4种常用蛋白浓度测定方法的比较
蛋白浓度测定方法有很多种,各种蛋白质含量测定的研究也屡见报道。每种方法都有其优点和局限性,在蛋白质样品中往往会含有一些化学试剂,有些化学试剂会干 扰蛋白浓度测定。因此,寻找合适的实验方法以避免干扰对蛋白浓度测定的准确性至关重要。基于Lowry法在测定PEG_IL_6样品时出现大量黄绿色沉 淀,尿素对BCA法测定蛋白浓度测定有严重干扰,影响结果准确性,我们试验了外两种方法,并进一步对方法进行了比较分析。1 材料Folin酚试剂、考马斯亮蓝G_250及4,4-二羧酸-2,2-二喹啉(BCA)均为Sigma公司产品;总蛋白(BSA)标准购自上海生物制品研究 所;变性液为大肠杆菌破碎后加入β一巯基乙醇处理的样品;其它试剂均为国产分析纯。2 方 法Lowry法操作参考文献。磺基水杨酸沉淀法操作参考 文献。Bradford法操作参考文献,为方便试验稍作改变,即取0~500 gg/mL的样品100 L加Bradford试剂2 mL,室温放置5......阅读全文
ELISA四大常用方法优缺点比较
ELISA是一种广泛应用在测定液体样本中的蛋白、抗体、或激素的免疫分析技术。酶联免疫吸附试验的标准程序,通常是把蛋白、抗体、或激素等(即抗原)直接或是以捕捉抗体(capture Ab)固定在固相载体上,再加入一级检测抗体(primarydetection Ab),形成一个抗原抗体的复合物。如果该抗体
BCA法测定蛋白质浓度
【目的】掌握BCA法测定蛋白质浓度的原理。【原理】BCA(bicinchonininc acid)与二价铜离子的硫酸铜等其他 试剂组成的 试剂 ,混合一起即成为苹果绿,即BCA工作试剂。在碱性条件下,BCA与蛋白质结合时,蛋白质将Cu2+ 还原为Cu+ ,一个Cu+ 螯合二个BCA分子,工作试剂由原
α淀粉酶测定方法的比较
α-淀粉酶(EC3.2.1.1)测定方法很多,尚难以标准化。碘淀粉比色法、因底物和产物不确定,线性差而不能满足准确性要求。最近IFCC批准了用亚乙基封闭的G7-pNP作底物的酶偶联法(EPS法)作为临时推荐方法,但该法需工具酶,延迟时间长,还不是最理想的参考方法。使用2-氯-4-硝基苯
几种COD测定方法的具体比较
化学需氧量(COD)测定方法已有多种,从经典的重铬酸盐法(GB11914-89),到各种快速法和 比色法,均得到较广泛的应用。现将各种测定方法作一比较列表1。表1
α淀粉酶测定方法的比较
α-淀粉酶(EC3.2.1.1)测定方法很多,尚难以标准化。碘淀粉比色法、因底物和产物不确定,线性差而不能满足准确性要求。最近IFCC批准了用亚乙基封闭的G7-pNP作底物的酶偶联法(EPS法)作为临时推荐方法,但该法需工具酶,延迟时间长,还不是最理想的参考方法。使用2-氯-4-硝基苯-麦牙
α淀粉酶测定方法的比较
α-淀粉酶(EC3.2.1.1)测定方法很多,尚难以标准化。碘淀粉比色法、因底物和产物不确定,线性差而不能满足准确性要求。最近IFCC批准了用亚乙基封闭的G7-pNP作底物的酶偶联法(EPS法)作为临时推荐方法,但该法需工具酶,延迟时间长,还不是最理想的参考方法。使用2-氯-4-硝基苯-麦牙三糖
水质-总氮的测定方法比较
总氮是水质检测的一个重要指标,但是测定过程复杂且容易引入误差。每种测定方法的水样预处理、消解以及测定方法皆有异同与优劣。目前国内主流的总氮检测方法仍然是碱性过硫酸钾消解紫外分光光度法,但是此种方法水样预处理时间较长,对实验过程中所用到的水和玻璃器皿的清洁程度要求也比较高,有着各方面的局限性,并不
α淀粉酶测定方法的比较
α-淀粉酶(EC3.2.1.1)测定方法很多,尚难以标准化。碘淀粉比色法、因底物和产物不确定,线性差而不能满足准确性要求。最近IFCC批准了用亚乙基封闭的G7-pNP作底物的酶偶联法(EPS法)作为临时推荐方法,但该法需工具酶,延迟时间长,还不是最理想的参考方法。使用2-氯-4-硝基苯-
每种蛋白质浓度测定方法的干扰因素都有哪些
每种蛋白质浓度测定方法的干扰因素:干扰因素有硫酸铵、Tris缓冲液和某些氨基酸等。在使用双缩脲试剂时候,必须注意,必须是先加0.1 g/mL氢氧化钠溶液,再加0.01 g/mL硫酸铜的水溶液。若先加入硫酸铜溶液,再加入氢氧化钠溶液,则无法充分制造碱性环境,此时硫酸铜会与氢氧化钠发生复分解反应,生成蓝
BNP的测定的常用方法
测定血浆BNP浓度可以为临床提供许多有用的信息,常用的方法主要有:放射免疫法(IRA)、免疫放射测量法(IRMA)、电化学发光法(ECLA)。IRA法测定批间及批内的变异系数(CV)分别为14.8%、9.9%;IRMA法不经提取血浆BNP直接测量,使用Shionoria BNP放免试剂盒测定,此测定
动物脂肪含量测定方法比较
EchoMRI体成分分析仪的ZL技术,使其在动物脂肪含量测定、体成分分析研究中优于DXA、CT、MRI、全身电导率发等传统方法。肥胖症发生率正逐年增加,并有加速提高的趋势。肥胖症长伴发糖尿病、脂肪肝、血脂紊乱、高血压、冠心病等多种慢性疾病,是严重影响人们健康和生活质量的疾病之一,已成为世界各国面临的
纸浆白度测定方法比较
白度是纸浆(尤其是漂白浆)的一个特性参数,也是制浆生产过程和实验室研究中必须考察的重要指标之一。因此,快速准确地测定纸浆白度将对控制和指导生产、探索新工艺等方面都非常重要。目前,国际国内测定纸浆白度的标准方法主要有TAPPIT218、T272, PAPTAC C5,ISO3688,GB/
血清白蛋白测定的常用试剂
1、0.5mol/L琥珀酸缓冲贮存液(PH4.0)溶解Na0H10g琥珀酸56g于800m1蒸馏水中,用1mol/L氢氧化钠调至pH4.1+0.05加水稀释至1000ml此液置4℃冰箱保存。 2、BCG已存液(10mol/L):溶解BCG(MW=720.22)1.80g于5m1Na0H中用蒸馏
常用的pH值测定方法
在实际生产中,为了快速方便地掌握进入废水处理场废水的pH值变化情况,最简单的方法是用pH试纸粗略测定。对于无色、无悬浮杂质的废水,还可以使用比色法。目前,我国测定水质pH值的标准方法是电位法(GB/T 6920-1986玻璃电极法),它通常不受颜色、浊度、胶体物质以及氧化剂、还原剂的影响,既
常用的挥发酚测定方法
由于挥发酚为一类化合物,而非单一化合物,因此,即使均以苯酚为标准,如果采用不同的分析方法,其结果也会存在差异。为使结果具有可比性,必须使用国家规定的统一方法,常用的挥发酚测定方法是HJ 503-2009 规定的4-氨基安替比林分光光度法和HJ 502-2009 规定的溴化容量法。4-氨基安替比林
血氨测定的常用方法
(1)直接显色测定法:在床旁取静脉血2ml,以钨酸沉淀蛋白后,用酚——次氯酸盐显色,参照标准计算氨含量。如严格掌握实验条件,本法分析结果能满足临床要求。(2)谷氨酸脱氢酶速率法:血浆中的氨在足量的α-酮戊二酸和NADPH存在时,经谷氨酸脱氢酶作用生成谷氨酸,并消耗NADPH,NADPH的下降速率与血
酶活力测定常用的方法
酶活力测定常用的方法有终点法和动力学方法两类。终点法测定完成一定量反应所需的时间,如α-淀粉酶的活力测定。因为碘对淀粉呈现蓝色反应,当淀粉溶液中加入淀粉酶后,碘的蓝色反应消失而呈现红棕色;碘对淀粉颜色反应消失的时间可表示淀粉酶活力的大小。碘对淀粉颜色反应消失花的时间越短,表示酶的活力越高。动力学方法
诊断幽门螺杆菌感染的五种常用方法比较
我们以快速脲酶试验、幽门螺杆菌(Hp)抗体试验、14C呼气试验、病理组织切片、培养5种方法对我院门诊、病房各种胃肠消化病患者做了检查,现总结如下。 一、材料与方法 1.临床资料:288例患者均为首次做胃镜检查者,检查前2周内未服用有可能杀死Hp的抗生素、铋剂等药物,年龄平均46(24
蛋白质浓度测定的检查过程
受试者静脉采血,及时分离血清后测定。绘制标准曲线:取96孔酶标板,加入试剂。试剂加完后,准确吸取20μl样品溶液于酶标孔中,加入BCA试剂200μl,轻摇,于37℃保温30-60min,冷却至室温后,以空白为对照,在酶标仪上590nm处比色,以牛血清白蛋白含量为横坐标,以吸光值为纵坐标,绘制标准
蛋白质浓度测定的注意事项
检查前禁忌:检查前一天不吃过于油腻、高蛋白食物,避免大量饮酒。血液中的酒精成分会直接影响检验结果。体检前一天的晚八时以后,应禁食。 检查时要求:抽血时应放松心情,避免因恐惧造成血管的收缩、增加采血的困难。测定中,蛋白-染料复合物会有少部分吸附于比色杯壁上,实验证明此复合物的吸附量是可以忽略的。
蛋白质浓度测定的临床意义
异常结果 1、 双缩脲法:双缩脲法是第一个用比色法测定蛋白质浓度的方法,硫铵不干扰显色, Cu2+与蛋白质的肽键,以及酪氨酸残基络合,形成紫蓝色络合物,此物在540nm波长处有最大吸收。双缩脲法常用于0.5g/L~10g/L含量的蛋白质溶液测定。 2、Lowry法:Cu+与蛋白质在碱性溶液中
水分测定常用什么方法
你问这个问题太好了,检测水分含水率方法非常多,我在这里主要介绍两种给你参考,卡尔费休法,冠亚水分测定仪,首先这两款水分测定仪各有千秋,卡尔费休法水分测定仪属于化学方法,需要很贵的化学试剂,冠亚水份仪是一种物理方法,仪器本身没有易耗品,买回去不会担心后期使用费用,放心使用即可下面我在告诉你这两款水分仪
考马斯亮兰法(Bradford法)测定蛋白浓度的操作方法
标准方法(1)取16支试管,1支作空白,3支留作未知样品,其余试管分为两组按表中顺序,分别加入样品、水和试剂,即用1.0mg/ml的标准蛋白质溶液给各试管分别加入:0、0.01、0.02、0.04、0.06、0.08、0.1ml,然后用无离子水补充到0.1ml。最后各试管中分别加入5.0ml考马斯亮
二氧化氯常用检测方法比较
常用的二氧化氯含量的检测方法有:间接碘量法、五步碘量法、紫外分光光度法。 一元二氧化氯片是由亚氯酸盐或氯酸盐为原料制成的二氧化氯发生剂。一元二氧化氯片入水后,其中的亚氯酸盐和氯酸盐不是全部转化成二氧化氯,而是以ClO2、Cl2、ClO2-、ClO3-四种形式共存。 1、间接碘量法 目
蛋白质的常用检测方法
蛋白质测定的方法有双缩脲法、凯氏定氮法、紫外吸收法、酚试剂法等。 蛋白质测定是指通过物理或化学方法对蛋白质含量进行测定。蛋白质是构成人体细胞和组织的重要成分, 人体正常值一般是60~80g/L。蛋白质测定是生物化学和分子生物学研究中最常用、最基本的分析方法之一。蛋白质测定在临床上应用广泛,部分疾病可
BCA法测定蛋白质浓度原理
BCA法测定蛋白质浓度原理:BCA与二价铜离子的硫酸铜等其他试剂组成的试剂混合一起即成为苹果绿,即 BCA 工作试剂。在碱性条件下,BCA 与蛋白质结合时,蛋白质将 Cu2+ 还原为 Cu+,工作试剂由原来的苹果绿色变为紫色复合物。562 nm 下其光吸收强度与蛋白质浓度成正比。BCA 蛋白浓度测定
BCA蛋白浓度测定试剂盒说明
BCA蛋白浓度测定试剂盒BCA Protein Assay Kit ● 试剂盒内容及保存: 产品名称 包装 贮存方式 BCA试剂A 100 ml RT BCA试剂B 3 ml RT
叶面积测定方法的综合比较
叶面积的测量已成为农业生产中的一个不可或缺的部分,叶面积指数的大小对植物生长发育乃至最终的产品质量都有着很大的影响。一个好的测量叶面积方法应该具备简单、方便、成本低等特点,而且每次测量值均高度地接近待测叶片的实际面积,即误差小且可重复性好。目前,叶面积的测量方法主要有叶面积仪法、网格法、打孔称重法、
叶面积测定方法的综合比较
叶面积的测量已成为农业生产中的一个不可或缺的部分,叶面积指数的大小对植物生长发育乃至最终的产品质量都有着很大的影响。一个好的测量叶面积方法应该具备简单、方便、成本低等特点,而且每次测量值均高度地接近待测叶片的实际面积,即误差小且可重复性好。目前,叶面积的测量方法主要有叶面积仪法、网格法、打孔称重法、
食品中还原糖测定方法的比较
“碳水化合物”俗称糖类,能为机体提供能量,是食品的主要成分之一,也是营养成分检测的重要指标。糖通常包括单糖、寡糖、多糖、淀粉,以及不能被人体消化吸收的纤维素等。其中,分子中含有游离醛基或酮基的糖具有还原性,称为还原糖。食品中常见的还原糖有葡萄糖、果糖、半乳糖、乳糖、麦芽糖等。测定还原糖的含量可大