵌入染料溴化乙啶(EB)染色,在紫外光下至少可
DNA凝胶电泳(DNA-agarose-gel-electrophoresis)
实验原理琼脂糖凝胶电泳是常用的用于分离、鉴定DNA、RNA分子混合物的方法,这种电泳方法以琼脂凝胶作为支持物,利用DNA分子在泳动时的电荷效应和分子筛效应,达到分离混合物的目的。DNA分子在高于其等电点的溶液中带负电,在电场中向阳极移动。在一定的电场强度下,DNA分子的迁移速度取决于分子筛效应,即分
Gel-Electrophoresis-of-DNA
What is Electrophoresis?Electrophoresis is a technique used in the laboratory that results in the separation of charged molecules. In this CyberLab we
RNA-gel-electrophoresis
实验概要RNA gel electrophoresis主要试剂DEPC H2ODEPC 0.1% (v/v)q.s. de-ioinized H2O37ºC x1 hr, or r.t. overnightAutoclave.(NaOAc, EDTA and ethidium bromide sol
Agarose-Gel-Electrophoresis
实验概要Separating nucleic acid fragments by agarose gel electrophoresis.实验原理 Agarose gel electrophoresis remains the most widely used technique for sep
Agarose-gel-electrophoresis
General ProcedureCast a gelPlace it in gel box in running bufferLoad samplesRun the gelImage the gelCasting Gels0.7% agarose gel with 1kbp ladder in U
RNA-gel-electrophoresis
MaterialsDEPC H2ODEPC 0.1% (v/v)q.s. de-ioinized H2O37ºC x1 hr, or r.t. overnightAutoclave.(NaOAc, EDTA and ethidium bromide solutions should also be
凝胶电泳(gel-electrophoresis)的注意事项
影响电泳分离的主要因素:待分离生物大分子的性质:待分离生物大分子所带的电荷、分子大小和性质都会对电泳有明显影响。一般来说,子带的电荷量越大、直径越小、形状越接近球形,则其电泳迁移速度越快。2. 缓冲液的性质:缓冲液的pH值会影响待分离生物大分子的解离程度,从而对其带电性质产生影响,溶液pH值距离
DNA酶切及凝胶电泳(gel-electrophoresis)
材料、设备及试剂 一、 材料 λDNA: 购买或自行提取纯化; 重组T-vector质料或pUC19质粒; EcoRI酶及其酶切缓冲液: 购买成品; HindⅢ酶及其酶切缓冲液: 购买成品;琼脂糖(Agarose): 进口或国产的电泳用琼脂糖均可。 二、 设备 水平式电泳装置,电泳仪,台式高
凝胶电泳(gel-electrophoresis)操作注意事项
1.缓冲系统:在没有离子存在时,电导率最小,DNA不迁移,或迁移极慢,在高离子强度的缓冲液中,电导很高并产热,可能导致DNA变性,因此应注意缓冲液的使用是否正确。长时间高压电泳时,常更新缓冲液或在两槽间进行缓冲液的循环是可取的。2.琼脂糖:不同厂家、不同批号的琼脂糖,其杂质含量不同,影响DNA的迁移
凝胶电泳(gel-electrophoresis)常见问题分析
琼脂糖凝胶电泳检测DNA时,跑出的带后面出现拖尾现象,什么原因造成的?参考见解: DNA带模糊:1、 DNA降解??避免核酸酶污染。2、 DNA上样量过多??减少凝胶中DNA上样量。3、 所用电泳条件不合适??电泳时电压不应超过20V/cm,温度<30℃,巨大DNA链,温度应<15℃,核查所用电泳缓
胶体电泳法(gel-lectrophoresis)方法步骤
SDS 平板胶片铸造︰1) 整理出两组玻璃片及白板铸胶组合,先用酒精拭净,并选择合适的间隔条(0.75 mm) 组合起来。请熟悉铸胶三明治组合的正确组装方式,以免灌入的胶液漏出来。2) 三明治组合后直立站好,准备所要浓度的SDS 胶体溶液如表4.2. 两片0.75mm 厚的平板胶片约需10 mL 分
Polyacrylamide-Gel-Electrophoresis-of-Oligonucleotides
1. Pour and polymerize a 20% polyacrylamide gel, no Urea.2. Remove clamps. Rinse with water. Remove comb. Rinse top of gel well.3. Insert comb teeth d
Alkaline-agarose-gel-electrophoresis
Alkaline agarose gel electrophoresis (Sambrook et al., 1989)Alkaline agarose gels can be used to determine the size and quality of first and second st
Blue-Native-Gel-Electrophoresis
Blue Native Gel ElectrophoresisStock solutions49.5%T, 3%C Acrylamide 24 g acrylamide, 0.75 g bisacrylamide / 50 ml H2O Store at RT3 x Gel buffer 150 m
Agarose-Gel-Electrophoresis-of-DNA
1) Dissolve 1 g of agarose in 100 ml of 1X TAE or TBE buffer (gives a 1% gel). See note for making LMP agarose gel. 2) Cast the gel with the comb in p
DNA酶切及凝胶电泳(gel-electrophoresis)1
第一节 概 述 一. DNA的限制性内切酶酶切分析 限制性内切酶能特异地结合于一段被称为限制性酶识别序列的DNA序列之内或其附近的特异位点上,并切割双链DNA。它可分为三类:Ⅰ类和Ⅲ类酶在同一蛋白质分子中兼有切割和修饰(甲基化)作用且依赖于ATP的存在。Ⅰ类酶结合于识别位点并随机的切割识别位
DNA酶切及凝胶电泳(gel-electrophoresis)2
三、试剂 1、5×TBE电泳缓冲液:配方见第一章。 2、6×电泳载样缓冲液:0.25% 溴粉蓝,40%(w/v) 蔗糖水溶液,贮存于 4℃。 3、溴化乙锭(EB)溶液母液:将EB配制成10mg/ml,用铝箔或黑纸包裹容器,储于 室温即可。 第三节 操作步骤 一、
琼脂糖凝胶电泳(agarose-gel-electrophoresis)介绍
主要试剂:核酸电泳缓冲液有三种,即Tris-硼酸(TBE)、Tris-乙酸(TAE)和Tris-磷酸(TPE).TBE与TPE缓冲容量高,DNA分离效果好,但TPE在DNA段回收时含磷酸盐浓度高,容易使DNA沉淀.TAE缓冲容量低,但价格较便宜,因而推荐选用TBE.缓冲液中的EDTA可螯合二价阳离子
InGel-Digestion-of-Proteins-Separated-byPolyacrylamide-Gel-Electrophoresis
1. Excision of protein bands (spots) from polyacrylamide gelsRinse the gloves you use with water to avoid traces of dust in your sample.Rinse the gel
DNA琼脂糖凝胶电泳(agarose-gel-electrophoresis)分析
一、原理琼脂糖凝胶具有分子筛效应。在中性ppH值的电泳缓冲液体系中,DNA分子由于带负电荷,所以在电场作用下由负极向正极泳动。由于DNA分子的大小和构型不同,在相同的时间内迁移至不同的位置。凝胶经溴化乙锭染色后,紫外检测仪下观察,即可看见DNA片段按大小不同呈条带分布。由于在一定条件下,DNA的迁移
琼脂糖凝胶电泳(agarose-gel-electrophoresis)检测DNA
原理: 琼脂糖是从海藻中提取出来的一种线状高聚物,可作为电泳支持物,适用于分离大小范围在0.2-50kb的DNA片段。DNA分子的迁移率与分子量的对数值成反比关系。观察其迁移距离,与标准DNA片段进行对照,就可获知该样品分子量大小。在质粒抽提过程中,由于各种因素的影响,使质粒DNA呈现超螺旋的共
双向琼脂糖凝胶电泳(agarose-gel-electrophoresis)实验
【实验目的】了解和掌握双向电泳技术,并学习用它来研究与DNA 复制相关的问题。【实验原理】DNA 分子有线状的,还有一些非线状的,如复制叉和重组DNA 结构。双向琼脂糖凝胶电泳技术就是被人们开发用以研究一些非线状DNA 分子的。双向琼脂糖凝胶电泳技术(2-D gel)实际上可分为两类:中性/中性