实用哺乳动物细胞培养手册(下)

细胞培养所用玻璃及塑料制品的清洗与消毒 清洗 在组织细胞培养中,体外细胞对任何有害物质都非常敏感。微生物产品附带杂物,上次细胞残留物及非营养成分的化学物质,均能影响培养细胞的生长。因此对新使用玻璃器 皿和重新使用的培养器皿都要严格彻底的清洗,且要根据器皿的组成材料不同,选择不同 的清洗方法。 玻璃器皿的清洗 组织细胞培养中,使用量最大的是玻璃器皿,故工作最最大的是玻璃器皿的清洗。一般玻璃器皿的清洗包括浸泡、刷洗、浸酸和冲洗四个步骤。清洗后的玻璃器皿不仅要求干净透明无油迹,而且不能残留任何物质。 (1)浸泡:初次使用和培养使用后的玻璃器皿均需先用清水浸泡,以使附着物软化或被 溶液掉。新的初次使用的玻璃器皿,在生产及运输过程中,玻璃表面带有大量的干固的灰尘,且玻璃表面常呈碱性及带有一些对细胞有害的物质等。新瓶使用前应先用自来水简单刷洗,然后用稀盐酸液浸泡过夜,以中和其中的碱性物质。再次使用的玻璃器皿......阅读全文

实用哺乳动物细胞培养手册(下)

  细胞培养所用玻璃及塑料制品的清洗与消毒   清洗   在组织细胞培养中,体外细胞对任何有害物质都非常敏感。微生物产品附带杂物,上次细胞残留物及非营养成分的化学物质,均能影响培养细胞的生长。因此对新使用玻璃器 皿和重新使用的培养器皿都要严格彻底的清洗,且要根据器皿的组成材料不同,选择不同 的清

实用哺乳动物细胞培养手册(下)

细胞培养所用玻璃及塑料制品的清洗与消毒清洗在组织细胞培养中,体外细胞对任何有害物质都非常敏感。微生物产品附带杂物,上次细胞残留物及非营养成分的化学物质,均能影响培养细胞的生长。因此对新使用玻璃器 皿和重新使用的培养器皿都要严格彻底的清洗,且要根据器皿的组成材料不同,选择不同 的清洗方法。玻璃器皿的清

实用哺乳动物细胞培养手册(五)

细胞培养基本概念细胞培养是指从体内组织取出细胞在体外模拟体内环境下,使其生长繁殖,并维持其结 构和功能的一种培养技术。细胞培养的培养物可以是单个细胞,也可以是细胞群。细胞培养目的与用途1、科学研究:药物研究开发与基础研究 药物研究与开发(1) 新药筛选:如化学合成药物药效研究、中药有效成分筛选与鉴定

实用哺乳动物细胞培养手册(中)

  细胞培养环境   1、实验室设计 细胞培养是一种无菌操作技术,要求工作环境和条件必须保证无微生物污染和不受 其它有害因素的影响。细胞培养室和设计原则是防止微生物污染和有害因素影响, 要求工作环境清洁、空气清新,干燥和无烟尘。细胞培养室的设计原则一般是无菌 操作区设在室内较少走动的内侧,常规操作

实用哺乳动物细胞培养手册(四)

细胞培养无菌操作基本技术无菌操作技术分为三个部分:工作环境及表面的处理,细胞培养所用玻璃及塑料制品的处理及培养液与培养细胞的处理。工作环境的处理 使用层流超净工作台是最经济有效的手段。超净工作台正常工作时,向下的气流可阻挡外界空气污染物进入超净台。(1)实验前,无菌室及无菌操作台用紫外灯照射 30-

实用哺乳动物细胞培养手册(三)

细胞培养环境1、实验室设计 细胞培养是一种无菌操作技术,要求工作环境和条件必须保证无微生物污染和不受 其它有害因素的影响。细胞培养室和设计原则是防止微生物污染和有害因素影响, 要求工作环境清洁、空气清新,干燥和无烟尘。细胞培养室的设计原则一般是无菌 操作区设在室内较少走动的内侧,常规操作

实用哺乳动物细胞培养手册(上)

细胞培养基本概念细胞培养是指从体内组织取出细胞在体外模拟体内环境下,使其生长繁殖,并维持其结 构和功能的一种培养技术。细胞培养的培养物可以是单个细胞,也可以是细胞群。细胞培养目的与用途1、科学研究:药物研究开发与基础研究 药物研究与开发(1) 新药筛选:如化学合成药物药效研究、中药有效成分筛选与鉴定

实用哺乳动物细胞培养手册(一)

细胞培养所用玻璃及塑料制品的清洗与消毒清洗在组织细胞培养中,体外细胞对任何有害物质都非常敏感。微生物产品附带杂物,上次细胞残留物及非营养成分的化学物质,均能影响培养细胞的生长。因此对新使用玻璃器 皿和重新使用的培养器皿都要严格彻底的清洗,且要根据器皿的组成材料不同,选择不同 的清洗方法。玻璃器皿的清

实用哺乳动物细胞培养手册(六)

缓冲系统大多数细胞所需 pH 在 7.2 - 7.4。但是,细胞培养最适 pH 值随培养的细胞种类不同而 不同。成纤维细胞喜欢较高 pH (7.4 - 7.7), 而传代转化细胞系则需要偏酸 pH (7.0 - 7.4)。 由于多数培养液靠碳酸氢钠(NaHCO3)与 CO2 体系进行缓冲,因

实用哺乳动物细胞培养手册(中)

细胞培养环境1、实验室设计 细胞培养是一种无菌操作技术,要求工作环境和条件必须保证无微生物污染和不受 其它有害因素的影响。细胞培养室和设计原则是防止微生物污染和有害因素影响, 要求工作环境清洁、空气清新,干燥和无烟尘。细胞培养室的设计原则一般是无菌 操作区设在室内较少走动的内侧,常规操作和封闭培养于

实用哺乳动物细胞培养手册(中)

细胞培养环境1、实验室设计 细胞培养是一种无菌操作技术,要求工作环境和条件必须保证无微生物污染和不受 其它有害因素的影响。细胞培养室和设计原则是防止微生物污染和有害因素影响, 要求工作环境清洁、空气清新,干燥和无烟尘。细胞培养室的设计原则一般是无菌 操作区设在室内较少走动的内侧,常规

实用哺乳动物细胞培养手册(二)

消化液:分离组织和分散细胞。常用的有胰蛋白酶和二乙胺四乙酸二钠 (EDTA) 两种溶液。可以 单独使用,也可以混合使用。(1)胰蛋白酶溶液胰蛋白酶(简称胰酶)是一种黄白色粉末,易潮解,应放置冷暗干燥处保存。目前应用的胰蛋白酶主要来自牛或猪的胰腺。胰酶的主要作用是使细胞间的蛋白质水解,使细胞相

超实用原代细胞培养小知识

很多老师在设计科研实验的时候都会很迷茫,到底用什么细胞好? 越来越多的老师开始倾向于原代细胞的科研实验,在设计实验中,原代细胞和细胞株到底该怎么选择呢?原代细胞的定义:原代细胞的培养是指直接从机体取下细胞、组织和器官后立即进行培养。因此,较为严格地说是指成功传代之前的培养,此时的细胞保持原有细胞的基

哺乳动物细胞的细胞培养

  实验室设计  细胞培养是一种无菌操作技术,要求工作环境和条件必须保证无微生物污染和不受其它有害因素的影响。细胞培养室和设计原则是防止微生物污染和有害因素影响,要求工作环境清洁、空气清新,干燥和无烟尘。细胞培养室的设计原则一般是无菌操作区设在室内较少走动的内侧,常规操作和封闭培养于一室,而洗刷消毒

哺乳动物细胞的细胞培养温度

  维持培养细胞旺盛生长,必须有恒定而适宜的温度;不同种类的细胞对培养温度要求也不同。人体细胞培养的标准温度为36.5℃±0.5℃,偏离这一温度范围,细胞的正常代谢会受到影响,甚至死亡。培养细胞对低温的耐受力较对高温强,温度上升不超过39℃时,细胞代谢与温度成正比;人体细胞在39-40℃1小时,即能

哺乳动物细胞培养过程--培养条件

哺乳动物细胞培养过程 & 培养条件导语:哺乳动物细胞在培养过程中会经过组织提取,原代培养,传代培养等过程。传代培养会根据具体情况分为细胞株培养和细胞系培养。哺乳动物细胞培养过程哺乳动物细胞在培养过程中会经过组织提取,原代培养,传代培养等过程。传代培养会根据具体情况分为细胞株培养和细胞系培养。如下对各

哺乳动物细胞培养过程--培养条件

哺乳动物细胞培养过程哺乳动物细胞在培养过程中会经过组织提取,原代培养,传代培养等过程。传代培养会根据具体情况分为细胞株培养和细胞系培养。如下对各个过程进行简述:原代培养:从动物机体取出组织后切碎,经过各种酶(常用胰蛋白酶),螯合剂(常用EDTA)结合机械方法(吸液管反复吸吹)处理,分散成单细胞,置于

实用!手机“咔嚓”一下知食物热量

  减肥的时候总靠自己的意识力去抗衡美食的诱惑?让智能神器来帮你吧!  据悉,日前,谷歌推出一款能够根据食物照片计算食物的卡路里的手机App。当你要吃某种食物的时候,可以先拍一张照片用该App识别一下,就能知道你要吃的这一餐热量有多高了。而“智能餐盘”SmartPlate则可以直接检测食物的热量和营

关于征集《环境监测仪器实用手册》内容的通知

  各相关单位:  中国仪器仪表学会正在编撰系列丛书《环境监测仪器实用手册》。该书是一部由我国仪器仪表界和环境监测界的专家们联袂编撰的大型工具书,由我国著名科学家、两院院士王大珩题名、作序,多位院士题词。该书将比较系统和全面地介绍国内外用于环境监测的各种仪器设备的工作原理、结构特征、性能指

科技部发布《南方地区雨雪冰冻灾后重建实用技术手册》

为充分发挥科学技术在抗灾救灾与灾后重建中的支撑作用,减少冰雪灾害对我国南方地区造成的影响与损失,推动灾区科学有效地进行恢复生产与重建,中国科技部1月9日发布了《南方地区雨雪冰冻灾后重建实用技术手册》。 据介绍,科技部会同国土资源部、交通部、农业部、水利部、教育部、林业局、气象局、中国科学院等有关部门

成都山地所7项技术入选《地震灾后应急实用技术手册》

  四川省芦山“4·20”7.0级强烈地震发生后,科技部通过科技部网站对外公布了《地震灾后应急实用技术手册》,中科院水利部成都山地灾害与环境研究所7项技术入选该手册。   成都山地所入选的技术包括:“泥石流综合防治技术”、“滑坡(含崩塌)灾害综合防治技术”、“干旱地区不同岩土组成坡地植被恢复技术”

哺乳动物细胞培养有没有厌氧的

哪有厌氧的哺乳动物啊开放培养时一般把细胞置于95%空气加5%二氧化碳混合气体环境中,此浓度的CO2与培养液PH缓冲体系中的NaHCO3浓度相平衡,二氧化碳既是细胞代谢产物,也是细胞生长繁殖所需成分,它在细胞培养中的主要作用在于维持培养基的pH值

哺乳动物原代细胞培养的β半乳糖苷酶(荧光测定)

β半乳糖苷酶:β半乳糖苷酶由大肠杆菌lacZ基因编码,可催化半乳糖苷水解。最大优势是易于用免疫组织化学法观测其原位表达,是最常用的监测转染率的报道基因之一。以邻—硝基苯—β—D—半乳吡喃糖苷(ONPG)为底物可用标准的比色法检测酶活性,其检测动力学范围为6个数量级。氯酚红—β—D—半乳吡喃糖苷(CP

什么情况下需要更改实验室手册和程序文件?

尽管保持实验室质量管理体系的基本稳定是其持续、有效运行的基础,但是随着内外环境的变化,各质量要素以及体系标准对要素的要求会发生变化,质量体系文件的更改(换版或修订)也就不可避免。质量手册作为实验室质量管理方面纲领性的文件,更改不应过于频繁。如果不考虑个别文字的修改和斟误的话,文件有必要进行实质性修订

哺乳动物原代细胞培养的β半乳糖苷酶(分光光度测定)

试剂和器材: 1.反应缓冲液:5g/L聚乙二醇辛基苯基醚(Triton X-100)、0.05mol/L柠檬酸钠-磷酸盐缓冲液,pH4.3;2.终止液:0.25%甘氨酸-NaOH,pH10;3.底物:6mmol/L对硝基苯基-β-半乳呋喃糖苷溶于缓冲溶液中;4.微量离心机,带1.5—2.0ml小管;

细胞培养室的灭菌与消毒了解一下!

1、甲醛熏蒸甲醛是一种高效能化学灭菌剂。不易燃、不爆炸、不腐蚀金属。它能与蛋白质中的氨基酸结合而使蛋白变性,使酶的活性消失。故有强大的杀菌作用。一般称作为“大消”,用来对细胞间进行彻底的消毒杀菌。但是甲醛是一种对人体有害的物质,并且细胞培养实验室一般空气流通都很差,甲醛的排出也很慢,至少要一周以上。

PCR佐剂手册

A variety of PCR additives and enhancing agents have been used to increase the yield, specificity and consistency of PCR reactions. Whilst these addit

PEI转染手册

使用方法1. 接种细胞:用胶原酶消化细胞并计数(不建议用胰酶)。转染前 18-24 小时进行细胞的铺板,以便在转染时,贴壁细胞的密度大约在 80%左右。注:培养液中的血清和抗生素不影响转染效率。2. 准备 EZ Trans-DNA 复合物1)转染前将所有试剂置于室温 10 分钟。下面,以转染 24

物位计的实用

  微波物位计使用的微波频率有三个频段:C波段(5.8~6.3GHz)、X波段(9~10.5GHz)、K波段(24~26GHz)。制造商根据自己的技术及国家批准的频率来设计产品。  物位测量中的微波一般是定向发射的,通常用波束角来定量表示微波发射和接收的方向性。波束角和天线类型有关,也和使用的微波频

PCR实用大全

PCR引物设计的11条黄金法则一、引物最好在模板cDNA的保守区内设计。DNA序列的保守区是通过物种间相似序列的比较确定的。在NCBI上搜索不同物种的同一基因,通过序列分析软件(比如DNAman)比对(Alignment),各基因相同的序列就是该基因的保守区。二、引物长度一般在15~30碱基之间。引