实现蛋白marker与AnnexinV双染的同时检测的实验方法
要用AnnexinV双染法测凋亡，又想同时标记蛋白marker，甚至还有胞内指标，可是PI和7-AAD都不能洗，怎么办？ eBioscience的可固定细胞活力染料Fixable Viability Dye帮您完美解决固定、破膜以及洗涤步骤不影响Fixable Viability Dye的染色，而PI、7-AAD的染色通常是放在其他抗体孵育完成后进行，不能洗涤即要上机检测；对于胞内抗体的染色，由于经过了固定步骤，经过PI或7-AAD染色后所有的细胞都是阳性，所以他们只适合于胞膜染色的死活细胞鉴定 实验试剂◎ Annexin V Apoptosis Detection kit (Cat. No. 88-8007, 88-8006, 88-8005, 88-8102, or 88-8008) ◎ 10X Binding buffer ◎ Annexin conjugated to APC, eFluor 450, FITC, P......阅读全文
实现蛋白marker与Annexin－V双染的同时检测的实验方法
要用AnnexinV双染法测凋亡，又想同时标记蛋白marker，甚至还有胞内指标，可是PI和7-AAD都不能洗，怎么办？ eBioscience的可固定细胞活力染料Fixable Viability Dye帮您完美解决固定、破膜以及洗涤步骤不影响Fixable Viability Dye的染色，
Annexin－VPI双染法
Annexin V-PI 双染法在细胞凋亡的早期就有细胞膜表面破损发生。破损时凋亡细胞表面的磷脂腺丝氨酸(PS)可以从细胞内膜翻转至细胞的外膜。该过程发生在DNA片段化之前，因而检测PS的表达，能反映早期凋亡。AnnexinV是相对分子质量为35 000大小的Ca2+依赖的磷脂结合蛋白，对PS有很高
浅谈预染蛋白Marker与未预染蛋白Marker
在Western实验中，蛋白Marker可以监控蛋白质在SDS-PAGE中的迁移，监控蛋白的转膜效率，确定蛋白分子量大小。选择正确的蛋白Marker是western blot实验成功的必备条件之一。蛋白Marker分为两种：一种是未预染的Marker，即宽分子量蛋白标准，高分子量蛋白标准及低分子量蛋
细胞凋亡检测实验——AnnexinVFITC－单染法
实验方法原理细胞凋亡或称程序性细胞死亡（Programmed Cell Death ,PCD）是细胞的生命现象之一，它在机体的胚胎发育、组织修复及自身反应性T淋巴细胞的清除等方面起着十分重要的作用。细胞凋亡调节的失控可导致临床各种疾病的发生。如老年性痴呆与神经细胞凋亡过度有关，自身免疫性疾病和肿瘤与
细胞凋亡检测实验——Annexin－V/PI双染色法
实验方法原理细胞凋亡早期改变发生在细胞膜表面，目前早期识别仍有困难。这些细胞膜表面的改变之一是磷脂酰丝氨酸（PS）从细胞膜内转移到细胞膜外，使PS暴露在细胞膜外表面。PS是一种带负电荷的磷脂，正常主要存在于细胞膜的内面，在细胞发生凋亡时细胞膜上的这种磷脂分布的不对称性被破坏而使PS暴露在细胞膜外。A
细胞凋亡检测(AnnexinVFITC－单染法)1
一、实验原理细胞凋亡或称程序性细胞死亡（Programmed Cell Death ,PCD）是细胞的生命现象之一，它在机体的胚胎发育、组织修复及自身反应性T淋巴细胞的清除等方面起着十分重要的作用。细胞凋亡调节的失控可导致临床各种疾病的发生。如老年性痴呆与神经细胞凋亡过度有关，自身免疫性疾病和肿
细胞凋亡检测(AnnexinVFITC－单染法)2
2 荧光显微镜和共聚焦激光扫描显微镜一般以细胞核染色质的形态学改变为指标来评判细胞凋亡的进展情况。常用的DNA 特异性染料有：HO 33342 (Hoechst 33342)，HO 33258 (Hoechst 33258), DAPI。三种染料与 DNA 的结合是非嵌入式的，主要结合在DNA 的A
实验过程中Annexin－V染不上色或阳性率偏低问题
• 确定实验中的诱导剂是否能产生凋亡。可通过设定确切凋亡诱导效果的阳性药物对照来排除这一情况。 • 贴壁细胞消化不当。Annexin V 跟PS 的结合需要Ca2+离子，结合液中含有Ca2+，EDTA 的消化会影响染色，建议使用无EDTA 的胰酶，或者消化后用PBS洗涤干净。 • 细胞离心用冷PB
流式细胞仪检测细胞凋亡实验Annexin－V/PI双染色法
实验方法原理细胞凋亡早期改变发生在细胞膜表面，目前早期识别仍有困难。这些细胞膜表面的改变之一是磷脂酰丝氨酸（PS）从细胞膜内转移到细胞膜外，使PS暴露在细胞膜外表面。PS是一种带负电荷的磷脂，正常主要存在于细胞膜的内面，在细胞发生凋亡时细胞膜上的这种磷脂分布的不对称性被破坏而使PS暴露在细胞膜外。A
流式细胞仪检测细胞凋亡实验——Annexin－V/PI双染色法
流式细胞仪检测细胞凋亡可应用于：（1）鉴定细胞凋亡形态；（2）准确的进行凋亡细胞的计数；（3）进行特异的定性分析和定量分析。实验方法原理细胞凋亡早期改变发生在细胞膜表面，目前早期识别仍有困难。这些细胞膜表面的改变之一是磷脂酰丝氨酸（PS）从细胞膜内转移到细胞膜外，使PS暴露在细胞膜外表面。PS是一种
细胞凋亡的检测—早期－磷脂结合蛋白AnnexinV/PI法
实验方法原理实验步骤展开
Annexin－V－与细胞凋亡的不解之缘
细胞凋亡(Apoptosis)或程序性细胞死亡(Programmed Cell Death)是指细胞为了清除自身不需要的和失去功能细胞的一种高级调控过程。凋亡可以发生在细胞生长、衰老、免疫反应或者当细胞受到疾病和毒害因素的破坏，例如放射性药物和化学化疗等的过程中。凋亡细胞会产生诸多重要改变，包括细胞
关于Annexin－V/－PI－法检测细胞凋亡的介绍
1992 年Fadok 报道在APO 早期位于细胞膜内侧的磷脂酰丝氨酸(phosphatidylserin ,PS) 迁移至细胞外侧,这一现象出现在核染色质变性与核体积缩小之前。AnnexinV 是一种具有很强的抗凝血特性的血管蛋白,和磷脂有高亲合力,尤其与带负电荷的磷脂如PS 具极强的结合力,
检测细胞膜成分变化的Annexin－V联合PI法
1、原理：在细胞凋亡早期位于细胞膜内侧的磷脂酰丝氨酸（PS）迁移至细胞膜外测。磷脂结合蛋白V（Annexin V）是钙依赖性的磷脂结合蛋白，它于PS具有高度的结合力。因此，Annexin V可以作为探针检测暴露在细胞外测的磷脂酰丝氨酸。故利用对PS有高度亲和力的Annexin V，将Annexi
细胞凋亡检测
实验概要细胞凋亡是细胞生物学研究的重要领域。检测药物或某种处理对于细胞细胞的影响时，细胞凋亡检测是一个重要检测指标。以Annexin V联合PI法为例简述细胞凋亡检测。实验原理在细胞凋亡早期，位于细胞膜内侧的磷脂酰丝氨酸（Phosphatidylserine，PS）迁移至细胞膜外侧。磷脂结合蛋白V（
流式细胞仪检测细胞凋亡方法(Annexin－V－法)
实验原理 Annexin V是检测细胞凋亡的灵敏指标之一。它是一种磷脂结合蛋白，可以与早期凋亡细胞的胞膜结合，而细胞质膜的改变是细胞发生凋亡时最早的改变之一。在细胞发生凋亡时，膜磷脂酰丝氨酸(PS)由质膜内侧翻向外侧。Annexin V与磷脂酰丝氨酸有高度亲和力，因而与细胞外侧暴露的磷脂酰丝氨酸结合
流式细胞仪检测细胞凋亡方法（Annexin－V－法）
实验原理Annexin V是检测细胞凋亡的灵敏指标之一。它是一种磷脂结合蛋白，可以与早期凋亡细胞的胞膜结合，而细胞质膜的改变是细胞发生凋亡时早的改变之一。在细胞发生凋亡时，膜磷脂酰丝氨酸(PS)由质膜内侧翻向外侧。Annexin V与磷脂酰丝氨酸有高度亲和力，因而与细胞外侧暴露的磷脂酰丝氨酸结合。由
流式细胞仪检测细胞凋亡方法(Annexin－V－法)
实验概要Annexin V是一种检测细胞凋亡的试剂，本实验介绍了一个用流式细胞仪检测细胞凋亡的方法(Annexin V 法)。实验原理Annexin V是检测细胞凋亡的灵敏指标之一。它是一种磷脂结合蛋白，可以与早期凋亡细胞的胞膜结合，而细胞质膜的改变是细胞发生凋亡时最早的改变之一。在细胞发生凋亡
流式细胞仪检测细胞凋亡——Annexin－V/PI双染色法
基本原理细胞凋亡早期改变发生在细胞膜表面，目前早期识别仍有困难。这些细胞膜表面的改变之一是磷脂酰丝氨酸（PS）从细胞膜内转移到细胞膜外，使PS暴露在细胞膜外表面。PS是一种带负电荷的磷脂，正常主要存在于细胞膜的内面，在细胞发生凋亡时细胞膜上的这种磷脂分布的不对称性被破坏而使PS暴露在细胞膜外。Ann
流式细胞仪检测细胞凋亡――Annexin－V/PI双染色法
基本原理细胞凋亡早期改变发生在细胞膜表面，目前早期识别仍有困难。这些细胞膜表面的改变之一是磷脂酰丝氨酸（PS）从细胞膜内转移到细胞膜外，使PS暴露在细胞膜外表面。PS是一种带负电荷的磷脂，正常主要存在于细胞膜的内面，在细胞发生凋亡时细胞膜上的这种磷脂分布的不对称性被破坏而使PS暴露在细胞膜外。Ann
流式细胞仪检测细胞凋亡：Annexin－V/PI双染色法
一、基本原理细胞凋亡早期改变发生在细胞膜表面，目前早期识别仍有困难。这些细胞膜表面的改变之一是磷脂酰丝氨酸（PS）从细胞膜内转移到细胞膜外，使PS暴露在细胞膜外表面。PS是一种带负电荷的磷脂，正常主要存在于细胞膜的内面，在细胞发生凋亡时细胞膜上的这种磷脂分布的不对称性被破坏而使PS暴露在细胞膜外。A
流式细胞仪检测细胞凋亡——Annexin－V/PI双染色法
基本原理细胞凋亡早期改变发生在细胞膜表面，目前早期识别仍有困难。这些细胞膜表面的改变之一是磷脂酰丝氨酸（PS）从细胞膜内转移到细胞膜外，使PS暴露在细胞膜外表面。PS是一种带负电荷的磷脂，正常主要存在于细胞膜的内面，在细胞发生凋亡时细胞膜上的这种磷脂分布的不对称性被破坏而使PS暴露在细胞膜外。Ann
细胞凋亡检测实验——磷脂酰丝氨酸外翻分析（Annexin－V法）
实验方法原理磷脂酰丝氨酸（Phosphatidylserine, PS）正常位于细胞膜的内侧，但在细胞凋亡的早期，PS可从细胞膜的内侧翻转到细胞膜的表面，暴露在细胞外环境中(图3)。Annexin-V是一种分子量为35~36 KD的Ca2+依赖性磷脂结合蛋白，能与PS高亲和力特异性结合。将Annex
Annexin－V－检测凋亡细胞膜的改变操作流程
一、Annexin V 检测凋亡细胞膜的改变试剂及溶液：A 对于单独购买的试剂： a) 10X Binding Buffer （货号：556454） b) Propidium Iodide（PI，货号：556463）：建议与以下试剂同时使用 Annexin V-FITC（货号： 556420
关于细胞凋亡检测—Annexin－V/－PI－法的基本介绍
1992 年Fadok 报道在APO 早期位于细胞膜内侧的磷脂酰丝氨酸(phosphatidylserin ,PS) 迁移至细胞外侧,这一现象出现在核染色质变性与核体积缩小之前。AnnexinV 是一种具有很强的抗凝血特性的血管蛋白,和磷脂有高亲合力,尤其与带负电荷的磷脂如PS 具极强的结合力,
细胞凋亡的检测方法综述5
4、检测细胞膜成分变化的Annexin V 联合PI法原理：磷脂酰丝氨酸（Phosphatidylserine， PS）正常位于细胞膜的内侧，但在细胞凋亡的早期，PS可从细胞膜的内侧翻转到细胞膜的表面，暴露在细胞外环境中（图3）。Annexin-V是一种分子量为35~36KD的Ca2+依赖性磷脂
三种流式方法检测细胞凋亡
一、检测原理细胞发生凋亡时，其细胞膜的通透性也增加，但其程度介于正常细胞和坏死细胞之间。利用这一特点，被检测细胞悬液用荧光素染色，利用流式细胞仪测量细胞悬液中荧光强度来区分正常细胞、坏死细胞和凋亡细胞。流式细胞仪检测有下列特点1、检测的细胞数量大，因此其反映群体细胞的凋亡状态比较准确2、可用许多相关
细胞凋亡的三种流式检测方法
一、检测原理细胞发生凋亡时，其细胞膜的通透性也增加，但其程度介于正常细胞和坏死细胞之间。利用这一特点，被检测细胞悬液用荧光素染色，利用流式细胞仪测量细胞悬液中荧光强度来区分正常细胞、坏死细胞和凋亡细胞。流式细胞仪检测有下列特点：1、检测的细胞数量大，因此其反映群体细胞的凋亡状态比较准确2、可用许多相
蛋白marker是什么？蛋白marker的分类
在Western Blot过程中，分子量Marker就像个螺丝钉一样没虽然是个小细节，然而就是这样一个小细节对实验结果有着不可忽视的作用。这个 Western Blot参照家族的一员的作用主要是用来指示蛋白条带所对应的分子量大小，只有标准量精-确无误了，实验结果才有说服力，除此之外，蛋白标准还有表示
流式细胞仪定量分析细胞凋亡
流式细胞仪定量分析，细胞凋亡检测原理细胞发生凋亡时，其细胞膜的通透性也增加，但是其程度介于正常细胞与坏死细胞之间。利用这一特点，被检测细胞悬液用荧光素染色，利用流式细胞仪测量细胞悬液中细胞荧光强度来区分正常细胞、坏死细胞核凋亡细胞。流式细胞仪定量分析细胞凋亡，应用价值流式细胞仪检测具有以下特点：1）