异源表达经验谈（3）
4. 菌种的保存、退化一般来说是加甘油20%左右，-70保存；或制成干粉保存。但是在做甲醇酵母时发现了个问题，就是重组工程菌的退化现象比较严重，一般都是学生做得好好的，但是毕业以后下面的师弟一接手，蛋白就不表达了，或表达量非常的低。连续好几个师兄的结果都是如此，很是奇怪。我猜测可能是由于整合入基因组，毕竟是个外源的基因，不知整合到了染色体的什么部分，会不会过段时间就给“踢”下来，或就沉寂了？E.coli在复苏时都有抗性压着，酵母好像没有太合适的（不知pPICZ系列的那个抗生素好用不好用，但毕竟好贵）。我有个想法，是否也应像公司在做工程细胞时那样，挑个几十上百个，一起传代，10几代后仍然稳定表达的才说明基因整合到了合适的部位，不会再下来了？但是毕竟做研究生没那么多时间来干这个，否则万一不行毕业就困难了。有没有其他解决方法呢？盼高手。 5. 拷贝数对表达量的影响对于“游离”的质粒，比如E.coli的BL21表达时，质粒的拷......阅读全文
异源表达经验谈（3）
4. 菌种的保存、退化一般来说是加甘油20%左右，-70保存；或制成干粉保存。但是在做甲醇酵母时发现了个问题，就是重组工程菌的退化现象比较严重，一般都是学生做得好好的，但是毕业以后下面的师弟一接手，蛋白就不表达了，或表达量非常的低。连续好几个师兄的结果都是如此，很是奇怪。我猜测可能是由于整合入基因组
异源表达经验谈（2）
2. 转化子、表达子的筛选转化子的筛选，由于许多质粒是穿梭质粒，因此大多具有E.coli中的抗性筛选标记，筛选起来是很方便的（当然，我不清楚细胞方面的筛选，一般使用病毒载体吧，希望高手们介绍一下）。但是转化成功的并不意味着能够成功表达目的蛋白了，因此还需要“表达子”的筛选，尤其是整合入基因组的片断（
异源表达经验谈（1）
异源蛋白的表达是个很复杂的问题，有许许多多的影响因素，而且由于蛋白本身千差万别，很难有一个很完善或很标准的流程方法。另外，表达的宿主也是多种多样，目前比较常用的包括E.coli，酵母（以甲醇酵母居多），昆虫细胞，哺乳动物细胞等，各自有着其本身的特点，优缺点各异。1. 宿主的选择。表达宿主虽众多，但比
异源蛋白表达的基本介绍
随着人类基因组计划的完成，蛋白表达技术已渗透到生命科学研究的各个领域。越来越多的基因被发现，其中多数基因功能不明，利用蛋白表达系统表达目的基因是研究基因功能及其相互作用的重要手段。根据不同的表达要求，如表达量高低、目标蛋白的活性和表达产物的纯化方法，可选用适当的表达系统及相应的表达策略。
异源蛋白表达的处理和修饰
真核mRNA在离开细胞核进而在胞浆的核糖体上被翻译前需要特异的处理和修饰。这些过程包括去除内含子、5'端甲基化帽子形成和3'端加poly-A。内含子去除需要5'剪切位点、G75/G100U100A65AG65U保守序列、3'剪切位点、富含密啶NC66A100G10
关于异源蛋白表达的分类介绍
蛋白表达是现代工业、医疗和基础研究领域的重要组成部分，也是当前生物技术的难点和热点，重组蛋白表达的系统主要分为： 1、原核蛋白表达系统 以大肠杆菌表达系统为代表，具有遗传背景清楚、成本低、表达量高和表达产物分离纯化相对简单等优点，缺点主要是蛋白质翻译后缺乏加工机制，如二硫键的形成、蛋白糖基化
酵母表达外源蛋白（foreign－protein）（3）
12、蛋白降解分泌表达的目标蛋白比胞内蛋白确实容易被降解。可以尝试以下几种办法：1、尽可能降低培养液的pH值减少酶活，酵母生长pH值比较广，4～7都可以试一下；2、多试几种蛋白添加剂，充当酶解底物（比如酵母酸）；3、摸索最适下罐（摇瓶也一样），宁可少表达点也别给降解光了。实在没办法，只好换菌株或做p
密码子的应用提高基因的异源表达
可通过分析密码子使用模式，预测目的基因的最佳宿主；或者应用基因工程手段，为目的基因表达提供最优的密码子使用模式。3种不同的方式，目的都是利用密码子偏爱性来提高异源基因的表达。
异源蛋白表达的密码子偏爱性介绍
原核细胞表达真核基因的cDNA时，会涉及到密码子的偏爱性，真核细胞在表达原核来源的基因、真核基因的cDNA拷贝或其他无内含子的基因时可能表现很多特异问题。富含AT的基因在很多真核细胞中表达时会遭遇很剧烈的障碍。主要的真核信号序列如 加poly-A的位点、酵母转录终止位点和真核mRNA去稳定序列都
简述密码子提高基因的异源表达的作用
可通过分析密码子使用模式，预测目的基因的最佳宿主；或者应用基因工程手段，为目的基因表达提供最优的密码子使用模式。3种不同的方式，目的都是利用密码子偏爱性来提高异源基因的表达。
异源异倍体的概念
中文名称异源异倍体英文名称alloheteroploid定 义染色体来自不同染色体组的异倍体。应用学科遗传学（一级学科），细胞遗传学（二级学科）
异源异倍性的概念
中文名称异源异倍性英文名称alloheteroploidy定 义由非同源染色体形成的异倍性。应用学科细胞生物学（一级学科），细胞遗传（二级学科）
DNA重组（DNA－recombination）技术：外源基因的蛋白表达3
（6）遗传标记： 从成千上万个哺乳细胞中，检测出极少数的含DNA重组体的转染细胞，并鉴定已导入外源DNA是哺乳动物细胞基因表达系统的一个关键内容。因此，在真核生物表达载体上必须附有标记基因，才能进行筛选。常用的标记基因有：胸苷激酶基因（thymidine kinase，TK）、二氢叶酸还原酶
异源基因的概念
中文名称异源基因英文名称heterologous gene定 义来自不同物种的、在进化过程中不源于共同祖先的基因。应用学科生物化学与分子生物学（一级学科），核酸与基因（二级学科）
原核生物大肠杆菌异源表达一定要切除信号肽吗
一般要进行切除。假如你将那个来自原核的酶（包括信号肽序列）插入表达载体后，表达产物的信号肽也很难将酶分泌出来，这里涉及到的问题很多，首先能否可溶性表达，其次信号肽能否在宿主菌中能起作用（不同种类的细菌，信号肽有差异），信号肽能否被信号肽酶切除，很多情况下信号肽即使能起作用，一般也只能将表达产物分泌至
外源基因的诱导表达
1．目的了解外源基因在原核细胞中表达的特点和方法。2．原理外源基因克隆在含有lac启动子的表达系统中。先让宿主菌生长，lac I产生的阻遏蛋白与lac操纵基因结合抑制下游的外源基因转录。向培养基中加入诱导物IPTG（异丙基硫代-b-D-半乳糖），解除抑制使外源基因大量表达。表达的蛋白可经SDS-
异源多元单倍体的概念
中文名称异源多元单倍体英文名称allopolyhaploid定 义细胞染色体来自异源多倍体的不同染色体组的一类多元单倍体。应用学科遗传学（一级学科），细胞遗传学（二级学科）
什么是异源诱导者？
能诱导原肠胚外胚层形成一定的结构，并具有区域性诱导效应的组织称为异源诱导者（heterogeneous inductor）。它们虽不是组织者，却具有与组织者相当的形态发生效应，而且无种的特异性。它们包括许多成体和幼体的多种组织，广泛存在于动物界，甚至某些有机和无机化合物。最初发现成体组织对两栖类原肠
异源翻译系统的定义
中文名称异源翻译系统英文名称heterologous translational system定 义将基因或信使核糖核酸(mRNA)转移到非自身的宿主表达系统中进行蛋白质的翻译合成，该宿主表达系统即为异源翻译系统。应用学科生物化学与分子生物学（一级学科），方法与技术（二级学科）
细胞化学词汇异源基因
中文名称：异源基因英文名称：heterologous gene定 义：来自不同物种的、在进化过程中不源于共同祖先的基因。应用学科：生物化学与分子生物学（一级学科），核酸与基因（二级学科）
异源倍性的概念
中文名称异源倍性英文名称alloploidy定 义由非同源染色体形成的倍性变化。应用学科遗传学（一级学科），细胞遗传学（二级学科）
异源倍性的概念
中文名称异源倍性英文名称alloploidy定 义由非同源染色体形成的倍性变化。应用学科遗传学（一级学科），细胞遗传学（二级学科）
异源抗血清的定义
中文名称异源抗血清英文名称heterologous antiserum定 义来源于异种动物(如马对人)，含特异性抗体的血清。应用学科免疫学（一级学科），免疫病理、临床免疫（二级学科），感染免疫（三级学科）
异源抗血清的定义
中文名称异源抗血清英文名称heterologous antiserum定 义来源于异种动物(如马对人)，含特异性抗体的血清。应用学科免疫学（一级学科），免疫病理、临床免疫（二级学科），感染免疫（三级学科）
异源倍性的概念
中文名称异源倍性英文名称alloploidy定 义由非同源染色体形成的倍性变化。应用学科遗传学（一级学科），细胞遗传学（二级学科）
异源双链的概念
中文名称异源双链英文名称heteroduplex定 义(1)两种不同来源的单链DNA分子杂交而成的DNA双链，是碱基没有完全互补的DNA双链。(2)DNA与RNA杂交形成的双链。应用学科生物化学与分子生物学（一级学科），方法与技术（二级学科）
异源多倍性的概念
异源多倍性(allopolyploidy)指不同种的染色体组组合在一起而产生的染色体倍数的变异（H．Kihara，T．Ono，1926）。根据组成核型的染色体组的数目又可分别称为异源三倍体、异源四倍体、异源…倍体等（allotriploid，allote- traploid，sllo…ploid），
异源双链作图的定义
中文名称异源双链作图英文名称heteroduplex mapping定 义不同来源的双链DNA分子的单链间进行杂交，绘制出同源区和非同源区的遗传图。应用学科遗传学（一级学科），基因组学（二级学科）
异源载体疫苗的基本介绍
中文名称异源载体疫苗英文名称heterologous carrier vaccine定 义一种新型疫苗。即将疫苗附着在大分子载体上，以增强其免疫原性。所用载体一般是具有免疫原性的大分子蛋白质或减毒的活病毒、细菌。应用学科免疫学（一级学科），应用免疫（二级学科），免疫预防（三级学科）
异源载体疫苗的功能特点
中文名称异源载体疫苗英文名称heterologous carrier vaccine定 义一种新型疫苗。即将疫苗附着在大分子载体上，以增强其免疫原性。所用载体一般是具有免疫原性的大分子蛋白质或减毒的活病毒、细菌。应用学科免疫学（一级学科），应用免疫（二级学科），免疫预防（三级学科）