动物实验基本技术2
第五节 实验动物的采血法实验研究中,经常要采集实验动物的血液进行常规质量检测、细胞学实验或进行生物化学分析,故必须掌握正确的采集血液的技术。采血方法的选择,主要决定于实验的目的和所需血量以及动物种类。一、大鼠、小鼠的采血方法(一)剪尾采血:需血量很少时常用本法,如作红、白细胞计数、血红蛋白测定、制作血涂片等可与此法。动物麻醉后,将尾尖剪去约5mm,从尾部向尾尖部按摩,血即从断端流出。也可用刀割破尾动脉或尾静脉,让血液自行流出。如不麻醉,采血量较小。采血结束后,消毒、止血。用此法每只鼠可采血10余次。小鼠可每次采血约0.1ml,大鼠约0.4ml。(二)眼眶后静脉丛采血:穿刺采用一根特制的长7~10cm硬的玻璃取血管,其一端内径为1 ~1.5mm,另一端逐渐扩大,细端长约1cm即可,将取血管浸入1%肝素溶液,干燥后使用。采血时,左手拇指及食指抓住鼠两耳之间的皮肤使鼠固定,并轻轻压迫颈部两侧,阻碍静脉回流,使眼球充分外突,提示眼眶后静......阅读全文
实验技术:细胞培养基本技术
一、操作规程:1.实验前,无菌室及无菌操作台用紫外灯照射30-60分钟灭菌,用70%酒精擦拭无菌操作台面,并开启无菌操作台风机运转10分钟后,才可开始实验操作.每次操作只处理一株细胞,以免造成细胞交叉污染.实验结束后,将实验物品带出工作台。如需要继续进行下一个实验,则用70%酒精擦拭无菌操作台面,再
实验技术:细胞培养基本技术
细胞培养 一、操作规程: 1.实验前,无菌室及无菌操作台用紫外灯照射30-60分钟灭菌,用70%酒精擦拭无菌操作台面,并开启无菌操作台风机运转10分钟后,才可开始实验操作.每次操作只处理一株细胞,以免造成细胞交叉污染.实验结束后,将实验物品带出工作台。如需要继续进行下一个实验,则用
动物实验时动物的选择
为了获得理想的实验结果,必须根据实验目的选择适宜的观察对象,在选择动物时,需考虑如下因素: 种属的选择不同种属的动物对同一疾病病因刺激的反应程度会有很大的差异。在选择实验动物时,尽可能选择对刺激因素较为敏感且与人类接近的种属。例如在进行发热实验时,宜首选家兔:在进行过敏反应和变态反应实验时,宜首选豚
动物免疫实验
实验概要将某种蛋白注射新西兰大耳兔产生免疫反应,通过ELISA检测免疫产生的抗体。实验原理将抗原吸附在固相载体表面,加入抗血清,抗体和抗原在载体表面形成抗原-抗体复合物,洗去未结合抗体,然后加入辣根过氧化物酶标记的二抗(抗体的抗体),二抗与抗体结合,洗去未结合二抗,加底物显色剂显色,在一定波长下测定
动物免疫实验
实验概要将某种蛋白注射新西兰大耳兔产生免疫反应,通过ELISA检测免疫产生的抗体。实验原理将抗原吸附在固相载体表面,加入抗血清,抗体和抗原在载体表面形成抗原-抗体复合物,洗去未结合抗体,然后加入辣根过氧化物酶标记的二抗(抗体的抗体),二抗与抗体结合,洗去未结合二抗,加底物显色剂显色,在一定波长下测定
细胞破碎技术的基本概念及其基本方法2
(3)胶体磨胶体磨的基本原理是流体或半流体物料在离心力的作用下,强制通过高速相对运动的定齿与动齿之间,使物料受到强大的剪切力,磨擦力、高频振动和高速旋涡等复杂力等作用,有效地被粉碎、乳化、均质、混合,从而达到精细超微的效果。定转子间的高速相对运动是使胶体磨工作获得物理微细度的主要条件,只有提高磨盘的
中国实验动物学会科学技术奖颁发
近日从第九届中国实验动物科学年会上获悉,中国医学科学院医学实验动物研究所承担的项目“传染病动物模型实验研究技术平台的建设”获中国实验动物学会科学技术奖一等奖。 据悉,第三军医大学的“医用小型猪标准化、应用关键技术及重要特性研究”、天津市疾控中心等的“野生来源TW小鼠近交系的建立及优势生物特
常用小型实验动物灌胃给药技术方法介绍
随着生命科学技术的发展,动物实验已成为医学实验研究的基本方法。根据实验研究目的、实验动物的种类及药物剂型、剂量的不同,要求对实验动物实施不同的给药方法。尤其对于药物的毒理、药效的研究和药物剂量的确定,经口灌胃给药方法是一种重要的途径。在国内文献上却很少见到具体的描述。在此,作者将在实践中摸索出的一套
实验动物等级及其饲育环境的技术指标
按照《GB 14925-2001实验动物 环境及设施国家标准》规定,实验动物是指经人工饲育,对其携带微生物实行控制,遗传背景明确或者来源清楚的用于科学研究、教学、生产、检定以及其他科学实验的动物。在微生物控制方面,实验动物分为四个等级: 一级 普通动物(conventional anima
杂交瘤技术基本程序与方法2
2、细胞融合 (1)主要试剂的配制 ①细胞培养基杂交瘤技术中使用的细胞培养基主要有RPMI-1640或DMEM(Dulberco Modified Eagles Medium)两种基础培养基,具体配制方法按厂家规定的程序,配好后过滤除菌(0.22um),分装,4℃保存。 •不完全RPMI-1640培
生物化学实验的基本操作2
二、一般操作技术1、混匀法:欲使一化学反应充分进行,必须使反应体系内各种物质迅速地相互接触,因此除特别规定外,一般都需要将反应物彻底混匀。混匀方式大致有以下几种,可随使用的器皿的液体容量而选用。(1)旋转混匀法:手持容器作离心旋转,适用以未盛满液体的试管或小口器皿,如三角瓶等。(2)弹指混匀法:左手
实验动物标记实验
实验材料兔子 小鼠试剂、试剂盒3%~5%苦味酸 0.5%中性品红 2%硝酸银实验步骤1. 染色法 适用于小动物,如兔子、大鼠、小鼠等。此方法是将化学药品涂在动物的被毛上,以不同颜色来区分动物。常用的化学药品有:3%~5%苦味酸溶液(黄色)、0.5%中性品红(红色)、2%硝酸银(咖啡色)。标记的原则是
实验动物标记实验
实验材料 兔子 小鼠试剂、试剂盒 3%~5%苦味酸 0.5%中性品红 2%硝酸银实验步骤 1. 染色法 适用于小动物,如兔子、大鼠、小鼠等。此方法是将化学药品涂在动物的被毛上,以不同颜色来区分动物。常用的化学药品有:3%~5%苦味酸溶液(黄色)、0.5%中性品红(红色)、2%硝酸银(咖啡色)
啮齿类实验动物——实验动物兽医护理
实验动物兽医护理(上篇)上期小华介绍了很多动物福利的内容,那么实验动物的福利该如何具体实施?随着全球实验动物行业的发展和规范,这中间对于兽医的要求越来越高,起到与IACUC(实验动物管理与使用委员会)同等重要的监督作用。这期小华将跟您聊一聊实验动物的兽医护理在实验动物福利的具体施行方面应注意的问题。
动物血液分析仪2
进样类型:自动清除吸样针内的加EDTA的全血。 样品体积:20ul全血。 测试周期:2分钟。 数据输入:面板上预设6个物种键和一个“OTHER”键。液晶显示。 数据输出:定制报告(8.5”x11”或A4)WBC分组,RBCs,PLTs加另外的标记NRBC#,NRBC%,高级3D图示。RS2
人类疾病动物模型2
三、心血系系疾病的动物模型(一)动脉粥样硬代模型常选用兔、猪、大鼠、鸡、鸽、猴和犬等动物。常用的复制方法有下面几种(包括高血脂模型):1.高胆固醇、高脂肪饲料喂养法:是目前比较常用的方法,特点是死亡率低,可长期观察,但费时久。一般在家兔、鸽、鸡等,经数周喂养就可产生明显的高脂血症,经数月就能形成早期
生物化学实验基本技术:破碎技术
除了某些细胞外的多肽激素和某些蛋白质与酶以外,对于细胞内或多细胞生物组织中的各种生物大分子的分离纯化,都需要事先将细胞和组织破碎,使生物大分子充分释放到溶液中,并不丢失生物活性。不同的生物体或同一生物体的不同部位的组织,其细胞破碎的难易不一,使用的方法也不相同,如动物脏器的细胞膜较脆弱,容易破碎,植
生物化学实验基本技术—破碎技术
除了某些细胞外的多肽激素和某些蛋白质与酶以外,对于细胞内或多细胞生物组织中的各种生物大分子的分离纯化,都需要事先将细胞和组织破碎,使生物大分子充分释放到溶液中,并不丢失生物活性。不同的生物体或同一生物体的不同部位的组织,其细胞破碎的难易不一,使用的方法也不相同,如动物脏器的细胞膜较脆弱,容易破碎,植
生物化学实验基本技术:破碎技术
除了某些细胞外的多肽激素和某些蛋白质与酶以外,对于细胞内或多细胞生物组织中的各种生物大分子的分离纯化,都需要事先将细胞和组织破碎,使生物大分子充分释放到溶液中,并不丢失生物活性。不同的生物体或同一生物体的不同部位的组织,其细胞破碎的难易不一,使用的方法也不相同,如动物脏器的细胞膜较脆弱,容易破碎,植
生物化学实验基本技术:破碎技术
除了某些细胞外的多肽激素和某些蛋白质与酶以外,对于细胞内或多细胞生物组织中的各种生物大分子的分离纯化,都需要事先将细胞和组织破碎,使生物大分子充分释放到溶液中,并不丢失生物活性。不同的生物体或同一生物体的不同部位的组织,其细胞破碎的难易不一,使用的方法也不相同,如动物脏器的细胞膜较脆弱,容易破碎,植
电泳技术:生物化学实验常用技术2
琼脂糖凝胶电泳琼脂糖凝胶电泳是一种以琼脂糖凝胶为支持物的凝胶电泳,其分析原理与其它支持物电泳的最主要区别是:它兼有“分子筛”和“电泳”的双重作用。琼脂糖凝胶具有网络结构,直接参与带电颗粒的分离过程,在电泳中,物质分子通过空隙时会受到阻力,大分子物质在泳动时受到的阻力比小分子大,因此在凝胶电泳中,带电
层析技术:生物化学实验常用技术(2)
在分配层析中,大多选用多孔物质作为支持物,利用它对极性溶剂的亲和力,吸附某种极性溶剂作为固定相;用另一种非极性溶剂作为流动相。如果把待分离的混合物样品点在多孔支持物上,在层析过程中,非极性溶剂沿支持物流经样品点时,样品中的各种混合物便会按分配系数大小流动相而向前移动。当遇到前方的固定相时,溶于流动相
DNA实验技术:原位杂交实验要求及步骤2
三、操作步骤(一)取材、冰冻切片:将动物以3%戊巴比妥钠麻醉,打开胸腔,暴露心脏,刺破右心耳,将针尖刺入左心室用生理盐水灌注(灌注量约为动物体重的2倍),再注入等量的4%多聚甲醛。(见图2-7)。取材,置于4%多聚甲醛中后固定4hr。以0.1M PBS浸泡冲洗4-5次(换液:1次/hr)。将组织块入
实验动物实验标本的采集实验
(1) 大鼠、小鼠的采血方法:①剪尾采血:适用于少量采血,如制作血涂片、白细胞计数等。动物麻醉后,将尾尖剪去约 5 mm, 待血液流出采集。也可用刀割破尾动脉或尾静脉,让血液自行流出。小鼠可每次采血约 0. 1 ml, 大鼠约 0.4 ml。②眼眶后静脉丛采血:一手拇指及食指抓住鼠两耳之
原代细胞基本实验技术小结
A 原代细胞分离技术 取人或动物体内(或胚胎)的组织,将其剪碎至1mm3的组织块,再采用的如下方法进行分离培养: 一、悬浮细胞的分离方法 1、将血液、羊水、胸水或腹水等悬液直接转至离心管中,1000rpm/分钟离心5分钟。 2、去掉上清,离心沉淀用无钙、镁的PBS
决定实验动物IVC笼具大小的基本原则
决定实验动物IVC笼具大小的基本原则 •1.动物能容易地摄食、饮水.•2.动物能容易地排便、排尿、而不污染身体。•3.动物能有最低限度的自由活动和进行探索活动。•4.可以舒适地休息和睡眠。 .5 保证动物的正常生长和发育。
实验动物能量代谢测量系统的技术指标
双通道氧气分析测量范围0-100%,分辨率0.0001%,精确度优于0.1%,响应时间小于7秒,自动温度、压力补偿。二氧化碳测量范围0-3000ppm,分辨率达0.1ppm,精度:1%。水汽: 0-60 mmol/mol, 精度1%;8通道气路切换单元,抽样单元0-2000ml/m,精度优于2%
微生物学检验基本技术(2)
第六节 自动化技术在微生物检验中的应用 微生物鉴定的自动化技术近十几年得到了快速发展。数码分类技术集数学、计算机、信息及自动化分析为一体,采用商品化和标准化的配套鉴定和抗菌药物敏感试验卡或条板,可快速准确地对临床数百种常见分离菌进行自动分析鉴定和药敏试验。目前自动化微生物鉴定和药敏分析系统已在世界
微生物学检验基本技术(2)
第六节 自动化技术在微生物检验中的应用 微生物鉴定的自动化技术近十几年得到了快速发展。数码分类技术集数学、计算机、信息及自动化分析为一体,采用商品化和标准化的配套鉴定和抗菌药物敏感试验卡或条板,可快速准确地对临床数百种常见分离菌进行自动分析鉴定和药敏试验。目前自动化微生物鉴定和药敏分析系统已
动物极的基本介绍
1. 蛙卵子形似球体,外观半白半黑,黑的一侧称为动物极,卵的极体一般从动物极排出,其密度小质轻而在上。白的一侧叫植物极,内含有大量的卵黄颗粒,其密度大质重而在下。2. 受精蛋的外观在整个孵化过程中的变化大致如下:刚产出的受精卵外壳呈乳白色,一天后,逐渐在蛋上方出现一圆形白斑,这个白斑称为动物极。3.