HLA配型与骨髓移植

一、 骨髓移植概述骨髓移植(bone marrow transplantation ,BMT)的实质是造血干细胞移植,干细胞具有能复制并分化为造血和免疫活性细胞的能力。根据干细胞的来源不同可分为自体、同基因(syngeneic)和异基因(allogeneic)BMT。同基因骨髓移植是指同卵孪生同胞间的移植,由于供、受者在遗传学上相同,故与自体骨髓移植一样,不存在免疫不相容的问题。异基因的骨髓移植(allo-BMT)的供髓细胞在遗传上与受者细胞起源不同,与肾、肝、心等器官移植相比,allo-BMT更易发生排斥反应,而一旦供髓植活后又可发生移植物抗宿主病(GVHD),故供、受者间要进行严格的组织配型,受者在移植前必须用免疫抑制剂预处理。二、 骨髓移植的适应症allo-BMT可纠正受者造血系统及免疫系统不可逆的严重疾病,目前已在下列疾病中应用并取得满意效果。1. 遗传性......阅读全文

HLA基因分型方法:RFLP法

RFLP法1)常规制备DNA盐析法1.用淋巴细胞分离液从抗凝血中分离出白细胞。2.每3ml细胞悬液加10ml红细胞裂解液溶解红细胞两次,再加2ml白细胞裂解液溶解白细胞。3.加50μl 10% SDS和70μl蛋白酶K消化蛋白质,37℃过夜或55℃ 3h。4.加0.25体积饱和醋酸钠溶液,剧烈摇动1

HLA细胞法分型试验简介

HLA-D和DP位点的抗原须用细胞法分型进行鉴定,所以又称LD抗原(lymphocytedefinedantigen),其鉴定方法普遍采用混合淋巴细胞培养(mixedlymphocyteculture,MLC),也称混合淋巴细胞反应(mixedlymphocytereaction,MLR)。1.试验

HLA细胞法分型试验介绍

HLA细胞法分型试验介绍: HLA-D和DP位点的抗原须用细胞法分型进行鉴定,所以又称LD抗原,其鉴定方法普遍采用混合淋巴细胞培养,也称混合淋巴细胞反应。 1.试验方法将分离的反应细胞(通常是患者的淋巴细胞)与刺激细胞(通常是供者或已知的标准淋巴细胞)配制成1×106/ml浓度的悬液,各加0.

HLA的分型方法有什么?

  ①淋巴细胞毒试验:为HLA抗原分型常用方法。原理:淋巴细胞膜上的HLA抗原与相应抗体结合后,在补体作用下,细胞膜损伤,细胞溶解破裂被染色,计算显微镜下观察着色细胞的百分率(>20%为阳性反应)。Ⅰ类抗原分型时可用T淋巴细胞或外周血淋巴细胞;进行Ⅱ类抗原分型时需用B淋巴细胞。  ②混合淋巴细胞培养

HLA细胞法分型试验介绍

HLA细胞法分型试验介绍:HLA-D和DP位点的抗原须用细胞法分型进行鉴定,所以又称LD抗原,其鉴定方法普遍采用混合淋巴细胞培养,也称混合淋巴细胞反应。1.试验方法将分离的反应细胞(通常是患者的淋巴细胞)与刺激细胞(通常是供者或已知的标准淋巴细胞)配制成1×106/ml浓度的悬液,各加0.2ml到反

HLA细胞法分型试验简介

HLA-D和DP位点的抗原须用细胞法分型进行鉴定,所以又称LD抗原(lymphocytedefinedantigen),其鉴定方法普遍采用混合淋巴细胞培养(mixedlymphocyteculture,MLC),也称混合淋巴细胞反应(mixedlymphocytereaction,MLR)。

关于HLA高分辨分型的介绍

  过去治疗白血病通常是通过骨髓移植进行的,由于必须在麻醉状态下抽取骨髓捐献者的部分骨髓,整个过程对捐献者产生非常大的心理压力。现随着科学进步,只需抽取若干毫升静脉血,分离出干细胞,再输入患者体内即可。首先抽取患者和捐献者的静脉血样本,提取DNA,测出各自DNA碱基的顺序,最后通过软件比对分析得出H

造血干细胞移植的适应症

  造血干细胞移植迄今仍然是一种高风险治疗方法,目前主要用于恶性血液疾病的治疗,也试用于非恶性疾病和非血液系统疾病,如重症难治自身免疫性疾病和实体瘤等。  (1) 血液系统恶性肿瘤:慢性粒细胞白血病、急性髓细胞白血病、急性淋巴细胞白血病、非霍奇金淋巴瘤、霍奇金淋巴瘤、多发性骨髓瘤、骨髓增生异常综合征

造血干细胞移植的适应症

  造血干细胞移植迄今仍然是一种高风险治疗方法,目前主要用于恶性血液疾病的治疗,也试用于非恶性疾病和非血液系统疾病,如重症难治自身免疫性疾病和实体瘤等。  (1) 血液系统恶性肿瘤:慢性粒细胞白血病、急性髓细胞白血病、急性淋巴细胞白血病、非霍奇金淋巴瘤、霍奇金淋巴瘤、多发性骨髓瘤、骨髓增生异常综合征

关于HLA分型的DNA分型方法介绍

  DNA分型主要分为两种方法:基于核酸序列识别的方法和基于序列分子构型的方法,常用的方法大致可分为大类:  ①限制性片段长度多态性分析(restriction fragment length polymorphism,RFP)。其原理是不同的DNA膜板山于序列的差异在限制性内切酶作用下将被切成大小

关于严重联合免疫缺陷病的治疗措施

  为防止移植物抗宿主病发生,应将拟输的全血或血制品应用射线照射,以灭活免疫活性细胞,或采用冰冻过的红细胞。  应用骨髓移植进行免疫重建是治疗本病最有效的方法。采用HLA配型相容的同胞提供骨髓组织,成功率最高;如应用HLA不相容的供髓组织,几乎都发生移植物抗宿主病而失败。预选用植物血凝素、单克隆抗体

人类白细胞抗原检查

HLA是糖蛋白抗原,又称组织相容性抗原、移植抗原和组织抗原。HLA由一系列紧密连锁的基因编码,这些基因称为组织相容性复合物(MHC),也称为HLA基因,定位在第6号染色体短臂上,共有6个座位,至少含4个与移植有关的基因区:即HLA-A,HLA-B,HLA-C和HLA-D.HLA-D又分为HLA-DR

HLA分型的常用方法有哪些?

1.分子生物学技术: 一类是PCR为基础的基因分型,一类是以测序为基础的基因分型。2.淋巴细胞毒试验: 为HLA抗原分型常用方法。原理:淋巴细胞膜上的HLA抗原与相应抗体结合后,在补体作用下,细胞膜损伤,细胞溶解破裂被染色,计算显微镜下观察着色细胞的百分率(>20%为阳性反应)。Ⅰ类抗原分型时可用T

HLA分型的基本信息介绍

  HLA(humanleucocyteantigen)复合体是人类多态性最丰富的遗传系统,定位于第6号染色体短臂6P21.31区,长3600kb。1999年已完成全部序列分析及基因定位,在此区域内共确认了224个基因座位中128个为功能性基因,其中39.8%和免疫功能相关。HLA基因根据其编码分子

简述HLA低分辨分型的内容

  采用序列特异性引物扩增HLA等位基因的特异性片段,经电泳分离,根据PCR结果的反应格局具判断被测标本的HLA等位基因型,具有通量大、正确性好的特点。反映了HLA抗原水平的等位基因类型,用于骨髓、器官移植组织配型的初筛。

新桥医院发现一人类白细胞等位基因

  第三军医大学新桥医院全军血液病中心发现一新的人类白细胞组织相容性抗原等位基因,相关论文已于近日发表在《Tissue antigens》杂志。据悉,这是重庆地区首个被世界卫生组织认证接受的人类白细胞等位基因。  目前对血液疾病最有效的治疗手段是造血干细胞移植,而移植所需的有血缘关系完全匹配的造血干

治疗重度联合免疫缺陷病的方法介绍

  为防止移植物抗宿主病发生,应将拟输的全血或血制品应用射线照射,以灭活免疫活性细胞,或采用冰冻过的红细胞。应用骨髓移植进行免疫重建是治疗本病最有效的方法。采用HLA配型相容同胞提供的骨髓组织,成功率最高。  预选用植物血凝素、单克隆抗体与补体或者免疫毒素处理供体骨髓,以清除引起移植物抗宿主病的成熟

重度联合免疫缺陷病的临床治疗方法

为防止移植物抗宿主病发生,应将拟输的全血或血制品应用射线照射,以灭活免疫活性细胞,或采用冰冻过的红细胞。应用骨髓移植进行免疫重建是治疗本病最有效的方法。采用HLA配型相容同胞提供的骨髓组织,成功率最高。预选用植物血凝素、单克隆抗体与补体或者免疫毒素处理供体骨髓,以清除引起移植物抗宿主病的成熟T淋巴细

人类白细胞抗原(HLA)检测及临床意义

人类白细胞上有3类抗原:红细胞血型抗原、白细胞特有抗原、与其他组织共有但也是最强的人类白细胞抗原(HLA)。  1.抗原:HLA是糖蛋白抗原,又称组织相容性抗原、移植抗原和组织抗原。HLA由一系列紧密连锁的基因编码,这些基因称为组织相容性复合物(MHC),也称为HLA基因,定位在第6号染色体短臂上,

人类白细胞抗原的医学价值

  与器官移植  HLA的研究原初是在器官移植研究推动下开展起来的。  故此,HLA又称移植抗原。临床实践表明,同种异体移植(除同卵双生子外)的排斥应是成功率的最大障碍。在遗传学中,MHC是作为一个单位孟德尔式传递的。因此,同胞之间可有HLA相同、半相同和不同3种情况。实践证明,HLA相同的同胞供者

怎样治疗血小板无力症?

  本病是遗传性疾病,基因治疗正在研究中。  1、局部出血可用压迫止血。  2、出血严重时可以输注血小板悬液,但是,多次输注可引起同种免疫反应,且有GPⅡb-Ⅲa抗体形成,因此,最好输注去除白细胞的AB0和HLA配型一致的单采血小板。  3、炔诺酮(妇康片)和避孕丸可以有效地控制月经,近年来有报道用

HLAHLA定型

HLA定型介绍: HLA即人类白细胞抗原(Human leucocyteantigen),是人类的组织相容性系统。这是一组广泛分布于人体有核细胞表面的抗原,受控于人类第6号染色体短臂。HLA基因位点至少有五个,即HLA-A、B、C、D和DR位点。近年又确定了DP和DQ两个位点。HLA有高度多态性,每

HLA基因分型方法:PCR-SSP法

PCR-SSP法1)提取DNA同前RFLP法 2)PCR扩增操作方法基本同PCR-RFLP,但引物是根据各等位基因的核苷酸序列设计的特异性引物,主要是针对第二外显子区域的多态性,用SSP扩增出来的产物具等位基因特异性。 3)凝胶电泳取PCR扩增的产物与上样缓冲液混合,加入2%琼脂糖凝胶加样孔中,其内

HLA基因分型方法:PCR-SSCP法

PCR-SSCP法1)提取DNA同前RFLP法 2)PCR扩增同前PCR-RFLP,也可加入1μCi32P-dCTP标记产物。 3)非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳1.取PCR的扩增产物,加凝胶加样液3μl,95℃加热变性2min,冰浴骤冷。同位素掺入的DNA取1μl稀释10倍,加样3μl。2.取样品用微量

HLA分型的血清学方法介绍

  1964Terasaki建立了HLA微量淋巴胞毒实验方法来分析受试者的HLA型别,其主要过程是从全血或淋巴组织中分离出淋巴细胞,与HLA-特异性抗体包被的微孔板孵育,加入补体,使能与淋巴细胞表面HA抗原结合的特异性抗体通过经典途径激活补体,导致靶细胞水解(淋巴细胞毒性)。多年来这种血清学方法是确

关于HLA细胞学分型方法的介绍

  HLA-D座位上的抗原称之为LD抗原,采用细胞学分型方法检测。常用检测方法有三种:混合淋巴细胞培养(MLC)技术;纯合细胞分型技术;预处理淋巴细胞分型方法。MLC又可分单向MLC和双向MLC。  (1)单向MLC:刺激细胞不再增殖,未处理的应答细胞能够识别外来刺激细胞的HLA-D抗原,发生增殖。

HLA基因分型方法:PCR-RFLP法

PCR-RFLP法1)提取细胞总DNA方法同前。 2)PCR扩增引物的设计1.引物长度一般为15~30bp,G+C含量应在45%~55%之间。2.应避免连续出现4个以上的单一碱基。3.不能含有自身互补序列。4.两个引物之间不应有多于4个的互补或同源碱基,不然会形成引物二聚体。5.与非特异扩增序列的同

关于HLA分型的基本信息介绍

  HLA分型 (HUMAN LEUCOCYTE ANTIGEN),即人类白细胞抗原)是一个由一系列紧密连锁的基因座位所组成的具有高度多态性的复合体。主要组织相容性复合体(major histocompatibility complex,MHC)是由染色体上一组编码与细胞间识别和抗原呈递相关蛋白的高

关于HLA分型的技术发展介绍

  HLA系统研究从70年代到80年代末期主要是血清学研究,90年代以来,HLA进入了分子水平研究阶段。HLA分型技术同样走过了这一历程。建立于60年代的血清学及细胞学分型技术主要侧重于分析HLA产物特异性。1991年第11届国际HLA专题讨论上提出了HLA的DNA分型方法,随着测序技术的突飞猛进,

关于异体骨髓移植的分类介绍

  异体骨髓移植包括同种异基因移植(同胞相合、非血缘、单倍型);同种同基因移植(双胞胎);异种移植。  1、同种异基因骨髓移植(1970年代以来临床应用,已取得很大的成功)。它需有与患者人类白细胞抗原 (HLA)相匹配的同胞兄弟、姐妹以及极少数的无亲缘关系的供髓者所输入的异体骨髓,或家庭成员间如父母