细胞培养用液的配制与消毒3
九 . 肝素溶液的配制: 含有肝素的培养液可以使内皮细胞纯度提高,肝素加入全培养液中最终浓度为 50ug/ml 。因为现在市售的多为肝素钠,包装为约为 0.56 克 / 瓶,配制时,可将其溶于 100ml 三蒸水中,定容,过夜,然后过滤除菌,分装小瓶,保存温度为 ℃ 。使用时,向 100ml 培养液中加入 1ml (精确可加入 0.9ml )即可。十 . Ⅰ 型胶原酶: 0.1 % Ⅰ 型胶原酶溶液同胰蛋白酶一样配制和消毒灭菌。注意:因为 Ⅰ 型胶原酶分子颗粒比胰酶大,不容易过滤,因此可以用蔡式滤器过滤除菌。分装入 10ml 小瓶 -20℃ 保存。十一 . 明胶溶液: 因为明胶难于过滤,所以配制 0.1 %明胶溶液必须用无菌的 PBS 配制。所以制备过程中必须要注意无菌操作。首要的问题是如何无菌准确称量 0.1 克 (配成 100ml 溶液) — 即解决无菌分装药品的问题。其次要注意即使是 01. ......阅读全文
常用缓冲液配制
Buffer Formula (required precision; 2 %)Always to try to prepare buffer solution at the temperature and concentration before planing to use during the
细胞裂解液怎么配制
裂解细胞的话:新鲜配制冷的 RIPA 裂解缓冲液:先配150 mM NaCL+ 1% NP-40 (去垢剂) + 0.1% SDS (去垢剂)+2ug/ml Aprotinin (蛋白酶抑制剂) (使用前加入)+2ug/ml Leupeptin (蛋白酶抑制剂) (使用前加入)或1 mM PMSF
PH计标准液配制
pH4.01标准缓冲液配制:称取在110℃~130℃下干燥2小时的邻苯二甲酸氢钾10.12g,溶于去离子水,25℃恒温下在1000mL容量瓶中定容至刻度线。pH9.18标准缓冲液配制:称取与饱和溴化钠共同放置在干燥器中平衡两昼夜的硼砂3.80g,溶于去离子水,25℃恒温下在1000mL容量瓶中定容至
常用缓冲液配制
实验概要常用缓冲液配制实验步骤一.电泳缓冲液 A: 测序凝胶加样缓冲液: 98%去离子甲酰 10mol/L EDTA(pH8.0) 0.025%二甲苯青FF 0.025%溴酚蓝 B: 甲酰胺:许多批号的试剂级甲酰胺,其纯度符合使用要求,
配制pH计保护液
配制pH计保护液——3mol/L的KCl溶液: 1.计算称量:用分析天平称量KCl 223.5g(KCl摩尔质量74.5g/mol,则KCl质量=3mol×74.5g/mol=223.5g)。 2.溶解:在烧杯中用100ml蒸馏水使之完全溶解,并用玻璃棒搅拌,把溶解好的溶液移入
实用哺乳动物细胞培养手册(下)
细胞培养所用玻璃及塑料制品的清洗与消毒 清洗 在组织细胞培养中,体外细胞对任何有害物质都非常敏感。微生物产品附带杂物,上次细胞残留物及非营养成分的化学物质,均能影响培养细胞的生长。因此对新使用玻璃器 皿和重新使用的培养器皿都要严格彻底的清洗,且要根据器皿的组成材料不同,选择不同 的清
移液器的消毒与灭菌
消毒与灭菌消毒只要求使移液器上的活菌控制在一定范围内,达到无害化水平,而灭菌则要求消灭所有活菌。因此,灭菌的处理要求高于消毒:1.化学消毒简单说来,就是用酒精等擦拭移液器外表面,然后晾干即可。这对于所有移液器品牌而言都应该是可以做到的,否则其外壳材质较差!2.紫外线消毒用紫外线照射移液器的表面,通过
动物细胞与胚胎工程实验常用培养液配制与检测
实验方法原理 动物细胞工程的主要操作对象是离体条件下动物有机体的各部分组织、器官或细胞,这些用来进行离体培养的组织或器官称为外植体;动物胚胎工程的主要操作对象是配子和胚胎。要满足操作对象在离体条件下正常生存和生长发育,就必须为其提供适宜生长发育的良好营养条件,即培养液条件。动物的组织、细胞或配子、胚
常用缓冲溶液的配制方法3
9.巴比妥钠-盐酸缓冲液(18℃) pH 0.04M巴比妥钠溶液
实验室洗瓶机洗涤液的配制与使用
(1)洗涤液的配制洗涤液分浓溶液与稀溶液两种,配方如下:浓溶液 重铬酸钠或重铬酸钾(工业用) 50g,自来水 150ml,浓硫酸(工业用) 800ml稀溶液 重铬酸钠或重铬酸钾(工业用) 50g,自来水 850ml,浓硫酸(工业用) 100ml配法都是将重铬酸钠或重铬酸钾先溶解于自来水中,可慢慢加温
沉淀滴定法滴定液的配制与标定注意事项
1.用 铬酸钾 指示剂法,必须在近中性或弱碱性溶液(pH6.5~10.5)中进行滴定。因 铬酸钾是弱酸盐,在酸性溶液中,CrO42-与H+结合,降低CrO42-浓度,在 等当点时不能立即生成 铬酸银沉淀;此法也不能在碱性溶液中进行,因银离子 氢氧根离子生成 氧化银沉淀。 2.应防止氨的存在,氨
实用哺乳动物细胞培养手册(下)
细胞培养所用玻璃及塑料制品的清洗与消毒清洗在组织细胞培养中,体外细胞对任何有害物质都非常敏感。微生物产品附带杂物,上次细胞残留物及非营养成分的化学物质,均能影响培养细胞的生长。因此对新使用玻璃器 皿和重新使用的培养器皿都要严格彻底的清洗,且要根据器皿的组成材料不同,选择不同 的清洗方法。玻璃器皿的清
细胞培养技术
实验概要细胞培养是指从体内组织取出细胞摹拟体内出现环境,在无菌、适当温度及酸碱度和一定营养条件下,使期生长繁殖,并维持其结构和功能的一种培养技术。细胞培养的培养物为单个细胞或细胞群。主要设备细胞培养设施和基本条件 1、实验室设计 细胞培养是一种无菌操作技术,要求工作环境和条件必须保证无微生物污染
常见实验用溶液的配制方法(一)
一.常用贮液与溶液 1mol/L亚精胺(Spermidine): 溶解2.55g亚精胺于足量的水中,使终体积为10ml。分装成小份贮存于-20℃。 1mol/L精胺(Spermine):溶解3.48g精胺于足量的水中,使终体积为10ml。分装成小份贮存于-20℃。 10m
常见实验用溶液的配制方法(二)
Tris缓冲液(Tris-HCl buffer) 将121g的Tris碱溶解于约0.9L水中,再根据所要求的pH(25℃下)加一定量的浓盐酸(11.6N),用水调整终体积至1L。 浓盐酸的体积(ml)
细胞培养大攻略3
70、 血清解冻后发现有絮状沉淀物出现,该如何处理?血清中沉淀物的出现有许多种原因,但最普遍的原因是由于血清中脂蛋白的变性所造成,而血纤维蛋白(形成凝血的蛋白之一)在血清解冻后,也会存在于血清中,亦是造成沉淀物的原因之一。但这些絮状沉淀物,并不影响血清本身的质量。 若欲去除这些絮状沉淀物,可以将血清
细胞培养中预防污染的方法
春暖花开,万物复苏,当我们沉浸在这美好的春意之中,怡然自得时,实验室的细胞培养小能手或许得注意了,那些危害细胞的细菌、真菌、支原体也活跃起来了。在细胞培养的过程中,我们该如何去预防控制呢?小编总结了一些,希望对实验室的伙伴们有帮助!预防为主是细胞培养过程中必要的思路!三月四月不预防,五月六月徒伤悲!
合成培养基配制实验——合成培养液的配制
合成培养基是根据研究和了解细胞所需成分基础上配制而成的。目的在于创制出与体内相似的生存环境。合成培养基有固定的组成成分,利于控制实验条件标准化。内容来源:组织培养和分子细胞学技术。(北京出版社)实验方法原理干粉型培养基是用球磨机或喷雾法将各种培养液成分混合后制成,具有性质稳定、便于贮存和运输、使用方
硫酸铈铵滴定液的配制
①配制先将溶液溶解完全后加硫酸防水解。②因属于强氧化剂,用三氧化二砷标定,加氯化碘作催化剂,指示剂邻二氮菲中因含有少量铁也消耗滴定液使结果不准确,应注意加量,近终点加热是为了加速反应。
硝酸银滴定液的配制
①宜避光配制,注意保护不要使皮肤或衣服上被污染,因为除掉较难。②标定系吸附指示剂,所以应保护生成氯化银呈胶体状肪,应在氯化钠溶解后再加糊精。③宜在中性或弱碱性中进行,加碳酸钙以利于形成荧光黄阴离子指示终点。④滴定中也应避光,特别是强光照射。
电泳缓冲液的配制
Tris-乙酸(TAE):50×浓贮存液(每升):242g Tris 碱5 7.1ml 冰乙酸100ml 0.5mmol/L EDTA(pH8.0)使用时再稀释50倍。
Bouin氏固定液的配制方法
Bouin氏固定液 苦味酸饱和水溶液 75ml 福尔马林(40%甲醛) 25ml 冰醋酸 5ml 1g苦味酸可制成75ml饱和水溶液。 先将苦味酸溶解成水溶液,然后再加入福尔马林和冰醋酸摇匀即成。
硫酸亚铁滴定液的配制
①硫酸亚铁在空气中风化、氧化现象,配制应注意量的取用。②本溶水溶液不稳定,但在酸性条件下稳定,所以加硫酸:水40:20混合液保持稳定。
PH电极浸泡液的配制方法
一、短期保存:PH电极浸泡液配制方法:PH4.00缓冲剂一包,溶于250ML纯水中,再加56g分析纯KCL,适当加热,搅拌至完全溶解即成。二、长期保存:PH电极长期不使用时,要将PH电极浸泡在特殊配制的保护液中保存,并定期更换新的保护液,zui长不能超过6个月(配制方法: PH4.00缓冲剂一包,溶
pbs缓冲液的配制方法
含0.05%吐温-20的pH7.4的磷酸盐缓冲液(简称为PBS-T)配制方法为:称取磷酸二氢钾(KH2PO4),磷酸氢二钠(Na2HPO4·12H2O),氯化钠(NaCl),氯化钾(KCl),吐温-20 ,加水。PBS:Phosphate Buffered SalinePBS 1L配方pH7.4:磷
革兰氏(Gram)染色液的配制方法
革兰氏(Gram)染色液 1.草酸铵结晶紫染液 A液:结晶紫(crystal violet) 2g 95%酒精 20ml B液:草酸铵(ammonium oxalate) 0.8g 蒸馏水 80ml 混合A、B二液,静置48小时后使用。 2.卢戈氏(Lugol)碘液 碘片 1.0g
pbs缓冲液的配制配方
pbs缓冲液的配制配方是10X的PBS母液,然后再对其母液进行1:10稀释即可获得PBS缓冲液。PBS是磷酸盐缓冲液(PhosphateBuffer Saline),是生物学实验室最常用的缓冲液之一。其主要成分包括:氯化钠(NaCl)、氯化钾(KCl)、磷酸氢二钠(Na2HPO4)和磷酸二氢钾(KH
检验淀粉的碘液配制方法
原碘液、稀碘液、纯化水 原碘液:称取分析纯结晶碘11g,分析纯碘化钾22g,先用少量纯化水使碘完全溶解后,再加纯化水定容至500mL贮于棕色瓶内. 稀碘液:取原碘液2mL,加碘化钾20g,加纯化水溶解定容至500mL,贮于棕色瓶内. 纯化水即蒸馏水之类的纯水
常用染色液和试剂的配制
一、埃利希(Ehrlich)氏苏木精染液 先将苏木精2g溶于100mL乙醇中,再加冰醋酸10mL,混合后加蒸馏水100mL和100mL甘油,然后加硫酸铝钾(约10g)至饱和,搅拌均匀,倒入瓶中。将瓶口用1层纱布包着小块棉花塞上,放在暗处通风的地方,并经常摇动促进“成熟”,直到液体颜色变为深红色为止。
pbs缓冲液的配制方法
含0.05%吐温-20的pH7.4的磷酸盐缓冲液(简称为PBS-T)配制方法为:称取磷酸二氢钾(KH2PO4),磷酸氢二钠(Na2HPO4·12H2O),氯化钠(NaCl),氯化钾(KCl),吐温-20 ,加水。PBS:Phosphate Buffered SalinePBS 1L配方pH7.4:磷