临床酶学标准化的新途径
在临床上，测定血清或其他组织中一些酶的水平对很多疾病的诊断、预防及判定病情的进展具有重要意义。酶的测定可利用生化学的方法测定酶的催化活性和将酶作为蛋白用免疫方法测定酶的质量。测定酶的催化活性是最为常用方法，它具有迅速、灵敏、成本低等特点。是目前临床上测定酶水平广泛使用的常规方法。但这种方法也存在着不足，作者拟就临床酶学测定中存在的问题及目前国际上解决问题的途径结合我们的一些调查结果做一阐述。 一、 测定酶催化活性存在的问题 测定酶的催化活性虽然是临床上最常用的方法，但由于酶的催化活性不仅决定于酶的含量，还受多种因素的影响，如所用底物的性质及浓度、反应介质的PH、温度、离子强度、激活或抑制因子等，因此具有方法依赖性。这是测定酶的催化活性存在的主要问题所在。因此对同一酶项目存在多种参考范围，各实验室间的结果缺乏可比性，室间质评用样本的靶值难以确定，甚至有时会引起临床上的误诊。国内各临床实验室间测定，酶活性结果的差异较大，明显......阅读全文
生物酶学基础同工酶简介
概述 同工酶 （isozyme，isoenzyme）广义是指生物体内催化相同反应而分子结构不同的酶。按照国际生化联合会（IUB）所属生化命名委员会（CBN）的建议，则只把其中因编码基因不同而产生的多种分子结构的酶称为同工酶。最典型的同工酶是乳酸脱氢酶（LDH）同工酶，用电泳方法将LDH同工酶分离，
β葡萄糖苷酶的酶学性质
不同来源的β-葡萄糖苷酶在氨基酸序列、分子量、比活力、等电点、最适反应pH值、pH值稳定性范围、最适反应温度和热稳定性范围上均有很大差别（见表1）。3.1 β-葡萄糖苷酶的分子量大小β-葡萄糖苷酶由于其来源不同，它们的相对分子量也可能不同，而且它们的结构和组成也有很大差异。β-葡萄糖苷酶的相对分子量
血清酶学改变的病因
急性一氧化碳中毒(ACMP)导致低氧血症可造成脑、心脏、肝等系统的缺氧,不但引起心电图特异改变当肝细胞受损后，肝细胞通透性亢进时，ALT的漏出率为65%（AST仅为4%）。因此ALT测定反映肝细胞损伤的灵敏度较AST为高。,血清酶学变化也很明显。
简述脑脊液的酶学检查
正常人由于血脑屏障完整，脑脊液内酶浓度比血清内酶浓度低；当颅脑损伤，颅内肿瘤或脑缺氧时，血脑屏障破坏，细胞膜通透性也有改变，使脑脊液内酶量增加，且不受蛋白总量、糖含量及细胞数的影响；主要与脑细胞坏死程度和细胞膜的损害程度有关。常用的有谷草转氨酶、乳酸脱氢酶、磷酸已糖异构酶和溶菌酶等；其中，乳酸脱
血清酶学检查ALT测定
丙氨酸氨基转移酶（ALT），旧名谷氨酸丙酮酸转移酶（GPT）。ALT能催化谷氨酸和丙氨酸转变为α酮戊二酸和丙酮酸。该酶广泛存在于肝、心、脑、肾、肠等组织细胞内，以肝脏含量最高。肝内该酶活性较血清约高100倍，肝只要有1%肝细胞坏死，即使血清中ALT增加一倍。它是最敏感的肝功能检测指标之一。 赖
肠激酶的酶学特点
肠激酶在体内激活胰蛋白酶原转化为胰蛋白酶, 由于肠激酶的轻链结构在人、牛和猪中保守, 其识别序列Asp-Asp-Asp-Asp-Lys在脊椎动物中也有很强的保守性, 且几乎所有被定序的胰蛋白酶原都具有4个天冬酰胺相连的特征, 此序列在其他的天然蛋白质上又非常罕见, 而肠激酶的活性中心有1个特殊的阳离
肠激酶的酶学特点
肠激酶在体内激活胰蛋白酶原转化为胰蛋白酶, 由于肠激酶的轻链结构在人、牛和猪中保守, 其识别序列Asp-Asp-Asp-Asp-Lys在脊椎动物中也有很强的保守性, 且几乎所有被定序的胰蛋白酶原都具有4个天冬酰胺相连的特征, 此序列在其他的天然蛋白质上又非常罕见, 而肠激酶的活性中心有1个特殊的阳离
酶学的基本理论
酶是一种由活细胞产生的生物催化剂，其本质是蛋白质，在生物的新陈代谢中起着非常重要的作用，它参与生物体几乎所有的化学反应，使新陈代谢有序的进行下去，从而使生命得以延续。1、酶的分类:1961年，国际生物化学联合会把酶分为六大类：氧化还原酶类： AH2+B A+BH2(催化底物时进行了电子反应)转移酶类
生物酶学基础酶的生产和制备
酶的生产是指经过预先设计，并且通过人工控制而获得所需要的酶的过程。概括地说，酶的生产方法有提取法、发酵法和化学合成法三种。提取法是最早采用并且一直沿用至今的一种方法。提取法采用各种技术，直接从动植物或微生物的细胞或组织中将酶提取出来。提取法虽简单易行，但必须要有充足的原材料，这就使提取法的广泛应用受
生物酶学基础酸性蛋白酶简介
概 述：酒用酸性蛋白酶是采用现代生物技术生产的高科技产品。在酒精发酵过程中，添加适量的酒用酸性蛋白酶，能有效水解原料中的蛋白质、破坏原料颗粒间细胞壁的结构，利于糖化酶的作用，使原料中可利用的碳源增加，从而可提高原料出酒率；另一方面，蛋白酶的水解作用增加醪液中投a一氧基态氮的水平，促进酵母的生长与繁殖
生物酶学基础酶固定化技术工艺
关键在于选择适当的固定化方法和必要的载体以及稳定性研究、改进。 1 吸附法吸附法是利用物理吸附法，将酶固定在纤维素、琼脂糖等多糖类或多孔玻璃、离子交换树脂等载体上的固定方式。显著特点是：工艺简便及条件温和，包括无机、有机高分子材料，吸附过程可同时达到纯化和固定化；酶失活后可重新活化，载体也可再生。但
生物酶学基础脂肪酶的来源
脂肪酶广泛的存在于动植物和微生物中。植物中含脂肪酶较多的是油料作物的种子，如蓖麻籽、油菜籽，当油料种子发芽时，脂肪酶能与其他的酶协同发挥作用催化分解油脂类物质生成糖类，提供种子生根发芽所必需的养料和能量；动物体内含脂肪酶较多的是高等动物的胰脏和脂肪组织，在肠液中含有少量的脂肪酶，用于补充胰脂肪酶对脂
生物酶学基础－脂肪酶的性质
脂肪酶是一类具有多种催化能力的酶，可以催化三酰甘油酯及其他一些水不溶性酯类的水解、醇解、酯化、转酯化及酯类的逆向合成反应，除此之外还表现出其他一些酶的活性，如磷脂酶、溶血磷脂酶、胆固醇酯酶、酰肽水解酶活性等(Hara；Schmid)。脂肪酶不同活性的发挥依赖于反应体系的特点，如在油水界面促进酯水解，
微生物果胶酶的酶学性质
国内外科学家利用层析、电泳等手段对果胶酶的酶学性质进行了研究，明确了一些果胶酶的分子量、动力学性质及其影响因素。常用果胶酶纯化方法有：硫酸铵沉淀、丙酮沉淀、离子交换层析以及凝胶过滤色谱等。果胶酶分子量一般在20kD~60kD之间，单体存在，个别以多聚体形式存在，如海栖热袍菌果胶酸裂解酶分子量为115
生物酶学基础－－脂肪酶的生产
脂肪酶的制备方法有提取法、化学合成法和微生物发酵法。提取法资源有限、工艺复杂、产量低；化学合成法成本太高；微生物发酵法的应用前景要远远大于提取法和化学合成法，它不受环境影响，资源丰富，产酶周期短，产物较单纯且成本低，生产上易于管理。商品化脂肪酶主要来源于各种细菌、酵母和真菌等微生物的发酵，有些霉菌可
生物酶学基础高温α淀粉酶简介
耐高温α—淀粉酶（High thermostableα-amylase）概述：采用地衣芽孢杆菌（BacillusLicheniformis)，经发酵，提炼而成，本品具有很好的耐热性，广泛应用于淀粉加工，制糖，味精，酒精，啤酒，柠檬酸，纺织印染，造纸以及其它发酵工业等。本品具耐高温的特性，在高温下液化
葡萄糖氧化酶的酶学性质
高纯度GOD为淡黄色粉末，易溶于水，完全不溶于乙醚、氯仿、丁醇、吡啶、乙二醇和甲酰胺等有机溶剂，50%丙酮、66%甲醇都能使其沉淀，可以被弱酸性的离子交换树脂及氧化铝等吸附。GOD 最大光吸收波长为377 和455 nm，在pH 为2.2~8.4，温度为20~70 ℃均可起催化作用，其适宜温度为30
基于“实验设计”的临床酶学参考方法测量不确定度评定...
基于“实验设计”的临床酶学参考方法测量不确定度评定模型的建立（2）3 示例3.1 GGT参考方法测量程序3.2 GGT催化活性参考方法测量主要影响因素 临床酶学参考方法测量影响因素在行业已基本达成共识（见图1）。根据QUAM理论，将这些因素与实验室制定的GGT参考方法测量程序综合分析
基于“实验设计”的临床酶学参考方法测量不确定度评定。。。
基于“实验设计”的临床酶学参考方法测量不确定度评定模型的建立（1）摘要 目的 以血清GGT催化活性参考方法测量不确定度评定为例，建立临床酶学催化活性测量参考方法的不确定度评定模型。方法 依据GGT参考方法测量流程，以GGT催化活性浓度为核心评价指标，确立影响GGT催化活性浓度测量的主要因素。
国际参考实验室临床酶学室间质量评价(RELA)技术方案
作者：陈宝荣,邵燕,陈琦,孙慧颖,胡滨 作者单位：北京航天总医院,北京 100076【摘要】 目的：建立并评价国际参考实验室室间质量评价(RELA)技术方案，使之符合国际参考实验室质量要求。方法：以GGT为例，按IFCC要求建立本室的RELA技术方案，对影响检测质量的关键技术环节建立相应
生物酶学基础纤维素酶简介
纤维素酶是一种对纤维素纤维大分子的水解有特殊催化作用的活性蛋白质，纤维素酶的种类很多，由于Lyocell纤维织物的特殊结构和性能，并不是所有的纤维素酶都能去除Lyocell的原纤维，目前国内开发的用于Lyocell纤维酶处理的酶制剂大多为酸性纤维素酶。由于使用的酶不同，加工时需要pH值和温度也不同。
生物酶学基础－固定化酶及应用介绍
1．由于酶的分离与提纯有许多技术性难题，造成酶制剂来源有限、成本高、不利于大规模使用。因此，酶在大规模生产中，使酶能反复使用，是很有经济价值的课题。固定化酶的使用，推动了酶在生产上的应用。固定化酶，就是将酶分子结合在特定的支持物上且不影响酶的功能。用于固定酶的底物有琼脂糖、丙烯酰胺、藻酸钠等。固定化
生物酶学基础酶的提取和分离纯化
许多酶都存在于细胞内。为了提取这些胞内酶，首先需要对细胞进行破碎处理。细胞破碎的方法很多，主要包括机械破碎法、物理破碎法、化学破碎法和酶学破碎法等。机械破碎法是指利用捣碎机、研磨器或匀浆器等将细胞破碎开来。物理破碎法是指利用温度差、压力差或超声波等将细胞破碎开来。化学破碎法是指利用甲醛、丙酮等有机溶
关于溶葡萄球菌酶的酶学性质介绍
溶葡萄球菌酶具有多个催化活性中心，其中内切肽酶、糖苷酶和酰胺酶3个活性域与水解细菌胞壁肽聚糖交联结构的催化活性有关以内切肽酶活性最为重要。除作用于细菌胞壁外，溶葡萄球菌酶还具有结合并降解弹性蛋白质（elastin）的作用，弹性蛋白质的氨基酸序列中约1／3为gly，但溶葡萄球菌酶降解弹性蛋白质的特
生物酶学基础固定化酶载体的性质
载体树脂的性质强烈影响着固定化酶的催化性能，对于一个特定的酶催化反应，以下载体树脂的性质参数需要被严格选择和平衡。 功能基团树脂功能基团的活化类型、表观结构、分散度以及密度决定酶固定化效率、固定化酶活性和机械稳定性。创科生物科技有限公司提供各种不同功能团的树脂载体。 孔径和表面积通常情况下，大的载体
简述葡糖氧化酶的结构和酶学性质
1、葡糖氧化酶的结构： GOD是同型二聚体分子，含有2个黄素腺嘌呤二核苷酸（ FAD）结合位点。每个单体含有2个完全不同的区域：一个与部分FAD非共价但紧密结合，主要为β折叠；另一个与底物β-D-葡萄糖结合，由4个α-螺旋支撑1个反平行的β折叠。 2、葡糖氧化酶的酶学性质： 高纯度GOD
生物酶学基础中温α—淀粉酶简介
概 述：BAA中温液体α—淀粉酶系引进美国九十年代先进技术，系采用属枯草牙孢杆菌(Bacillus Subtilis) 经深层发酵，精炼而成的产品。它在耐热稳定性，对钙离子的依赖性及液化速度等方面性能均比国内同类产品BF7658优越。本产品广泛应用于饴糖，啤酒，黄 酒，葡萄糖，味精，抗生素等行业，也
生物酶学基础酶的固定化方法介绍
酶的固定化方法不下百种，归纳起来大致可以分为三类，即载体结合法、交联法和包埋。载体结合法是指将酶固定到非水溶性载体上的方法。根据固定方式的不同，这种方法又可以分为物理吸附法、离子结合法和共价结合法。物理吸附法是指将酶吸附到固体吸附剂表面的方法，固体吸附剂多为活性碳、多孔玻璃等。离子结合法是指通过离子
酶学标准曲线的制作实验
实验方法原理L－丙氨酸＋α－酮戊二酸ALT丙酮酸＋L－谷氨酸丙酮酸＋NADH＋H＋→L－乳酸＋NAD+实验步骤一、实验试剂仪器：ALT／GPT试剂 待测标准物 半自动生化分析仪 试管 加样器二、实验操作：1. 稀释试剂．2. 开机预温达37度．3. 选取测定程序．4. 测试：三. 实验结果：把测得数
酶学标准曲线的制作实验
实验方法原理L－丙氨酸＋α－酮戊二酸ALT丙酮酸＋L－谷氨酸丙酮酸＋NADH＋H＋→L－乳酸＋NAD+实验步骤一、实验试剂仪器：ALT／GPT试剂 待测标准物 半自动生化分析仪 试管 加样器二、实验操作：1. 稀释试剂．2. 开机预温达37度．3. 选取测定程序．4. 测试：三. 实验结果：把测得数