细胞培养用液的配制与消毒1
器材与试剂:干粉型培养基、胰蛋白酶,青霉素、链霉素 . 纯净水系统、电子天平、 PH 计、磁力搅拌器。具体步骤:一 . 水的制备: 细胞培养用水必须非常纯净,不含有离子和其他的杂质。需要用新鲜的双蒸水、三蒸水或纯净水。二 .PBS 的制备与消毒 ( 也可用于其它 BSS ,如: Hanks , D-Hanks 液的配制 ) :1. 溶解定容:将药品( NaCl 8.0g , KCl 0.2g , Na2HPO4·H2O 1.56g , KH2PO40. 2g )倒入盛有双蒸水的烧杯中,玻璃棒搅动,充分溶解,然后把溶液倒入容量瓶中准确定容至 1000ml ,摇匀即成新配制的 PBS 溶液。 2. 移入溶液瓶内待消毒:将 PBS 倒入溶液瓶(大的吊针瓶)内,盖上胶帽,并插上针头放入高压锅内 8 磅 消毒 20 分钟。注意高压消毒后要用灭菌蒸馏水补充蒸发掉的水份。三 . 胰蛋白酶溶液的配制与消毒:&nbs......阅读全文
血清稀释液配制血清稀释液应该怎么配制
血清稀释液 配制血清稀释液应该怎么配制按作用的不同有不同的方法.一般血清稀释液都是现配现用的,用血凝板,梯度配制.在血凝板孔中分别加2ML生理盐水,住第一个孔加入2ML血液或血清,用滴管吹打匀;在第一孔中吸2ML混合液,加入第二孔中,吹打匀;在第二孔中吸2ML加入第三孔中……依此类做.
用10×-浓缩液配制培养基(用于密封的培养瓶)
实验方法原理配制全成分培养基时,准备好几个盛有无菌去离子蒸馏水的容器,一个容器的容量至少要够用1~3 周。加浓缩培养基和其他成分,调整pH , 直接使用或放回冰箱。用于密封的培养瓶,含空气、低浓度 HCO3— 、大气 CO2 浓度和低缓冲力。实验材料UPW培养基10×浓缩液谷氨酰胺牛血清抗生素青霉素
动物细胞培养——以干粉配制培养基储液并过滤灭菌
实验方法原理目的制备复杂溶液及热不稳定试荆和培养钱的灭曲训练目标过滤的技术和容址的正确选择。比较正压和负珠过滤,监督:指导培养幕的制备。在过滤的初始阶段连续监督,在过滤过程中间歇监份,在抽样质量控制时连续监督。时间:2h。背景信息以干粉配制培养地储液(见方案11.9).过滤灭菌(见11.5.2节.方
实用哺乳动物细胞培养手册(一)
细胞培养所用玻璃及塑料制品的清洗与消毒清洗在组织细胞培养中,体外细胞对任何有害物质都非常敏感。微生物产品附带杂物,上次细胞残留物及非营养成分的化学物质,均能影响培养细胞的生长。因此对新使用玻璃器 皿和重新使用的培养器皿都要严格彻底的清洗,且要根据器皿的组成材料不同,选择不同 的清洗方法。玻璃器皿的清
常见实验用溶液的配制方法
一.常用贮液与溶液1mol/L亚精胺(Spermidine): 溶解2.55g亚精胺于足量的水中,使终体积为10ml。分装成小份贮存于-20℃。1mol/L精胺(Spermine):溶解3.48g精胺于足量的水中,使终体积为10ml。分装成小份贮存于-20℃。10mol/L乙酸胺(ammonium
P1、P2、P3的配制P1-的配制方法
在 800ml 去离子水中溶入 Tris 碱 6.06g,Na2EDTA?2H2O 3.72g,用 HCl 调整 pH 至 8.0,用去离子水调整容积至1升,每升P1内加入RNaseA100mg。P2 的配制:在 950ml 去离子水中溶入 NaOH 8.0g,20%SDS 50ml,调整容积至 1
细胞培养基的配制的小窍门(三)
三、 仪器、材料和试剂仪器:滤泵一套、滤器一套、蒸馏器、高压灭菌锅、磁力搅拌器。材料:3000ml锥形瓶、250ml或500ml培养瓶、翻冒塞、饭盒、pH试纸、孔径0.22μm的微孔滤膜。试剂:盐酸、无离子水、小牛血清、合成培养基(RPMI1640)、青霉素、链霉素、NaHCO3。
细胞培养基的配制的小窍门(二)
二、 实验原理组 织培养使用的培养基一般是由合成培养基和小牛血清配制而成。合成培养基有商品出售,它是根据细胞生长的需要按一定配方制成的粉状物质。其主要成分是氨基 酸、维生素、碳水化合物、无机离子和其他辅助物质。它的酸碱度和渗透压与活体内细胞外液相似。小牛血清含有一定的营养成分,更重要的是它含
细胞培养基的配制的小窍门(四)
四、 实验步骤(一) 准备和安装滤器在超净工作台内打开包有清洗灭菌好的过滤器的牛皮纸,并架好。胶管一段接入滤泵再插入待除菌的液体中,出口端胶管伸入到已消毒的瓶子中。用滤泵做正压过滤,压力数字为2。过滤后检查滤膜是否完好无损。(二) 合成培养基的配制1、 取3000ml三蒸水,加入合成培养基干粉,用磁
细胞培养基的配制的小窍门(一)
一、 实验目的熟练掌握培养基(RPMI1640和DMEM)的配制,了解其他培养基配制方法。
细胞培养基的配制的小窍门(五)
五、 注意事项1、 培养细胞使用的瓶子和饭盒应与提取RNA和培养细菌的瓶子和饭盒严格分开。因为用于处理提取RNA的DEPC水(0.1%焦炭酸二乙酯)是一种致癌物,可能影响细胞生长;而培养过细菌的用品也不应与细胞混用。2、 过滤时压力不可过大,否则细菌易滤过达不到除菌效果,或使滤膜破裂。分装时需根据使
鞭毛染色液的配制方法
鞭毛染色液 A液:单宁酸 5g FeCl3 1.5g 蒸馏水 100ml 福尔马林(15%) 2.0ml NaOH(1%) 1.0ml 配好后,当日使用,次日效果差,第三日则不宜使用。 B液:AgNO3 2g 蒸馏水 100ml 待AgNO3溶解后,取出10ml备用,向其余的90
荚膜染色液的配制方法
荚膜染色液 1.黑色素水溶液 黑色素 5g 蒸馏水 100ml 福尔马林(40%甲醛) 0.5ml 将黑色素在蒸馏水中煮沸5分钟,然后加入福尔马林作防腐剂。 2.番红染液 与革兰氏染液中番红复染液相同。
常用缓冲液的配制
TEpH 7.410mmol/LTris?Cl (pH7.4)1mmol/L EDTA(pH8.0)pH 7.610mmol/LTris?Cl (pH7.6)1mmol/L EDTA(pH8.0)pH 8.010mmol/LTris?Cl (pH8.0)1mmol/L EDTA(pH8.0)STE(
烃铵盐滴定液的配制
①氮化二甲基苄基烃在溶解过程应逐步缓加,防止粉末漂浮,应加强搅拌,必要时放入超声波助溶,先浓配后稀释为好。②标定时氯化钾用基准或色谱纯,其结果即准确且终点明确。
物理显影液的配制
实验方法原理实验步骤1. 1% 明胶 60 ml。2. 柠檬酸缓冲液 10 ml,pH3.4(柠檬酸 2.55 g,柠槺酸钠 2.35 g,加水至 10 ml)。3. 对苯二酚 1~1.7 g,加水至 30 ml。4. 硝酸银 50~100 mg,加水至 2 ml。5. 用前 1~3 液混合过滤,最
碳酸缓冲液的配制
0.05mol/L pH9.6碳酸缓冲液 Na2CO3 1.59g NaHCO3 2.93g 加蒸馏水至1000ml。ELISA实验包被用。
PBS缓冲液的配制
配制方法:称取磷酸二氢钾(KH2PO4),磷酸氢二钠(Na2HPO4·12H2O),氯化钠(NaCl),氯化钾(KCl),吐温-20 ,加水。PBS:Phosphate Buffered SalinePBS 1L配方pH7.4:磷酸二氢钾(KH2PO4):0.27g,磷酸氢二钠(Na2HPO4):1
pbs缓冲液的配制
含0.05%吐温-20的pH7.4的磷酸盐缓冲液(简称为PBS-T)配制方法为:称取磷酸二氢钾(KH2PO4)0.2g,磷酸氢二钠(Na2HPO4·12H2O)2.9g,氯化钠(NaCl)8.0g,氯化钾(KCl)0.2g,吐温-20 0.5mL,加水至1000mL。PBS1L配方pH7.4:磷酸二
重铬酸钾滴定液的配制
①基准应先研细,在120℃干燥至恒重,放冷后立即称量配制。②最好是棕色瓶,浓配摇匀使溶后再加水至刻度。
高氯酸滴定液的配制
①是碱性基因的有机化合物。加入醋酐量应为理论量12~13倍,一般市售高氯酸含量普遍偏低,1000mL配制理论量85ml,实际工作中取用96-98ml,导致含水增大,所以应加入12倍左右的实际用量而保证含水量合格。②配制中先加醋酸将高氯酸稀释,以免反应剧烈,色泽变黄导致分解,滴加醋酐先振摇后滴加,速度
芽孢染色液的配制方法
芽孢染色液 1.孔雀绿染液 孔雀绿(malachite green) 5g 蒸馏水 100ml 2.番红水溶液 番红 0.5g 蒸馏水 100ml 3.苯酚品红溶液 碱性品红 11g 无水酒精 100ml 制法取上述溶液10ml与100ml5%的苯酚溶液混合,过滤备用。 4.
PBS缓冲液的配制
配制方法:称取磷酸二氢钾(KH2PO4),磷酸氢二钠(Na2HPO4·12H2O),氯化钠(NaCl),氯化钾(KCl),吐温-20 ,加水。PBS:Phosphate Buffered SalinePBS 1L配方pH7.4:磷酸二氢钾(KH2PO4):0.27g,磷酸氢二钠(Na2HPO4):1
PBS缓冲液的配制
配制方法:称取磷酸二氢钾(KH2PO4),磷酸氢二钠(Na2HPO4·12H2O),氯化钠(NaCl),氯化钾(KCl),吐温-20 ,加水。PBS:Phosphate Buffered SalinePBS 1L配方pH7.4:磷酸二氢钾(KH2PO4):0.27g,磷酸氢二钠(Na2HPO4):1
硫电解液的配制
取 0.5gKI,0.6gNaN3 溶于约500ml 去离子水中,加入 5ml 冰醋酸,再用去离子水稀释至 1000ml。配制电解液所用试剂均为优级纯,去离子水的阻值要求 2 兆欧以上,配好的电解液用棕色瓶在阴暗凉爽处放置,硫电解液不能长期保存,须在一周内用完。
高锰酸钾滴定液的配制
①煮沸过程要保持一段时间,促使其中还原性杂质反应完全。以免在以后贮存中引起浓度改变。过滤目的除去二氧化锰。②加新沸水目的除水中氧,以免标定过程中草酸钠被氧化使浓度偏高。③酸度调节用硫酸为好,总的浓度控制在0.5mol/L,酸度低反应太慢,酸度太高又容易使高锰酸分解。
DNA提取液的配制
一、实验目的 1 明确提取液的配制原理 2 通过对提取液的配制,掌握提取液中各 试剂 在提取中的作用。二、实验原理 DNA 是遗传物质, 植物DNA 的提取是植物基因工程的基础。通常要求所提取的DNA 要有理想的纯度,足够完整,无断裂降解,提取过程尽量少使用有毒化学品等。为
pbs缓冲液的配制
称取8.0g NaCl、0.2g KCl、1.44g Na2HPO4、0.24g KH2PO4溶于800mL蒸馏水中,用HCl调节溶液至7.4,最后加蒸馏水定容至1L即可得0.01M PBS缓冲液。配制PBS溶液的最简单方法是使用PBS片,后者是已制好的配方片剂,当需要使用PBS时只需将其溶解于一定
pbs缓冲液的配制
pbs缓冲液的配制是:含0.05%吐温-20的pH7.4的磷酸盐缓冲液(简称为PBS-T)配制方法为:称取磷酸二氢钾(KH2PO4)0.2g,磷酸氢二钠(Na2HPO4·12H2O)2.9g,氯化钠(NaCl)8.0g,氯化钾(KCl)0.2g,吐温-20 0.5mL,加水至1000mL。PBS1L
关于多聚赖氨酸的配制、保存、使用总结与问题1
因为自己做PC12细胞培养,想在接种前将培育皿用多聚赖氨酸包被,到论坛里搜索了下,关于多聚赖氨酸的帖子不少,看了一些帖子,将大部分收集在此。个人觉得关于多聚赖氨酸的配置、保存、使用各方面问题,这些帖子里面都解释了。注:我只是摘了一个帖子里某段或某句话。一般一段话来自某一位朋友。一、常用的多聚赖氨酸包