关于多聚赖氨酸的配制、保存、使用总结与问题1

因为自己做PC12细胞培养,想在接种前将培育皿用多聚赖氨酸包被,到论坛里搜索了下,关于多聚赖氨酸的帖子不少,看了一些帖子,将大部分收集在此。个人觉得关于多聚赖氨酸的配置、保存、使用各方面问题,这些帖子里面都解释了。注:我只是摘了一个帖子里某段或某句话。一般一段话来自某一位朋友。一、常用的多聚赖氨酸包被可以用三蒸水,或者PBS,浓度一般为用0.1 mg/ml进行包被。二、其他常用包被方法比较(以各种免疫分析为例):三、我配成1mg/ml的储存液,用Mini-Q(超纯水)配制,放在-20℃储存,使用时稀释10倍(也用超纯水),即终浓度100ug/ml,过滤后使用。工作液过滤使用,如一次用不完,放在4℃储存。多聚赖氨酸在水溶液中易分解,所以一次不要配太多工作液。四、我现在要配多聚赖氨酸,书上写的用 PBS配,但没写PH,浓度,向各位请教。答:PH应该在7.0~7.4,PBS:取氯化钠7.650 g,无水磷酸 氢二钠0.724 g,磷酸......阅读全文

多聚赖氨酸的简介

  多聚赖氨酸是一种有机物,化学式为(C6H12N2O2)n.xHBr,天然防腐剂中具有优良防腐性能的微生物类食品防腐剂。  它是由25~30赖氨酸残基聚合而成,具有强烈的抑菌能力,可以作为防腐剂用于食品的保鲜,ε-多聚赖氨酸抑菌谱广,在酸性和微酸性环境中对革兰氏阳性菌、革兰氏阴性菌、酵母菌、霉菌均

多聚赖氨酸的物质概况

  2003年HirakiJ等使用了ADME(最近几年,美国热电集团研制的新药毒性检测设备,集吸收、分布、代谢和排泄、毒性为一体)研究方法证实ε-多聚赖氨酸作为食品防腐剂的安全性。他们在老鼠体内对ε-多聚赖氨酸进行了一系列药物动力学和代谢途径的研究,以了解在老鼠的食物中添加高达50000mg/kgε

多聚赖氨酸溶液的使用

多聚赖氨酸溶液多聚赖氨酸溶液是广泛应用的组织切片与玻片黏合剂,该多聚阳离子分子与组织切片上的阴离子相互作用会产生较强的黏合力。适用组织学,免疫组织化学,冰冻切片,细胞涂片,原位杂交等使用的玻片的防脱片处理,以防实验操作过程中组织掉片。也可用于细胞培养,增加细胞贴壁能力。[使用说明]免疫学操作步骤(可

多聚赖氨酸溶液的使用

多聚赖氨酸溶液(Poly-L-Lysine Solution)  Cat.No.: SGP8920       Size: 10mlConc.: 0.1% w/v, in water Storage: 18-26℃    Thimerosal, 0.01%, added as preservativ

多聚赖氨酸的产品特点介绍

  1)抑菌谱广  ε-PL对革兰氏阳性菌、革兰氏阴性菌、酵母菌、霉菌均有很好的抑菌效果,并且对一些耐热性芽孢杆菌和病毒也有一定抑制作用。  2)安全性能高  当人体食用后,可降解为L-赖氨酸这一人体必需氨基酸,进一步用于蛋白质合成或继续代谢,无任何毒性,并于2003年通过了美国食品和医药管理(FD

多聚赖氨酸的应用范围介绍

  ε-多聚赖氨酸添加于食品中仅需微量就能奏效,且不会影响食品口味感,可做食品的天然保存剂。它天然安全,符合消费者的健康需求。在日本已经得到广泛应用。ε-多聚赖氨酸应用于糕点、面包食品中,能有效的抑制耐热性芽孢杆菌的增殖,延长保存期;应用于低糖低热量食品,如乳蛋白冰淇淋、奶油制品等,可改善其保存性;

关于多聚赖氨酸的配制、保存、使用总结与问题2

八、使用说明操作步骤(可直接在玻片上涂布)1.灭菌的ddH2O 1:10稀释该多聚赖氨酸溶液。2.用之前将稀释的多聚赖氨酸溶液放在室内,使其温度到室温18-26℃3.将玻片浸在稀释的多聚赖氨酸溶液5分钟。注意增加时间不会提高包被效果。4.在60℃烘箱1小时干燥,或室温18-26℃过夜干燥待用。九、注

关于多聚赖氨酸的配制、保存、使用总结与问题1

因为自己做PC12细胞培养,想在接种前将培育皿用多聚赖氨酸包被,到论坛里搜索了下,关于多聚赖氨酸的帖子不少,看了一些帖子,将大部分收集在此。个人觉得关于多聚赖氨酸的配置、保存、使用各方面问题,这些帖子里面都解释了。注:我只是摘了一个帖子里某段或某句话。一般一段话来自某一位朋友。一、常用的多聚赖氨酸包

关于多聚赖氨酸的配制、保存、使用总结与问题3

十六、各位老师,有几个关于多聚赖氨酸包被培养板的问题请教1、pll到底溶于硼酸缓冲液还是溶于三蒸水或双蒸水2、使用前是用灭菌的去离子水稀释吗,可不可以用双蒸水或别的答:多聚赖氨酸溶于硼酸缓冲液或者无菌培养用水;多聚赖氨酸包被培养板使用前是用灭菌的去离子水稀释,最好不要用双蒸水或别的,因为多聚赖氨酸包

神经细胞培养前怎样用多聚赖氨酸包被6孔板

神经细胞培养前怎样用多聚赖氨酸包被6孔板。第一天:1. 在培养板中将已爬好细胞的玻片用PBS浸洗3次,每次3min;2. 用4%的多聚甲醛固定爬片15min, PBS浸洗玻片3次,每次3min;3. 0.5%Triton X-100( PBS配制 )室温通透20min(细胞膜上表达的抗原省略此步骤)

小脑颗粒细胞的培养

实验方法原理将 4~8 只新生鼠的小脑切成小立方块,放入 HBSS,在 37°C 条件下用胰蛋白酶消化 15 min。将细胞接种于涂有 L-多聚赖氨酸的培养皿或培养瓶。实验材料DMEM                                                        

小脑颗粒细胞的培养

实验方法原理将 4~8 只新生鼠的小脑切成小立方块,放入 HBSS,在 37°C 条件下用胰蛋白酶消化 15 min。将细胞接种于涂有 L-多聚赖氨酸的培养皿或培养瓶。实验材料DMEMHBSSL-多聚赖氨酸阿糖胞苷0.025% 胰蛋白酶硅酮仪器、耗材P e tr i培养皿解剖刀解剖剪解剖镊Paste

免疫组化的经验总结(1)-常见问题

免疫组织化学的概念: 免疫组化是利用抗原与抗体特异性结合的原理,通过化学反应使标记抗体的显色剂 (荧光素、酶、金属离子、同位素) 显色来确定组织细胞内抗原(多肽和蛋白质),对其进行定位、定性及定量的研究,称为免疫组织化学。免疫组化实验中常用的抗体为单克隆抗体和多克隆抗体。免疫组化实验所用的组织和细胞

细胞培养板的选择和使用问答1

培养板的包被及相关问题:为了适应不同的实验需要,可对培养板用不同的物质进行包被后使用,这其中有促进细胞黏附的,也有用于一些特殊检测需要的。不同的实验目的可能具体的方案亦不同,根据需要灵活掌握。(一)多聚赖氨酸包被:问:我要培养原代神经细胞培养,要用多聚赖氨酸铺细胞培养板,请问赖氨酸液怎么配,怎样铺扳

免疫组化实验防脱片的处理方法

脱片是免疫组织化学中经常遇到的问题(尤其是脑组织冰冻切片),一般来说脱片主要有以下几种原因:1. 组织固定、脱水、透明不充分2.组织切片过厚3.组织切片有折叠4.过度的热抗原修复(高压、微波、水煮)处理或抗原修复液的pH偏高5.操作过程中,冲洗方法不正确等在实际操作的过程中,除了要注意以上几点之外,

星形胶质细胞(astrocyte)原代培养

星形胶质细胞来源于2天的大鼠。断头后的大鼠大脑收集在含有11mM 碳酸氢钠,71mM葡萄糖和1%抗菌素的DMEM溶液中。移除脑膜,血管和白质。大脑皮层用机械分裂法进行匀浆,然后将细胞悬液经230μm,104μm 和73.3μm孔的铁丝网依次过滤。然后用700g 速度10分钟离心收集细胞,

海马神经元细胞的分离及培养

实验概要从海马体中分离到神经元细胞,然后进行培养细胞以便进行其他的实验研究。主要试剂解剖液MEMHBSS主要设备L-多聚赖氨酸包被的平皿或盖玻片实验材料出生24h内的乳鼠实验步骤1. 用冷却的解剖液(0℃,最高2-3℃)冲洗海马两次。2. 在冷却解剖液(2-3℃)中解剖无脑膜的海马。3. 加入胰蛋白

主要组织相容性复合体(MHC)对免疫应答的遗传控制(一)

   人们早已观察到各种不同品系动物的免疫应答是由遗传控制的,如豚鼠对白喉毒素结核菌素的易感性在不同品系间有很大差异人类变态反应性疾病的发生与遗传因素有关。但对这一问题的深入研究主要归功于60年代后免疫化学研究中合成多肽抗原的应用,对H-2的深入了解以及同类系和H-2内重组株小鼠的建立。  (一)M

预包被载玻片的处理实验

由多聚赖氨酸包被(Thermo公司产品),具有持久的生物粘附性,可附冰冻和石蜡包埋的切片,可随后离心并进行细胞学印迹试验的载玻片。试剂、试剂盒多聚-L-赖氨酸明胶仪器、耗材载玻片玻璃染色盘实验步骤一、多聚赖氨酸包械的栽玻片 1.  如明胶浸泡处理载玻片的方法一样,清洗载玻片(用玻片架和玻璃染色盘)。

抚生试剂免疫组织化学组织细胞的组织切片

一、载玻片的处理    免疫组化染色时间长,特别是双PAP、免疫金银染色等方法,所需时间更长,并要反复洗涤,切片在试剂中长时间浸泡,经多次洗涤,极易造成脱片而影响实验的结果。需采用以下方法处理:载玻片先置于洗洁液(或洗衣粉溶液)中煮沸30min,清水洗干净后放人清洁液中浸泡12—24h,漂洗,用蒸馏

细胞爬片如何制作

细胞爬片就是在圆形玻璃盖玻片上铺展细胞,把盖玻片用无水乙醇脱脂,放置到12或24孔板里(按照盖玻片大小决定),紫外杀菌,多聚赖氨酸处理(帮助细胞贴壁),PBS清洗,然后正常传细胞就可以了。

表达蛋白的生物学活性的检测

一、MTT比色法检测细胞活性(一)原理    活细胞内线粒体琥珀酸脱氢酶能催化无色的MTT形成蓝色的甲肷,其形成的量与活细胞数和功能状态呈正相关。对细胞活力有影响的表达蛋白活性检测可以通过MTT比色法进行。(二)试剂准备1、   青链霉素溶液(100X):青霉素100万U,链霉素100万U,溶于10

表达蛋白的生物学活性的检测

一、MTT比色法检测细胞活性(一)原理活细胞内线粒体琥珀酸脱氢酶能催化无色的MTT形成蓝色的甲肷,其形成的量与活细胞数和功能状态呈正相关。对细胞活力有影响的表达蛋白活性检测可以通过MTT比色法进行。(二)试剂准备1、青链霉素溶液(100X):青霉素100万U,链霉素100万U,溶于100mlddH2

表达蛋白的生物学活性的检测

一、MTT比色法检测细胞活性(一)原理活细胞内线粒体琥珀酸脱氢酶能催化无色的MTT形成蓝色的甲肷,其形成的量与活细胞数和功能状态呈正相关。对细胞活力有影响的表达蛋白活性检测可以通过MTT比色法进行。(二)试剂准备1、青链霉素溶液(100X):青霉素100万U,链霉素100万U,溶于100mlddH2

蛋白芯片技术的常用载体介绍

常用的材质有玻片、硅、云母及各种膜片等。理想的载体表面是渗透滤膜(如硝酸纤维素膜)或包被了不同试剂(如多聚赖氨酸)的载玻片。外形可制成各种不同的形状。Lin,SR等人引采用APTS-BS3技术增强芯片与蛋白质的结合。

蛋白质芯片技术固体芯片的构建方法

常用的材质有玻片、硅、云母及各种膜片等。理想的载体表面是渗透滤膜(如硝酸纤维素膜)或包被了不同试剂(如多聚赖氨酸)的载玻片。外形可制成各种不同的形状。Lin,SR等人引采用APTS-BS3技术增强芯片与蛋白质的结合。

LSCM样品制备中相关实验方法

样品制备中相关实验方法 用于免疫荧光抗体标记组织切片的载玻片需经过明胶、蛋白胶、多聚赖氨酸 ( Poly-L-Lysine)、硅烷(3-氨丙基三乙氧基硅烷,APES) 等处理,以粘贴组织切片,防止组织切片在免疫反应过程中脱落。简易明胶处理方法是将干净的载玻片浸于 0.1% 明胶热溶液中一分钟,取出沥

石蜡切片在染色过程中出现脱片现象如何处理?

1)烤片时间不够,或温度不够,可以延长烤片时间和提高烤片温度;2)用含有多聚赖氨酸的玻片,可以购买到或这自己做;3)有些组织本身就容易掉片,如骨组织等,操作时冲PBS不要直接冲到组织上,冲到组织上方,让它流下冲洗组织;4)用高温修复时,温度骤冷也可能引起。

关于青霉素过敏的检查方式介绍

  使用各种青霉素前应询问患者是否使用过青霉素,有无青霉素过敏史,使用前都应先做过敏试验,试验结果阴性方可用药。皮试结果可能会存在假阳性、假阴性。  目前我国使用的皮试液直接由青霉素配制。国外有降解产物皮试液(青霉噻唑多聚赖氨酸,PPL)。  目前国内还没有检测青霉素过敏的体外试验标准试剂。

青霉素的检测方法

使用各种青霉素前应询问患者是否使用过青霉素,有无青霉素过敏史,使用前都应先做过敏试验,试验结果阴性方可用药。皮试结果可能会存在假阳性、假阴性。目前我国使用的皮试液直接由青霉素配制。国外有降解产物皮试液(青霉噻唑多聚赖氨酸,PPL)。目前国内还没有检测青霉素过敏的体外试验标准试剂。