动物实验基本技术2
第五节 实验动物的采血法实验研究中，经常要采集实验动物的血液进行常规质量检测、细胞学实验或进行生物化学分析，故必须掌握正确的采集血液的技术。采血方法的选择，主要决定于实验的目的和所需血量以及动物种类。一、大鼠、小鼠的采血方法(一)剪尾采血：需血量很少时常用本法，如作红、白细胞计数、血红蛋白测定、制作血涂片等可与此法。动物麻醉后，将尾尖剪去约5mm，从尾部向尾尖部按摩，血即从断端流出。也可用刀割破尾动脉或尾静脉，让血液自行流出。如不麻醉，采血量较小。采血结束后，消毒、止血。用此法每只鼠可采血10余次。小鼠可每次采血约0.1ml，大鼠约0.4ml。(二)眼眶后静脉丛采血：穿刺采用一根特制的长7～10cm硬的玻璃取血管,其一端内径为1 ～1.5mm，另一端逐渐扩大，细端长约1cm即可，将取血管浸入1％肝素溶液，干燥后使用。采血时，左手拇指及食指抓住鼠两耳之间的皮肤使鼠固定，并轻轻压迫颈部两侧，阻碍静脉回流，使眼球充分外突，提示眼眶后静......阅读全文
实验动物染毒途径和技术4
（三)经皮肤染毒> 经皮肤染毒的目的有两种。一种是经皮染毒毒性试验，如经皮Lao测定常用大鼠，皮肤致癌试验常用小鼠‘另一种是皮肤刺激和致敏试验，皮肤刺激试验常用兔和豚鼠，皮肤致敏试验用豚鼠。 被毛的去除：试验前用机械法(剪剃毛)或化学法(硫化胸或硫化钡)脱毛。对兔和啮6类常用的脱毛剂处方为：
实验动物染毒途径和技术3
经皮肤染毒的目的有两种。一种是经皮染毒毒性试验，如经皮Lao测定常用大鼠，皮肤致癌试验常用小鼠‘另一种是皮肤刺激和致敏试验，皮肤刺激试验常用兔和豚鼠，皮肤致敏试验用豚鼠。 被毛的去除：试验前用机械法(剪剃毛)或化学法(硫化胸或硫化钡)脱毛。对兔和啮6类常用的脱毛剂处方为：①硫
实验动物染毒途径和技术1
在毒理学试验中染毒途径的选择，应尽可能模拟人在接触该受试物的方式。最常用的染毒途径为经口、经呼吸道；经皮及注射途径。染毒的途径和方法根据实验目的、实验动物种类和药物剂型等情况确定。不同途径的吸收速率，一般是静脉注射>吸入>肌内注射>腹腔注射>皮下注射>经口>皮内注射>其他途径(如经皮等)
动物实验基本操作之四“妊娠检查”
一、妊娠诊断雌性动物妊娠后会发生一系列的复杂变化。为了在配种以后能及时掌握雌性动物是否妊娠、妊娠的时间及胎儿和生殖器官的异常情况，采用临床和实验室的方法进行检查，称为妊娠检查，又称妊娠诊断（pregnancy diagnosis）。通过妊娠检查，可以及时地对雌性动物加强护理或再次配种，以保护母体和胎
实验动物环境分类与基本要求
按照空气净化的控制程度,实验动物环境分为普通环境、屏障环境和隔离环境。(1)普通环境符合实验动物居住的基本要求,控制人员、物品和动物出入,不能完全控制传染因子,适用于饲育普通级实验动物。普通环境一般为单走廊专用房舍,通常分为三个区域:前区,包括检疫室、办公室、休息室等;控制区,包括动物饲育室或动物实
动物细胞的基本形态观察实验
实验方法原理细胞的形态结构与功能相关是很多细胞的共同特点，在分化程度较高的细胞更为明显，这种合理性是生物漫长进化过程所形成的。例如：具有收缩机能的肌细胞伸展为细长形；具有感受刺激和传导冲动机能的神经细胞有长短不一的树枝状突起；游离的血细胞为圆形、椭圆形或圆饼形。实验材料蟾蜍人血试剂、试剂盒甲苯胺兰甲
动物细胞的基本形态观察实验
实验方法原理 细胞的形态结构与功能相关是很多细胞的共同特点，在分化程度较高的细胞更为明显，这种合理性是生物漫长进化过程所形成的。例如：具有收缩机能的肌细胞伸展为细长形；具有感受刺激和传导冲动机能的神经细胞有长短不一的树枝状突起；游离的血细胞为圆形、椭圆形或圆饼形。实验材料 蟾蜍人血试剂、试剂盒 甲苯
FISH－技术基本实验
基本方案 实验方法原理 试剂、试剂盒 70%乙醇 SSC
FISH－技术基本实验
实验方法原理试剂、试剂盒70%乙醇SSC磷酸盐缓冲溶液（PBS)Hemo-De清理试剂蛋白酶溶液仪器、耗材水浴锅增湿器玻片实验步骤一、制备培养的中期细胞标本1.在一个独立小室里放置一个水浴锅和一台增湿器。湿度应大约50%，如果房间湿度计显示低于45%，则应使用加湿器。2.预热水浴锅至67℃±2℃，在
FISH－技术基本实验
实验方法原理 试剂、试剂盒 70%乙醇SSC磷酸盐缓冲溶液（PBS)Hemo-De清理试剂蛋白酶溶液仪器、耗材 水浴锅增湿器玻片实验步骤 一、制备培养的中期细胞标本1.在一个独立小室里放置一个水浴锅和一台增湿器。湿度应大约50%，如果房间湿度计显示低于45%，则应使用加湿器。2.预热水浴锅至67℃±
哺乳动物细胞的RNAi技术策略(2)
1.化学合成尽管化学合成是最贵的方法，但是却是最方便的――研究人员几乎不需要做什么工作。包括Ambion和Qiagen公司都可以根据用户要求提供高质量的化学合成si 。主要的缺点包括价格高，定制周期长，特别是有特殊需求的。由于价格比其他方法高，为一个基因合成3―4对si s 的成本就更高了，
实验动物的外科技术及急救实验（一）
一、实验动物常用的外科基本技术 （一）基本操作技术 1. 切开 根据实验要求确定手术切口的部位及大小。切开时先绷紧皮肤，将刀刃与皮肤垂直，用力要得当，一次切开皮肤全层，切缝整齐而不偏斜。切开皮肤及皮下组织时，一般要求按解剖层次逐层切开，注意止血，避免损伤深层的重要组织器官（图1，图2）。 图1图
实验动物的外科技术及急救实验（二）
3. 组织分离法 分离组织的目的在于充分显露深部组织，造成手术径路，便于切除病灶。操作时要注意以下原则：①在同一平面上力求一次垂直切开，以保切口边缘整齐，禁止斜切和锯切，以减少损伤，便于愈合。②在切开多层组织时，一般应按组织层次分层切开，切口大小应适当。③切开肌肉时，一般应沿肌纤维方向进行。④要确保
实验动物的外科技术及急救实验（四）
4.股部手术 （1）股动、静脉和股神经分离术：股三角内的血管、神经包括股动脉、股静脉和股神经，处于一层深筋膜之下。分离时，可用蚊式止血钳在耻骨肌与缝匠肌交点处小心地沿缝匠肌后部内侧缘分离，并将缝匠肌后部轻轻向外拉开，其下方即见深筋膜包围着的血管神经束。仔细分离深筋膜后，血管、神经即完全暴露。股静脉位
实验动物的外科技术及急救实验（三）
（二）基本手术 1.颈部手术 （1）气管插管术：以家兔为例。术中需使用常用手术器械、丝线、棉球、“Y”形气管套管、手术台、20%乌拉坦等。手术前，动物麻醉（20%乌拉坦1g/kg体重耳缘静脉注射），仰卧位固定，备皮。然后，用解剖刀在颈部，自甲状软骨下缘，沿下中线作一长约5～7cm皮肤切口，暴露胸骨舌
基本无菌化技术2
STERILIZATION Sterilization is the process that is intended to kill or remove all types of micro-organisms. There are two principal st erilization m
实验动物技术：大鼠胰腺移植模型制作
胰腺移植是目前临床上有效治疗I型糖尿病，挽救II型糖尿病晚期伴肾功能不全的外科手段，因此，胰腺移植一直受到广泛的关注，至今围绕着胰腺移植，仍有许多问题需要解决，这些问题的基础研究都需要在合适的动物模型上进行，其中大鼠因为其成本低，来源易，免疫系统与人类相似等优点，是目前器官移植领域流行的实验动物之一
实验动物手术台的技术条件
实验动物手术台是指用于固定或支撑动物并对动物实施解剖、手术的工作台及其辅助装置。它主要由台面、支架、固定装置、抽屉(物品箱)、机械或电控装置等部件构成。其大小、规格和形式,可因各种动物和实验不同而异。手术台可分为大动物手术台和小动物手术台。大动物手术台适用于犬、猪、羊和兔等实验动物；小动物手术台适用
动物实验基本操作之五“分组与编号”
动物实验之前，必须对实验动物进行随机分组和编号标记，这是做好实验和实验记录的前提。一、随机分组（一）当分为二组时例：设有雄性Wistar大鼠12只，按体重大小依次编为1，2，3，…，12号，试用完全随机的方法，分为甲、乙两组。分组方法：假设所产生的点是随机数字表上第21行第31列的78，则从78开始
FPLC技术基本实验原理
FPLC(fast protein liquid Chromatography)为一种特殊的GX液相层析(HPLC，high pressureliquid chromatography)装置，快速分离纯化和定量测定蛋白质组分是它的主要用途。他的本原理相同于HPLC，就是在高压条件下(20—200
动物实验与动物仪器
一、动物实验的主要目的 医疗器械的动物试验的主要目的是研究医疗器械的安全性，通常医学研究中的动物试验研究的主体可能是一种新诊治方法和原理，或一种新的药物的作用机理等等，它的主要研究目的是机理、有效性和安全性，这个研究可能与器械的使用存在联系，也可能不存在联系，且研究中可能没有涉及到植入或与
实验动物实验标本的采集实验——实验动物脑脊液采集
实验材料实验动物试剂、试剂盒消毒液仪器、耗材注射器实验步骤(1) 狗、兔脑脊液的采集：通常采取脊髓穿刺法，穿刺部位在两髂连线中点稍下方第七腰椎间隙。动物麻醉后侧卧位固定，头尾部尽量弯向腰部，去被毛。消毒后一手固定穿刺部位的皮肤，腰穿针垂直刺入，当有落空感及动物的后肢跳动时，针已达椎管内，抽去针芯，即
实验动物实验标本的采集实验——实验动物尿液采集
实验材料实验动物试剂、试剂盒水仪器、耗材收集器实验步骤尿液的采集 常用的采集方法较多，一般在实验前需给动物灌服一定量的水。(1) 代谢笼法：此法较常用，适用于大、小鼠。将动物放在特制的笼内。一般需收集 5 小时以上的尿液，最后取平均值。(2) 导尿法：常用于雄性兔、狗。动物轻度麻醉后，固定于手术台上
哺乳动物RNAi技术全面实验方法
WHENVIRUSESINFECTEUKARYOTICCELLSdomly integrate into host genomes, double-stranded RNA (dsRNA) is frequently produced from the invading genes, either
实验动物实验标本的采集实验——动物采血方法
实验材料实验动物试剂、试剂盒消毒液仪器、耗材注射器实验步骤(1) 大鼠、小鼠的采血方法：①剪尾采血：适用于少量采血，如制作血涂片、白细胞计数等。动物麻醉后，将尾尖剪去约 5 mm, 待血液流出采集。也可用刀割破尾动脉或尾静脉，让血液自行流出。小鼠可每次采血约 0. 1 ml, 大鼠约 0.4 ml。
高等学校动物实验安全管理基本要求
(1)各地教育部门和高等学校要高度重视动物实验安全管理工作,切实加大各级管理部门的监管力度,组织开展动物实验安全专项检查,特别是对动物实验安全的重点部位和薄弱环节进行重点监管,堵塞漏洞,排除隐患,确保安全。(2)高等学校要按照国家各项动物实验安全规定,健全动物实验安全管理制度,制定并完善动物实验安全
哺乳动物组织的匀浆实验_基本方案
实验方法原理对于细胞内蛋白的纯化和特性分析，重要的是选择一种有效的方法来破碎细胞或组织，使蛋白迅速地从胞内相对隔离的空间中释放到缓冲液中，而该缓冲液应对所研究的蛋白的生物活性没有影响。广泛使用的破碎软组织的方法之一是匀浆。蛋白酶从其他的细胞区隔中释放出来的风险很小。可以通过在匀浆缓冲液中加人蛋白酶抑
免疫酶细胞化学实验技术2
（四）染色原理及步骤 1．基本原理 酶标抗体与荧光色素标记抗体的染色相同，亦分直接法和间接法。直接法是将酶直接标记在每一抗体上，间接法是将酶标记在第二抗体上，检测组织细胞内的特定抗原物质。间接法所用的第一抗体是对组织细胞内某种抗原的特异性抗体（80%～90%的抗血清系由家兔制得，而绝大数单克隆
利用动物能量代谢测量技术研究环境污染对动物的影响2
毒死蜱（农药）-田鼠毒死蜱（CPF）是一种最常用的有机磷杀虫剂，CPF的生物活性产生更具神经毒性的CPF-oxon，抑制乙酰胆碱酯酶活性，导致胆碱能神经元反复放电，使得昆虫异常兴奋、痉挛、麻痹、死亡。啮齿动物栖息于农田，因此其暴露风险很高。虽然它们不是目标生物，杀虫剂可能不会总是杀死非目标生物，但它
实验动物实验标本的采集实验——实验动物腹水的采集
实验材料实验动物试剂、试剂盒消毒液仪器、耗材注射器实验步骤抽取大鼠、小鼠的腹水时，抓取固定动物，使动物腹部朝上，消毒皮肤，针头在腹股沟和腹中线之间刺人腹腔，腹压高时腹水自然流出，腹水少时可用注射器抽取。