staurosporine诱导小鼠心肌细胞凋亡模型构建
原代心肌细胞的培养及实验方案取出生后0~24 h C57BL/6cr小鼠心脏,按改良的Lader方法进行细胞的分离。 获取博动的心脏迅速放置于无Ca2+、Mg2+的Hank’s平衡液中。剪碎心脏,放置在4℃条件下100 g/L的Trypsin溶液中消化16~18 h,用Trypsin抑制剂中止消化。然后在37℃下,用胶原酶Ⅱ于CO2培养箱内,在摇床上继续孵化消化45~60 min,最后用70 μm直径尼龙过滤网过滤获取心肌细胞,用含有25 mmol/L HCO3-,100 mL/L FSB,1×105 u/L青霉素G和50 g/L链霉素的M199培养基制成细胞悬液,按差速贴壁分离法纯化心肌细胞。加入10 μmol/L BrdU到细胞悬液,以6×105密度种植于96或24孔细胞培养板上,置37℃培养箱培养. 培养的心肌细胞24 h后更换含有10 μmol/L BrdU新鲜M199培养基,培养72 h后进行实验使用. 设立阴......阅读全文
staurosporine诱导小鼠心肌细胞凋亡模型构建
原代心肌细胞的培养及实验方案取出生后0~24 h C57BL/6cr小鼠心脏,按改良的Lader方法进行细胞的分离。 获取博动的心脏迅速放置于无Ca2+、Mg2+的Hank’s平衡液中。剪碎心脏,放置在4℃条件下100 g/L的Trypsin溶液中消化16~18 h,用Trypsin抑制剂中止消化。
staurosporine诱导的细胞凋亡
Staurosporine是蛋白激酶C和其他大部分激酶(包括酪氨酸蛋白激酶)强有力的抑制剂。通过阻断磷酸二酯键从DNA转移到活化的酪氨酸位点而直接抑制拓普异构酶II的活性。可用于诱导CHO细胞凋亡。实验方法原理Staurosporine是蛋白激酶C和其他大部分激酶(包括酪氨酸蛋白激酶)强有力的抑制剂
staurosporine诱导的细胞凋亡
实验方法原理 Staurosporine是蛋白激酶C和其他大部分激酶(包括酪氨酸蛋白激酶)强有力的抑制剂。通过阻断磷酸二酯键从DNA转移到活化的酪氨酸位点而直接抑制拓普异构酶II的活性。可用于诱导CHO细胞凋亡。
staurosporine诱导的细胞凋亡
实验方法原理 Staurosporine是蛋白激酶C和其他大部分激酶(包括酪氨酸蛋白激酶)强有力的抑制剂。通过阻断磷酸二酯键从DNA转移到活化的酪氨酸位点而直接抑制拓普异构酶II的活性。可用于诱导CHO细胞凋亡。
SARS小鼠模型的构建策略与应用进展
在全国疫情逐步清零时,北京的疫情却出现了“反弹”,牵动着全国人民的心。截止6月18日24时,北京8天内已出现新增确诊病例183例,还有一些主动筛查中发现的无症状携带病例。这无疑在告诉我们每一个人:疫情尚未结束,仍需加强防疫! 对于中国乃至整个世界来说,由新冠病毒(SARS-CoV-2) 引起的全
Cell新突破:CRISPR技术助力构建小鼠模型
来自Whitehead研究所的研究人员利用基因调控系统CRISPR/Cas,一步操控小鼠基因组纳入了报告基因和条件性等位基因。现在生成包含如此复杂工程等位基因的动物只需数周而非数年的时间,并可利用这些动物来构建疾病模型及研究基因功能。这一突破性的研究发表在《细胞》(Cell)杂志上。 Wh
Nature长文:构建人源化的小鼠模型
小鼠常被用于研究癌症,但科学家仍在努力改善这一模型,以更好地研究人类疾病。基因编辑的进步使研究人员能够构建更能反映人类疾病的小鼠模型。 1915年,全球处于战争状态,日本病理学家Katsusaburo Yamagiwa和他的助理Koichi Ichikawa正在努力研究一个致命武器,其杀伤力
南模生物小鼠模型在构建一种全新诱导型Cre重组酶系统...
南模生物小鼠模型在构建一种全新诱导型Cre重组酶系统的应用Cre-loxP介导的遗传操作技术,广泛应用于谱系示踪、基因异位表达和组织特异性基因敲除等研究,为了解器官发育、组织再生和疾病进程中体内细胞行为和基因功能提供了关键依据。然而,Cre-loxP介导的遗传操作技术长期存在的缺陷和不足,已成为阻碍
Cell:-CRISPR技术加快转基因小鼠模型构建
Whitehead研究所的研究人员利用基因调控系统CRISPR/Cas,仅需一步操作就可将报告基因和条件性等位基因转入小鼠基因组中。目前生成包含如此复杂工程等位基因的动物只需数周而非数年的时间,科学家可快速利用这些动物来构建疾病模型及研究基因功能。这一突破性的研究发表在《细胞》(Cell)杂志上
微流控芯片技术构建多重诱导神经芯片模型
神经系统发育是一个高度动态和极其复杂的过程。建立体外仿生的组织细胞外微环境,探索和理解这些错综复杂的神经发育过程对神经科学、发育生物学及临床医学都具有极大的科学研究与应用价值。然而,目前国内外学者研究主要集中于单因素诱导的神经发育,对于多诱导因素参与的神经系统发育微环境体外构建及其技术与方法,还有待
微流控芯片技术构建多重诱导神经芯片模型
神经系统发育是一个高度动态和极其复杂的过程。建立体外仿生的组织细胞外微环境,探索和理解这些错综复杂的神经发育过程对神经科学、发育生物学及临床医学都具有极大的科学研究与应用价值。然而,目前国内外学者研究主要集中于单因素诱导的神经发育,对于多诱导因素参与的神经系统发育微环境体外构建及其技术与方法,还有待
PNAS:CRISPRCas9系统构建心脏衰竭小鼠模型
突变体小鼠模型为我们研究个别基因对发育、生理以及疾病发生等科学问题提供了极大的便利。然而,传统的小鼠突变体模型构建是一项十分耗时耗力的工程。最近的CRISPR-Cas9系统对于动物体的遗传修饰是一项革命性的突破。 CRISPR系统首先被发现于细菌抗病毒侵染的免疫系统,通过一类sgRNA的介导,
动物所有关miRNA在心肌保护中的作用研究取得新成果
miRNA为一类非编码的微小RNA,近年来有关miRNA在心脏中的功能的研究受到广泛关注。心肌缺血、心肌细胞能量代谢不足会导致心肌细胞凋亡的发生,进而发生心肌梗死。心肌梗死涉及复杂的分子机制,有报道显示,梗死的心肌组织与正常心肌组织相比较,miRNA表达谱存在差异,一些miRNA表
小鼠凋亡诱导因子酶联免疫试剂盒样品收集方法
样品收集:血清:全血样品于室温放置2小时或4℃过夜后于1000×g离心20分钟,取上清即可检测,收集血液的试管应为一次性的无热原,无内毒素试管。2. 血浆:抗凝剂推荐使用EDTA-Na2,样品采集后30分钟内于1000×g离心15分钟,取上清即可检测。避免使用溶血,高血脂样品。3. 组织匀浆:用预冷
地塞米松诱导少肌性肥胖小鼠模型的建立与评价
地塞米松诱导少肌性肥胖小鼠模型的建立与评价
小鼠肾炎模型诱导阳离子牛血清白蛋白(cBSA)
肾小球肾炎是指一系列由免疫应答介导的导致肾小球炎症。膜性肾病和膜性肾小球肾炎是人类肾病综合征常见的病因。膜性肾病的特征是由免疫复合物沿着基底膜与内皮细胞之间的间隙沉积,导致基底膜增厚激活补体。激活的炎症级联导致肾功能受损,包括蛋白尿和肾功能衰竭。有研究报道用大鼠膜性肾病模型(Heymann肾炎),研
利用CRISPR/Cas9技术构建基因敲除大鼠及小鼠模型
国际著名生物学期刊《Nature Biotechnology》(2012年影响因子为32.44)于8月8日在线正式发表了上海市调控生物学重点实验室、华东师范大学生科院生命医学研究所刘明耀教授和李大力副教授课题组的最新研究成果。这是继今年6月该课题组在《Nucleic Acids Rese
心肌细胞过氧化物酶体增殖物预防感染性心肌病
脓毒症被定义为对感染的全身炎症反应综合征(SIRS),是重症监护病房最常见的死亡原因。败血症病死率上升的主要原因是感染性休克。败血症不断损害心血管系统,心功能不全是感染性休克的主要原因。因此,迫切需要新的机制和有效的治疗方法来治疗脓毒症所致的心功能不全。 近日,来自首都医科大学的研究者们在
从小鼠到人类,胚胎模型的构建引起的伦理问题思考
·有些人认为胚胎从精卵结合之时起就具有完全道德地位,而有些人则认为胚胎仅是在发育过程中道德地位不断提高。·目前构建的胚胎模型还不是“真正”胚胎,而只是模拟胚胎发育的某些方面。只要不将人类胚胎模型植入子宫进行孕育,就不必担忧克隆问题。这些研究能够增进对人类发展和发育障碍的理解,有利于科技发展和人类生命
关于凋亡诱导因子的简介
凋亡诱导因子是2014年公布的放射医学与防护名词,一类存在于线粒体内外膜间隙的保守的黄素蛋白。具有双重功能,在细胞正常的生理状态下,作为线粒体氧化还原酶,能催化细胞色素c和烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD)之间的电子传递;当细胞受到凋亡的刺激时,具有引起细胞染色体凝聚及DNA片段化的作用。
Circulation│ckit-细胞对成体心肌细胞贡献的再评价
7月8日,国际学术期刊Circulation在线发表了中国科学院生物化学与细胞生物学研究所周斌研究组与中国医学科学院阜外医院心血管疾病国家重点实验室聂宇课题组的最新科研成果“Reassessment of c-Kit+ Cells for Cardiomyocyte Contribution i
Science医学:艾滋病研究里程碑,构建人源化小鼠模型
研制艾滋病疫苗的挑战之一就是缺乏准确反映人体对病毒的免疫反应以及病毒如何演变逃逸这一反应机制的动物模型。在7月18日的《科学转化医学》(Science Translational Medicine)杂志中,来自麻省普科医院理根研究所(MGH)、麻省理工学院和哈佛大学的研究人员报告称通过将
自身免疫药检员-BhIL17A小鼠构建EAE模型的实验流程
研究表明Th17细胞以及相关的IL17、IL22 、IL23 等细胞因子参与到多种自身免疫疾病发展过程中[1]。其中IL17家族细胞因子可以动员、募集及活化中性粒细胞,从而介导炎症反应的产生,并参与到自身免疫疾病的发病过程中(如图1)。所以针对于IL17靶点相关的抗自身免疫药物一直是研发的热点。目前
Cell:革命性基因工程新技术-利用CRISPR/CAS构建小鼠模型
怀特海德生物医学研究所(Whitehead Institute for Biomedical Research)的创始人 Rudolf Jaenisch,曾在1974年成功构建出第一只转基因小鼠,由此改变了遗传学的研究模式。 近日,Jaenisch 等科学家在《细胞》(Cell)杂
研究构建染色体融合小鼠模型、模拟染色体演化过程
9月21日,Cell Research在线发表了中国科学院分子细胞科学卓越创新中心(生物化学与细胞生物学研究所)李劲松研究组撰写的题为Creation of artificial karyotypes in mice reveals robustness of genome organizati
自身免疫药检员-BhIL17A小鼠构建EAE模型的实验流程
研究表明Th17细胞以及相关的IL17、IL22 、IL23 等细胞因子参与到多种自身免疫疾病发展过程中[1]。其中IL17家族细胞因子可以动员、募集及活化中性粒细胞,从而介导炎症反应的产生,并参与到自身免疫疾病的发病过程中(如图1)。所以针对于IL17靶点相关的抗自身免疫药物一直是研发的热点。
广州生物院在肿瘤免疫治疗小鼠模型构建研究中获进展
10月2日,中国科学院广州生物医药与健康研究院李鹏课题组在国际期刊mAbs上在线发表了新的动物模型研究成果“Establishment of peripheral blood mononuclear cell-derived humanized lung cancer mouse models
Circulation│ckit-细胞对成体心肌细胞贡献的再评价
7月8日,国际学术期刊Circulation在线发表了中国科学院生物化学与细胞生物学研究所周斌研究组与中国医学科学院阜外医院心血管疾病国家重点实验室聂宇课题组的最新科研成果“Reassessment of c-Kit+ Cells for Cardiomyocyte Contribution i
厦门大学EMBO分子医学解析孤儿受体
来自厦门大学生命科学学院,第四军医大学等处的研究人员发现一种孤儿受体:TR3能通过调控mTOR信号通路影响心肌细胞大小,结果导致心肌细胞肥大,这将有助于解析心肌肥大等心血管疾病的致病机理。 这一研究成果公布在EMBO Molecular Medicine杂志上,这是一份属于全球出版商约翰威
上海生科院揭示成体心内膜形成冠状动脉的潜能
1月26日,中国科学院上海生命科学研究院生物化学与细胞生物学研究所周斌研究组的研究成果,以Genetic fate mapping defines the vascular potential of endocardial cells in the adult heart为题,在线发表在Circ