流式细胞术测效靶细胞杀伤实验

做免疫学特别是肿瘤学实验，总免不了要测淋巴细胞或其他细胞对肿瘤细胞的杀伤，老外最常用的是Cr51放射实验，但这个方法在国内的不少地方都不能做，而MTT这个方法又太老了，而且也不准确，那么替代方法就用流式细胞术，又方便，又准确，这也是偶参照老外的方法吧。1 计数靶细胞，并加入CFSE，使CFSE终浓度达到2uM,37度30分钟。2 拿出后，1000rpm,5min,可隐约看到细胞染成黄色，PBS洗三次3 与效应细胞混培，作用4-6小时。4 将细胞混合液消化取出，洗二次，PI工作液5ul，避光30分钟后上流式5 CFSE，PI双阳性的细胞为被杀伤的靶细胞，除以靶细胞总数，即为杀伤率。注意事项：1。CFSE及PI的浓度必须注意，宁低勿高，个人感觉，如果标高的话，在4度放一晚好像会好一些2。必须设全阴，CFSE单标，PI单标，CFSE＋PI双标并同步化的靶细胞的参照.3。作用时间不能太长，不要超过8个小时。 ......阅读全文

流式细胞术测效靶细胞杀伤实验

做免疫学特别是肿瘤学实验，总免不了要测淋巴细胞或其他细胞对肿瘤细胞的杀伤，老外最常用的是Cr51放射实验，但这个方法在国内的不少地方都不能做，而MTT这个方法又太老了，而且也不准确，那么替代方法就用流式细胞术，又方便，又准确，这也是偶参照老外的方法吧。1　计数靶细胞，并加入CFSE，使CFSE终浓度

2019-04-27 19:06 News WIKI 相关搜索

法测效靶细胞杀伤——用流式细胞术

做免疫学特别是肿瘤学实验，总免不了要测淋巴细胞或其他细胞对肿瘤细胞的杀伤，国外最常用的是Cr51放射实验，但这个方法在国内的不少地方都不能做，而MTT这个方法又太老，而且也不准确，那么替代方法就用流式细胞术，又方便，又准确。具体参照如下：1、计数靶细胞，并加入CFSE，使CFSE终浓度达到2uM,

2020-06-29 17:51 News WIKI 相关搜索

靶细胞杀伤实验总论－2

2、流式细胞标记法（1）PE-mAb/FITC-annexin V 荧光标记法正常细胞的磷酯酰丝氨（phosphatidylserine，PS）位于细胞膜内表面，细胞凋亡时翻转露于膜外侧，可与annexinV高亲合力结合。研究发现PS外翻为细胞凋亡的早期事件，先于膜通透性增加所51Cr或其他染料

2020-09-14 16:23 News WIKI 相关搜索

靶细胞杀伤实验：LDH法

一、效应细胞的制备激惹5天后，于无菌条件下取出受鼠引流的腹股沟淋巴结，100目钢网研磨，调整细胞浓度为2×107.ml-1。台盼蓝色要求存活率>95%。二、靶细胞的制备 P815细胞株系DBA/2小鼠的肥大细胞瘤细胞株。连续传代培养，调整细胞浓度为2×105/ml或3.33×1

2020-09-14 16:18 News WIKI 相关搜索

靶细胞杀伤实验总论－1

细胞介导的免疫反应（cell mediated immune， CMI）在机体抗感染及抗肿瘤免疫、移植排斥反应和自身免疫病中发挥重要的作用。CMI的主要效应细胞之一为细胞毒T淋细胞（cytotoxic T lymphocyte，CTL）。目前在医学基础与临床研究中重视CTL活性测定，将其作为

2020-09-14 16:24 News WIKI 相关搜索

靶细胞杀伤实验：AnnexiV标记法

正常细胞的磷酯酰丝氨（phosphatidylserine，PS）位于细胞膜内表面，细胞凋亡时翻转露于膜外侧，可与annexinV高亲合力结合。研究发现PS外翻为细胞凋亡的早期事件，先于膜通透性增加所51Cr或其他染料的释放。将效应细胞与靶细胞充分共育后，用PE结合的效应细胞特异性单克隆抗体（如CD

2020-09-14 16:16 News WIKI 相关搜索

靶细胞杀伤实验：CFSE/PI法

做免疫学特别是肿瘤学实验，总免不了要测淋巴细胞或其他细胞对肿瘤细胞的杀伤，老外最常用的是Cr51放射实验，但这个方法在国内的不少地方都不能做，而MTT这个方法又太老了，而且也不准确，那么替代方法就用流式细胞术，又方便，又准确。1、计数靶细胞，并加入CFSE，使CFSE终浓度达到2uM，37度30分钟

2019-07-06 23:23 News WIKI 相关搜索

靶细胞杀伤实验：CFSE/PI法

做免疫学特别是肿瘤学实验，总免不了要测淋巴细胞或其他细胞对肿瘤细胞的杀伤，老外最常用的是Cr51放射实验，但这个方法在国内的不少地方都不能做，而MTT这个方法又太老了，而且也不准确，那么替代方法就用流式细胞术，又方便，又准确。 1、计数靶细胞，并加入CFSE，使CFSE终浓度达到2u

2020-09-14 16:19 News WIKI 相关搜索

靶细胞杀伤实验：Cr51法

一、原理用Na2 51 CrO 4 标记靶细胞，若待检效应细胞能杀伤靶细胞，则51 Cr( 铬) 从靶细胞内释出。以γ计数仪测定释出的51 Cr 放射活性，靶细胞溶解破坏越多，51 Cr 释放就越多，上清液的放射活性也就越高，应用公式可计算出待检效应细胞的杀伤活性。二、步骤（以CTL杀伤肿

2020-09-14 16:19 News WIKI 相关搜索

杀伤靶细胞的过程

CTL杀伤靶细胞是一个连续过程，可分为三个阶段，主要研究内容如下：1、效应靶细胞结合：CTL是通过其膜上的受体TCR，即Ti-CD3分子与靶细胞结合，此时膜上的淋巴细胞功能相关抗原Ⅰ与靶细胞膜上的配基Ⅰ，又称细胞内粘附分子相互作用，即靶细胞与效应细胞初步接触。此时亲和力低，为非特异性的，但可促使TC

2022-09-09 10:26 News WIKI 相关搜索

靶细胞杀伤实验：MTT和CCK8比较

Cell Counting Kit-8简称CCK-8试剂盒，是一种基于WST-8的广泛应用于细胞增殖和细胞毒性的快速高灵敏度检测试剂盒。 WST-8是一种类似于MTT的化合物，在电子耦合试剂存在的情况下，可以被线粒体内的一些脱氢酶还原生成橙黄色的formazan。细胞增殖越多越快，则颜色越深；细胞毒

2020-09-14 16:17 News WIKI 相关搜索

流式细胞术实验步骤

流式细胞术实验：1、制备细胞悬液，计数2、分装，按照每个EP（1.5ml）管1-2*10 6个细胞分装，3500rpm，4度离心。3、用100ulPBS重悬，加入10ul大鼠血清封闭，4度避光30min。4、加入相应的荧光标记的抗体，混匀，避光，4度孵育30min。5、加入1mlPBS洗两遍。6、用

2022-08-16 16:32 News WIKI 相关搜索