细胞周期的DNA检测
Ⅰ、样品准备 准备以下一种或几种样品A、组织单细胞悬浮液(如淋巴腺、脾、骨髓、胎盘细胞)B、组织培养细胞C、Ficoll-hypaque分离的单核细胞Ⅱ、反应体系-DNA低渗缓冲液柠檬酸三钠 0.25gTriton-X 100 0.75mlPropidium iodide 0.025g核糖核酸酶 0.005g蒸馏水 250ml我们将该DNA低渗溶液于密闭瓶子中存放数月后并无发现有任何染色活性的丢失Ⅲ、染色1、 每一个管子中放入1×106个细胞;2、 样品离心后尽可能完全地移去上清液,并且不要打碎沉淀块;3、 入1ml的DNA低渗染色缓冲液至沉淀中,并混匀;4、 样品于4℃下避光30分钟或最长不超过1个小时以备流式细胞仪分析。注意:延长在低渗缓冲液的曝光时间会引起样品碎片的增加。......阅读全文
DNA扩增检测技术的应用
在药物的分析和研究,以及控制药物质量等方面有着广泛应用的药物分析检测技术,可以采用物理、化学等方式对药物进行系统的分析,并结合现代化学、光谱、色谱等技术对药品进行研究。DNA扩增检测技是现代生物学重大发现之一,也是现代药物分析中快速检测技术之一。作为人体生命的重要物质,核酸和蛋白的异常表达往往与癌症
抗DNA抗体的检测方法
目前实验室检测抗DNA抗体的方法主要有放免法、间接免疫荧光法、斑点免疫金渗滤法、免疫印记法和酶联免疫(ELISA)法。各种方法由于抗原来源不同、抗原展现形式不同、实验体系的反应条件不同,检测结果不具可比性。不同方法学检测抗DNA抗体的检测原理、优缺点对比见下表。 综上所述,ELISA方法适合高
DNA探针检测法的原理
原理:碱基互补配对。。探针:DNA单链-化学连接的标记基团探针和目标DNA(经过加热,分成单链)混合,探针结合的目标DNA就会被标记
乙肝病毒DNA检测的检测方法
主要有:荧光定量PCR技术、竞争PCR技术、PCR酶联免疫吸附法、荧光标记引物法和PCR酶联化学发光法。 临床上最先进的乙肝病毒DNA检测方法是实时荧光定量PCR方法,由于此技术要求较高,只有少数大型医院有条件使用实时荧光定量PCR方法。
乙肝病毒DNA检测的检测费用
乙肝患者到医院检查确诊病情或者复查时,都要进行乙肝病毒DNA检测,这一检测项目已经成为观察乙肝病毒实际情况的最重要和最关键的指标,在抗病毒治疗时,也需要进行乙肝DNA病毒检查。 乙肝病毒DNA检测费用受不同因素的影响而有一定差异。乙肝病毒DNA检测费用大概在100元左右。如果用进口试剂化验定量
细胞周期1
以有丝分裂方式增殖的细胞从一次分裂结束到下一次分裂结束所经历的过程。这一过程周而复始。细胞周期是50年代细胞学上重大发现之一。在这之前认为有丝分裂期是细胞增殖周期中的主要阶段,而把处于分裂间期的细胞视为细胞的静止阶段。1951 年霍华德等用32P-磷酸盐标记了蚕豆根尖细胞,通过放射自显影研究根尖
细胞周期2
G2 期 是DNA复制结束和开始有丝分裂之间的间隙,在这期间细胞合成某些蛋白质和RNA分子,为进入有丝分裂提供物质条件。 用放射标记的RNA前体和蛋白质前体示踪,表明G2 期进行着强烈的RNA和蛋白质的合成。假如破坏这些合成过程,细胞就不能过渡到M期。G2 期合成的是染色体浓缩以及形成有丝
细胞周期的间期定义
间期是细胞循环中细胞生长和工作的时段,一个细胞在细胞循环90%左右的时间是在间期中。间期应注意与前期、中期、后期、末期相区分,后四者属分裂期。
细胞周期的过程分析
间期 间期又分为三期、即DNA合成前期(G1期)、DNA合成期(S期)与DNA合成后期(G2期)。 1.G1期(first gap) 从有丝分裂到DNA复制前的一段时期,又称合成前期,此期主要合成RNA和核糖体。该期特点是物质代谢活跃,迅速合成RNA和蛋白质,细胞体积显著增大。这一期的主要
细胞周期蛋白的概念
中文名称细胞周期蛋白英文名称cyclin定 义一类与细胞周期功能状态密切相关的蛋白质家族,其表达水平随着细胞周期发生涨落,可通过与特定蛋白激酶结合并激活其活性,从而在细胞周期的不同阶段发挥调控作用。应用学科遗传学(一级学科),细胞遗传学(二级学科)
细胞周期的过程介绍
间期间期又分为三期、即DNA合成前期(G1期)、DNA合成期(S期)与DNA合成后期(G2期)。1.G1期(first gap) 从有丝分裂到DNA复制前的一段时期,又称合成前期,此期主要合成RNA和核糖体。该期特点是物质代谢活跃,迅速合成RNA和蛋白质,细胞体积显著增大。这一期的主要意义在于为下阶
细胞周期的细胞分类
在体内根据细胞的分裂能力可把它们分为三类:①周期性细胞,如造血干细胞,表皮与胃肠粘膜上皮的干细胞。这类细胞始终保持活跃的分裂能力,连续进入细胞周期循环;②终端分化细胞,如哺乳动物成熟的红细胞、神经细胞等高度分化的细胞,它们丧失了分裂能力,又称终末细胞(end cell);③暂不增殖细胞群(G0期细胞
细胞周期的影响因素
细胞周期内有两个阶段最为重要:G1到S和G2到M;这两个阶段正处在复杂活跃的分子水平变化的时期,容易受环境条件的影响,如果能够人为的进行调控,将对深入了解生物的生长发育和控制肿瘤生长等有重要意义。已发现很多体内因素可以激发或抑制细胞的增殖,例如多种激素、血清因子、多胺、蛋白水解酶、神经氨酶、cAMP
什么是细胞周期?细胞周期时间如何确定?
细胞周期(cell cycle)是指细胞从一次分裂完成开始到下一次分裂结束所经历的全过程,分为间期与分裂期两个阶段。过程间期间期又分为三期、即DNA合成前期(G1期)、DNA合成期(S期)与DNA合成后期(G2期)。1.G1期(first gap) 从有丝分裂到DNA复制前的一段时期,又称合成前期,
沃尔玛食品加入DNA检测
尽管持续在食品安全上加大投入,但沃尔玛还是遭遇了"狐狸肉"事件。沃尔玛在2013年的最后一天宣布,将非国家标准要求的DNA检测列入易掺假的肉制品抽检中。 抽检的对象包括牛肉、羊肉、驴肉、鹿肉等。事实上,2013年沃尔玛已对牛羊肉商品进行了多次抽样DNA测试,并终止了不合格供应商的合作。
DNA(基因)检测-Southern-Blot
DNA(基因)检测-Southern BlotDNA吸印转移1.室温下将电泳后的琼脂糖凝胶浸入500ml溶液A中,摇动30分钟后换500ml新鲜溶液A再摇30分钟,使DNA双链碱变性。溶液A:5M NaCl 300.0ml10M NaOH 50.0mlH2O 650.0
DNA质量检测相关方法
对于基因组DNA质量检测主要包括:基因组DNA片段大小的确定,基因组DNA浓度的测定,基因组DNA纯度的测定三方面。用到的技术方法有:琼脂糖凝胶电泳(确定片段大小),使用紫外分光光度计测定基因组DNA溶液的OD值(浓度和纯度的测定,OD260/OD280应该在1.8左右,高了表明有RNA污染,低了表
简述HBVDNA的检测意义
乙肝病毒检测有两个意义,一个是乙肝病毒DNA定性检测,一个是定量检测,另外还有一个是基因分析和耐药的变异检测,定性检测比定量要求高,这点在国内是比较忽视的。 还有定量的问题,强调用干扰素和核苷类似物进行抗病毒治疗,无论是哪一种药物的治疗,乙型肝炎病毒的滴度和阴转都是考核抗病毒治疗的硬性指标,所
DNA检测的原理、方法和手段
要看你是要测DNA的序列还是仅仅检测有没有DNA。如果要检测DNA的存在就用二苯胺试剂在水浴加热的条件下观察到蓝色现象(原理是DNA遇二苯胺试剂在水浴加热的条件呈蓝色),如果要检测DNA的序列就通过DNA分子杂交技术对从生物细胞内提取的DNA分子进行测序(原理是DNA的碱基互补配对原则),如果是检测
简述抗DNA抗体的检测方法
目前实验室检测抗DNA抗体的方法主要有放免法、间接免疫荧光法、斑点免疫金渗滤法、免疫印记法和酶联免疫(ELISA)法。各种方法由于抗原来源不同、抗原展现形式不同、实验体系的反应条件不同,检测结果不具可比性。不同方法学检测抗DNA抗体的检测原理、优缺点对比见下表。 综上所述,ELISA方法适合高
游离核酸微量DNA样本的检测
近年来,DNA分析技术广泛应用于医学、法学、环境等诸多领域,成为科学研究的一大重点。例如产前诊断及法医检测等首先进行微量DNA 提取,然后进行PCR扩增验证,也有一些研究单位会对一些古老样本进行DNA提取,同样做PCR扩增验证。它们的相同之处在于,用于分析的样本DNA含量可能极其有限,稍有遗损就可能
植物DNA提取中怎样检测提取到DNA质量
第一种方法是测量260/280的比例,判断是否有蛋白质的污染。在260nm和280nm处测定DNA溶液的光吸收,A260与A280之比应在1.75-1.80之间。低于此值表明制备物中残留蛋白质成分较高或含有酚,高于此值表明有RNA的残留。第二种方法是凝胶电泳分析,看有无断裂降解。影响DNA提取质量的
DNA检测将替代常用癌症检测方法
巴氏涂片检查方法(Pap smear)是公共卫生一种广泛使用的金标准检查方法,这种方法主要针对子宫颈癌等疾病,能有效的检测出人类乳头瘤病毒(HPV)细胞的异常变化。然而近期美国食品药品管理局(FDA)批准了一种以DNA为基础的病毒检测方法。 1943年,Papanicolaou和Tra
细胞凋亡检测实验——DNA-片断化检测
实验方法原理细胞凋亡时主要的生化特征是其染色质发生浓缩, 染色质DNA 在核小体单位之间的连接处断裂, 形成50~300 kbp 长的DNA 大片段, 或180~200 bp 整数倍的寡核苷酸片段, 在凝胶电泳上表现为梯形电泳图谱(DNA ladder)。细胞经处理后,采用常规方法分离提纯DNA,进
关于DNA病毒的检测治疗的介绍
对DNA检测,一个是定量检测,另外还有一个是基因分形和耐药的变异,定性检测比定量要求高。还有定量的问题,强调用干扰素和核苷类似物进行抗病毒治疗,无论是哪一种药物的治疗,病毒的滴度和阴转都是考核抗病毒治疗的硬性指标,所以这项检测指标是非常重要的,而且在很多药物治疗过程中,乙肝病毒DNA下降的速度和
什么是细胞周期?
细胞周期(cell cycle)是指细胞从一次分裂完成开始到下一次分裂结束所经历的全过程,分为间期与分裂期两个阶段。生命是从一代向下一代传递的连续过程,因此是一个不断更新、不断从头开始的过程。细胞的生命开始于产生它的母细胞的分裂, 结束于它的子细胞的形成,或是细胞的自身死亡。通常将子细胞形成作为一次
细胞周期测定实验
细胞计数法 BrdU渗入法 流式细胞仪测定法 实验方法原理 体外培养细胞 生长、分裂繁殖的能力,可用分裂指数来表示。它与生长曲线有一定的
细胞周期测定实验
细胞计数法 BrdU渗入法 流式细胞仪测定法 实验方法原理 体外培养细胞 生长、分裂繁殖的能力,可用分裂指数来表示。它与生长曲线有一定的
什么是细胞周期?
细胞周期(英语:cell cycle),是指能持续分裂的真核细胞从一次有丝分裂结束后生长,再到下一次分裂结束的循环过程(准确来说只要有DNA复制,不管是不是有没有有丝分裂它都有细胞周期。生殖细胞无细胞周期。)。细胞周期的长短反映了细胞所处状态,这是一个细胞物质积累与细胞分裂的循环过程。癌变的细胞以及
植物细胞周期观察
一、实验目的1.学会植物细胞、组织的固定、离析和压片方法,了解并初步掌握制作临时玻片和永久玻片的方法。2.观察有丝分裂过程中染色体的形态特征和动态变化过程,着重了解分裂期内中、后期染色体变化的特征。二、实验原理植物根尖分生组织的细胞,依一定的程序有规律地进行着有丝分裂过程,植物种类不同,细胞周期所需