骨骼肌细胞损伤模型的建立
1 材料 地塞米松磷酸钠注射液(江苏第三制药厂,批号000706) ;RPMI - 1640 培养基(GIBCO ,USA)(每升含10 %小牛血清、L-谷氨酰胺0. 33mg、青霉素100u、链霉素100u、pH-7. 4) ; 胰蛋白酶(Difco ,Lot :12885655) ; 四甲基氮唑盐(MTT) ( FLUKA , Switzerland) ;FLUO-3/ AM(CALBIOCHEM,Ca) ; 二甲基亚砜(DMSO) (MERCK,USA) ; SOD 与MDA 试剂盒(南京建成生物工程研究所) ;吖啶橙(AO) 、溴乙啶( EB )(FLUKA ,Switzerland) ;酶标仪(BIO-RAD ,USA) ;荧光显微镜(OLYPUS ,Japan) ; 激光共聚焦显微镜(BIO-RAD 公司MRC-1024 型,USA) 。SD 大鼠(南京中医药大学,动物合格证号:SCXK(苏) 2002-0012)......阅读全文
肿瘤动物模型如何建立？
常规的动物实验，除了皮肤或者骨的缺损修复，癌症也是其中重要的一种。目前，癌症仍然威胁人类的一大疾病，因此需要动物实验来深入了解如何有效进一步治疗癌症。 通常，动物模型一般是研究者利用化学致癌剂或者致癌病毒诱发实验动物肿瘤。那么肿瘤动物实验模型建立的优点主要有：抗肿瘤药物的筛选以及疗效；抗肿瘤转
肿瘤动物模型建立实验
一、肿瘤动物模型建立的意义： （1）评价抗肿瘤免疫治疗的疗效； （2）作为抗肿瘤药物筛选模型； （3）为肿瘤转移研究提供更好的研究平台； （4）为研发抗肿瘤转移性药物提供良好的实验工具。 二、诱发性肿瘤动物模型 实验方法原理:诱发性肿瘤动物模型是指研究者用化学致癌剂、放射线、致癌病
肿瘤动物模型建立实验
一、肿瘤动物模型建立的意义： （1）评价抗肿瘤免疫治疗的疗效； （2）作为抗肿瘤药物筛选模型； （3）为肿瘤转移研究提供更好的研究平台； （4）为研发抗肿瘤转移性药物提供良好的实验工具。 二、诱发性肿瘤动物模型 实验方法原理:诱发性肿瘤动物模型是指研究者用化
从成年骨骼肌分离和培养成肌细胞实验
实验方法原理 在添加 20%（fetal bovine serum， FBS) 的 Ham's F12 培养中，原代细胞容易生长。在不改变培养条件的情况下，这些细胞增殖和分化，融合形成多个细胞核的肌管。这证明培养的细胞具有成肌性。试剂、试剂盒 Ham F12FBSD-PBSA仪器、耗材 手术
从成年骨骼肌分离和培养成肌细胞实验
分离培养细胞 实验方法原理 骨豁肌源性成肌细胞能够培养从几种成年动物骨骼肌分离的成肌细胞。在培养条件下，成肌细胞仍继续表达一些分化特征。成肌细胞称卫星细胞，分
从成年骨骼肌分离和培养成肌细胞实验
分离培养细胞 实验方法原理 骨豁肌源性成肌细胞能够培养从几种成年动物骨骼肌分离的成肌细胞。在培养条件下，成肌细胞仍继续表达一些分化特征。成肌细胞称卫星细胞，分
新模型研究血管损伤影响脊髓损伤后的结局恢复
显微注射技术 中枢神经系统不具有像周围神经系统一样的可塑性，并且外伤是一种不可逆损伤。除了最初的机械性损伤，还将伴随长期持久的级联性损伤，即继发性损伤，继发性损伤发生后会引起进一步的轴突损伤和神经元死亡。继发性损伤机制包括出血、组织缺血、血脊髓屏障破裂、炎症、谷氨酸盐毒性，以及脱髓鞘，细胞
脊髓机械性损伤模型的制作实验——大鼠脊髓NYU模型
实验方法原理脊髓挫伤是临床最常见的脊髓损伤类型（交通事故、高空坠物、运动损伤等造成），NYU模型是应用最广泛的鼠类脊髓挫伤模型，该模型可以很好地模拟临床，适用于病理和脊髓再生等多方面研究。双侧椎板（T8）去除术后，使用脊髓撞击仪(NYU大鼠脊髓撞击仪I型），以不同重量的下落重物撞击脊髓，造脊髓撞击伤
staurosporine诱导小鼠心肌细胞凋亡模型构建
原代心肌细胞的培养及实验方案取出生后0~24 h C57BL/6cr小鼠心脏，按改良的Lader方法进行细胞的分离。 获取博动的心脏迅速放置于无Ca2+、Mg2+的Hank’s平衡液中。剪碎心脏，放置在4℃条件下100 g/L的Trypsin溶液中消化16~18 h，用Trypsin抑制剂中止消化。
脊髓机械性损伤模型的制作实验
实验前的准备及暴露脊髓 大鼠脊髓NYU模型 大鼠脊髓挤压伤模型 大鼠脊髓半横断模型 大鼠脊髓全横切模型 实验方法原理
脊髓机械性损伤模型的制作实验
实验方法原理 对于各种大鼠或小鼠脊髓损伤模型而言，前提都是要去除相应节段椎板，清晰暴露需要损伤的脊髓节段，因此本节所有大、小鼠损伤模型中都是以打开飞节段椎板为前提进行的进一步损伤。实验材料 实验动物试剂、试剂盒 1%戊巴比妥钠碘伏仪器、耗材 手术刀眼科摄(2个）眼科剪乳突撑开器小型咬骨钳针持线剪缝针
转基因小鼠模型的建立(SOP)6
[洗卵管制作]1） 点燃酒精灯，调节火焰到最佳。捏持玻璃毛细吸管或巴氏移液管在火焰上焰旋转过火。2） 当吸管开始变软，快速撤离火焰，向外急剧扯拉使吸管变长，形成口径大约200?l的吸管。注意制备过程中离开火焰的时间以及扯拉的力度，尽量保证制备吸管的一致性。3） 为吸管评分，轻柔地折断吸管，辨别
转基因小鼠模型的建立(SOP)1
名称：转基因小鼠模型的建立(SOP)关键词：转基因小鼠目的：在动物体研究转化基因原理：转基因动物是指染色体基因组中整合有外源基因并能遗传给后代的一类动物。整合到动物染色体基因组的外源基因称为转基因。转基因技术则是指制备转基因动物所需的一套技术，它涉及外源基因的构建、载体和受体的筛选、基因导人技术、供
人胃癌高转移模型的建立实验
实验方法原理 用人胃癌组织块SGC-7901 原位移植于SCID小鼠，第4周末移植瘤向淋巴结和肝脏等器官转移， 转移率达66. 7% (2/3) ，第6 周末转移率高达100% (10/ 10) 。实验材料 雄性SPF级SCID小鼠人胃癌组织SGC-7901试剂、试剂盒 水合氯醛福尔马林液仪器、耗材
转基因小鼠模型的建立(SOP)3
（2）受体母鼠的准备输卵管转移的受体鼠应该为4-6周龄大小，体重在20-25克左右，严禁用低体重以及超重母鼠，若体重较低，其体能不足以维持妊娠，可能导致受精卵的重新吸收；若体重较重，麻醉剂被吸收入脂肪组织，降低麻醉效果，可能使手术困难，而且脂肪组织的存在意味着静脉的存在，所以手术时切掉脂肪组织可能导
转基因小鼠模型的建立(SOP)2
[不足之处]（1）外源基因随机整合；（2）个别原核不清晰，需进行特殊处理；（3）需大型精密仪器，费用昂贵；（4）操作周期相对较长。（二）实验器材的准备1．输精管切除术用器材：弯式有齿镊、直式有齿镊、显微镊、手术剪、自动小夹涂药器、自动小夹、带弯针4/0丝线及持针器、直径为10cm塑料 Petri氏培
核小体模型的建立基础和研究
人们接着用化学交联、高盐分离组蛋白，以及X衍射等方法进一步研究组蛋白多聚体的结构、排列以及怎样和DNA结合的，从而建立了核小体模型。1984年Klug和Butler进行了修正。核小体的构造可用图表示：每一个核小体结合的DNA总量为200bp左右，一般在150~250变化范围（micrococcal
转基因小鼠模型的建立(SOP)5
4．显微注射（1）导入DNA的制备：显微注射首先涉及导入DNA的制备，显微注射的转入基因通常为去除载体序列的线状DNA，转基因所用载体是真核表达载体，即含有在哺乳动物细胞内表达的真核启动子。所谓组织特异性的实现多是通过组织特异性启动子来实现组织特异性表达的。制备转基因小鼠，必须对待导入DNA进行分离
转基因小鼠模型的建立(SOP)4
（6） 为保暖包裹小鼠于纱布中或将其放置于热垫内使其苏醒，处于麻醉状态下的小鼠应该严格监护直到其完全苏醒。手术后小鼠饲养2周后确定手术是否成功。（7） 实验性饲养：将1-2只母鼠与输精管切除小鼠合笼饲养，次晨进行阴道栓检查。有阴道栓的母鼠，用磷酸缓冲液处理后24小时，其输卵管潮红。卵细胞应该处于单
转基因小鼠模型的建立(SOP)7
10） 移卵操作完成后，撤回移卵管，去除器械，按原本位置将各器官重置于腹腔内。10）缝合切口，用小夹夹持皮肤。常用自动小夹代替缝线，这样可以避免小鼠啃嘶缝线，切口裂开。11）若进行双侧手术，则于另一侧子宫角重复上述操作。12）手术完成后，安置小鼠于清洁的笼中。麻醉状态下，小型哺乳动物无法有效维持机
人胃癌高转移模型的建立实验
人胃癌高转移模型的建立可以：（1）研究肿瘤转移机制；（2）研究肿瘤防治；（3）为肿瘤转移研究提供更为理想的动物模型。实验方法原理用人胃癌组织块SGC-7901 原位移植于SCID小鼠，第4周末移植瘤向淋巴结和肝脏等器官转移， 转移率达66. 7% ，第6 周末转移率高达100% 。实验材料雄性S
转基因小鼠模型的建立(SOP)7
4） 如果未见DNA溶液流，则轻轻摩擦持样器钝缘，渐渐的打开注射器针头。针头重新进入油内确定DNA溶液流的存在。5） 移动持卵管回到受精卵下部。通过微分驱动水压控制系统使持卵管内产生温和的负压，并使持卵管末端吸住受精卵。此操作必须确保受精卵基底部与凹玻片基底部轻轻接触。注意不宜吸得过紧，否则会使
转基因小鼠模型的建立(SOP)8
（1） RNA的分离：根据实验者的需要从转基因小鼠组织或细胞中提取总RNA或mRNA。分离总RNA比较简单，且适合做基因做基因转录分析。实验操作参见第一章的第四节。（2） Northern 印迹分析：该技术用于定性检测转基因动物组织或细胞中转基因转录的相对水平。其实验操作参见第一章的第九节。（3
诱发性肝癌动物模型的建立
二乙基亚硝胺（DEN）诱发大白鼠肝癌：取体重250g左右的封闭群大白鼠，雌雄不拘。按性别分笼饲养。除给普通食物外，饲以致癌物，即用0.25%DEN水溶液灌胃，剂量为10mg/kg，每周一次，其余5天用0.025%DEN水溶液放入水瓶中，任其自由饮用。共约4个月可诱发成肝癌。或单用0.005%掺入饮
肿瘤动物模型建立实验（一）
实验方法原理 诱发性肿瘤动物模型是指研究者用化学致癌剂、放射线、致癌病毒诱发动物的肿瘤等。实验材料 肿瘤细胞小鼠试剂、试剂盒 无血清培养基质3%中性甲醇石腊仪器、耗材 低温离心机血球计数器游标卡尺实验步骤 一、肝癌 1．二乙基亚硝胺（DEN）诱发大白鼠肝癌（1）取体重250 g左右的封闭群大白鼠，雌
肿瘤动物模型建立实验（二）
5、鼻咽癌（1）二甲基胆蒽（MC）诱发大鼠鼻咽癌① 取直径2～3 mm的硬质塑米管，在酒精灯上小火拉成锥形，每段长约3.5 cm，管内填以结晶体MC。② 小管一端用火封闭，以防药物外溢，尖端用针刺数孔，使MC能从小妃溢出。③ 取体重120 g左右的大白鼠，雌雄均可，乙醚麻醉后，由前鼻孔将上述含MC的
肿瘤动物模型建立实验（二）
2．二烃黄樟素（Dihydrosafrole）诱发大鼠食管癌（1）二烃黄樟素是一种制备啤酒的调味品，在大鼠饲料中加入百万分之二千五百至一万（2500～10000 ppm）黄樟素，就能引起20～75%的食管癌。3．甲基苄基亚硝胺诱发大鼠食管癌（1）用0.2%或0.005% 的甲基苄基亚硝胺水溶液，给动
全球粮食系统环境影响模型建立
据英国《自然》杂志10月10日在线发表的一篇可持续性研究文章，科学家建立了一个全球粮食系统模型，经过分析指出，如果不采取行动应对人口和收入水平的预期变化，在2010—2050年期间，粮食系统（为全球人口提供食物所涉及的过程和基础设施）对环境造成的影响可能会上升50%—90%。研究人员分析了几种环
肿瘤动物模型建立实验（一）
一、肿瘤动物模型建立的意义：（1）评价抗肿瘤免疫治疗的疗效；（2）作为抗肿瘤药物筛选模型；（3）为肿瘤转移研究提供更好的研究平台；（4）为研发抗肿瘤转移性药物提供良好的实验工具。二、诱发性肿瘤动物模型实验方法原理:诱发性肿瘤动物模型是指研究者用化学致癌剂、放射线、致癌病毒诱发动物的肿瘤等。实验材料：
肿瘤动物模型建立实验（三）
5、AKR白血病模型AKR小鼠为白血病高发品系，淋巴细胞白血病发病率雄性76%~90%，雌性为68%~90%。6、实验用6~12月龄AKR小鼠， 此时鼠的脾和淋巴结肿大，血象异常。7、经血液检查确诊为白血病后的次日， 配对分组并开始给予受试药，观察结果。8、结果判定观察指标：末梢血象,白细胞数,淋巴