与做荧光染色的同学共享些经验
Hoechst 33258染色固定液 50 ml Hoechst 33258染色液 50 ml 抗荧光淬灭封片液 5 ml 说明书 1 份 保存条件: 4℃保存,Hoechst 33258染色液需4℃避光保存。本试剂盒自订购之日起六个月内有效。 注意事项: Ø 需荧光显微镜或激光共聚焦显微镜。 Ø 需PBS或0.9%NaCl溶液。 Ø 需盖玻片与载玻片。 Ø 荧光物质均易发生淬灭,染色后的样品宜避光保存。 Ø 在使用抗淬灭封片液的情况下可以减缓淬灭,但仍宜尽量避光。使用说明: 1. 贴壁细胞 A. 取普通洁净盖玻片于70%乙醇中浸泡5分钟或更长时间,无菌超净台内吹干或用细胞培养级PBS或0.9......阅读全文
病毒免疫荧光实验_病毒染色标本的制备
实验材料待检测病毒试剂、试剂盒丙酮0. 01mol L PBS95%乙醇二甲苯仪器、耗材玻片实验步骤1. 培养细胞小玻片标本的制备 根据所检测病毒种类,选择敏感细胞进行培养,如乙型肝炎病毒用乳地鼠肾细胞 (BHK21 细胞)培养,森林脑炎病毒用绿猴肾细胞 (Vero 细胞)培养,登革热病毒用白纹伊蚊
细胞核蛋白的免疫荧光染色方法
细胞免疫荧光的详细操作步骤1,取出细胞爬片放到35mm或60mm用过的细胞培养皿里,PBS洗三遍。注意有的时候作的细胞爬片可能比较小,因此夹取的时候要小心。2,4%多聚甲醛固定20分钟,PBS洗三遍。3,0.2%TritonX100通透10分钟,PBS洗三遍。4,与二抗相同宿主的血清封闭30分钟,P
细菌染色技术(单染技术与革兰氏染色)
细菌 个体微小,普通光学显微镜下不易直接观察,故常用染色技术使细菌细胞着色。包括细菌单染技术、细菌的革兰氏染色技术、细菌的芽孢染色技术、细菌的荚膜染色技术和细菌的鞭毛染色技术 Ⅰ、细菌的单染技术 简单染色通常只用一种染色剂,使细菌整个细胞染上颜色。但看不清结构。所以只便于检查细菌的形态
简单染色法与革兰氏染色法
(一)细菌的简单染色法 1 目的 1.1 学习微生物 涂片、染色的基本技术。 1.2 掌握细菌的简单染色法。 1.3 初步认识细菌的形态特征,巩固学习油镜的使用方法和无菌操作技术。 2 原理 细菌的涂片和染色是微生物学实验中的一项基本技术。细菌的细胞小而透明,在普通的光学显微镜下不易识
免疫荧光染色能进行细胞平均荧光强度分析吗
细胞免疫荧光的详细操作步骤1,取出细胞爬片放到35mm或60mm用过的细胞培养皿里,PBS洗三遍。注意有的时候作的细胞爬片可能比较小,因此夹取的时候要小心。2,4%多聚甲醛固定20分钟,PBS洗三遍。3,0.2%TritonX100通透10分钟,PBS洗三遍。4,与二抗相同宿主的血清封闭30分钟,P
清华大学仪器共享平台Imaris9.7.2图像处理工作站
仪器名称:Imaris9.7.2图像处理工作站仪器编号:A20000066产地:生产厂家:型号:出厂日期:购置日期:所属单位:医研院>生物医学测试中心>共享仪器平台>透明化制样与成像机组放置地点:生物技术馆1102B固定电话:010-62798144固定手机:固定email:联系人:分类标签:图像处
免疫荧光如何做定量分析
和免疫组化一样,只能通过软件分析得出一个“数值”,可以当一个“半定量”的指标,但我认为准确性差,如果是要分析蛋白的表达情况,建议用western比较好些。统计荧光强度的软件没有用过,以前只用过免疫组化的光密度分析软件,影响结果的因素太多了
原子荧光法测汞怎么做
1、HNO3-HCLO4(1+1)怎么配?体积比一比一,没啥特别讲究,不会产生热量或喷溅2、电热板温度要求多少?HG温度别太高,看你的电热板是否能控温,别超过150为好,我的经验3、如何判断冒白烟,而不是水蒸气?白烟是硝酸的酸雾,肉眼能看见的4、如何判断冒黄烟,而不是水蒸气?黄烟是硝酸反应后产生的二
原子荧光做标准曲线,得负截距问题
原子荧光做标准曲线,得负截距问题如果样品浓度很低,我一般是配制一条低浓度范围的标准曲线,尽量使样品测定值在标准曲线范围内。
免疫荧光如何做定量分析
和免疫组化一样,只能通过软件分析得出一个“数值”,可以当一个“半定量”的指标,但我认为准确性差,如果是要分析蛋白的表达情况,建议用western比较好些。统计荧光强度的软件没有用过,以前只用过免疫组化的光密度分析软件,影响结果的因素太多了
免疫荧光如何做定量分析
和免疫组化一样,只能通过软件分析得出一个“数值”,可以当一个“半定量”的指标,但我认为准确性差,如果是要分析蛋白的表达情况,建议用western比较好些。统计荧光强度的软件没有用过,以前只用过免疫组化的光密度分析软件,影响结果的因素太多了
免疫荧光如何做定量分析
和免疫组化一样,只能通过软件分析得出一个“数值”,可以当一个“半定量”的指标,但我认为准确性差,如果是要分析蛋白的表达情况,建议用western比较好些。统计荧光强度的软件没有用过,以前只用过免疫组化的光密度分析软件,影响结果的因素太多了
用原子荧光做砷的时候荧光强度为零是怎么回事
食品中总砷可以使用原子荧光就可以检测了,但是无机砷要使用液相色谱和原子荧光联用仪检测(又名原子荧光形态分析仪)。 连续流动进样的原子荧光光谱仪会好一些,因为都是连续进样 与液相色谱对接更便捷。
用原子荧光做砷的时候荧光强度为零是怎么回事
食品中总砷可以使用原子荧光就可以检测了,但是无机砷要使用液相色谱和原子荧光联用仪检测(又名原子荧光形态分析仪)。 连续流动进样的原子荧光光谱仪会好一些,因为都是连续进样 与液相色谱对接更便捷。
用原子荧光做砷的时候荧光强度为零是怎么回事
食品中总砷可以使用原子荧光就可以检测了,但是无机砷要使用液相色谱和原子荧光联用仪检测(又名原子荧光形态分析仪)。 连续流动进样的原子荧光光谱仪会好一些,因为都是连续进样 与液相色谱对接更便捷。
关于CRISPRCAS9介导的基因编辑细胞株的一些经验总结
最近小编在应用CRISPR/CAS9作为工具制备基因编辑细胞株,有一些阶段性总结和设想,在这里贴出来,大家可以互相探讨一下。首先要描述一下“基因编辑细胞株”的具体要求:(1)“基因编辑”是指在特定位点引入期望的碱基修饰。具体过程为,通过CRISPR/CAS9在待编辑位点(靶位点)附近引入基因组DNA
关于CRISPRCAS9介导的基因编辑细胞株的一些经验总结
最近小编在应用CRISPR/CAS9作为工具制备基因编辑细胞株,有一些阶段性总结和设想,在这里贴出来,大家可以互相探讨一下。 首先要描述一下“基因编辑细胞株”的具体要求: (1)“基因编辑”是指在特定位点引入期望的碱基修饰。 具体过程为,通过CRISPR/CAS9在待编辑位点(
血涂片制备与染色
血涂片是通过特定的方法将血液按一定方向均匀涂开的过程,微观上使细胞是由球形变为平面形或近平面形平铺在载玻片上。血涂片的显微镜检查是血液细胞形态学检查的基本步骤,特别是对于各种血液病的诊断和鉴别诊断,具有重要价值。血涂片制备是否合格、染色的好坏直接关系到检验结果的质量。 (一)血涂片制备 1.载玻片
欧美同学会举办中国留学人员回国创业与发展论坛
欧美同学会6月27日在北京举办2010北京论坛暨中国留学人员回国创业与发展论坛,这是欧美同学会第五次举办高规格的海归盛会。本次论坛旨在关注中国海归创业发展事业和国内外最前沿的话题,用世界的眼光,为中国的发展建言献策。 今年的论坛正逢中央和国家举办全国人才工作会议,出台新的国家中长期人
与透射荧光相比,反射激发荧光的优点
目前荧光显微镜使用二种激发照明方式,一为透射方法,另一为反射方法。透射激发是过去沿用下来的方法,往往只需在普通显微镜前方设置一个超高压汞灯作光源,灯前设置激发滤光片,在目镜处设置遏止滤光片,这样即可作一般透射荧光观察,比较经济实用,使用也很习惯。目前专用的透射荧光显微镜,其聚光镜用暗场聚光镜,暗场荧
蛋白质的内源荧光与荧光探针
利用荧光光谱法研究蛋白质一般有两种方法。一是测定蛋白质分子的自身荧光(内源荧光),另一种是当蛋白质本身不能发射荧光时,通过非共价吸附或共价作用向蛋白质分子的特殊部位引入外源荧光(也称荧光探针),然后测定外源荧光物质的荧光。 蛋白质的内源荧光 含有芳香族氨基酸(色氨酸(tryptophan ,Trp
做荧光定量PCR时,它的计算公式是什么
Ct=-1/lg(1+Ex)*lgX0+lgN/lg(1+Ex)。n为扩增反应的循环次数,X0为初始模板量,Ex为扩增效率,N为荧光扩增信号达到阈值强度时扩增产物的量。起始拷贝数越多,Ct值越小。利用已知起始拷贝数的标准品可作出标准曲线,其中横坐标代表起始拷贝数的对数,纵坐标代Ct值。因此,只要获得
mirna的荧光定量pcr可以用actin做内参吗
mirna的荧光定量pcr可以用actin做内参miRNA通过与转录本的相互作用,关闭或抑制基因的表达。最近的研究表明它们影响了约三成的基因。miRNA在多个组织中差异表达,这就让表达图谱分析成为研究的重点。同时,miRNA的过表达和抑制也是近年来常用的研究方法。我知道和使用过的U6内参基因只有两个
做荧光定量PCR时,它的计算公式是什么
Ct=-1/lg(1+Ex)*lgX0+lgN/lg(1+Ex)。n为扩增反应的循环次数,X0为初始模板量,Ex为扩增效率,N为荧光扩增信号达到阈值强度时扩增产物的量。起始拷贝数越多,Ct值越小。利用已知起始拷贝数的标准品可作出标准曲线,其中横坐标代表起始拷贝数的对数,纵坐标代Ct值。因此,只要获得
做荧光定量PCR时,它的计算公式是什么
Ct=-1/lg(1+Ex)*lgX0+lgN/lg(1+Ex)。n为扩增反应的循环次数,X0为初始模板量,Ex为扩增效率,N为荧光扩增信号达到阈值强度时扩增产物的量。起始拷贝数越多,Ct值越小。利用已知起始拷贝数的标准品可作出标准曲线,其中横坐标代表起始拷贝数的对数,纵坐标代Ct值。因此,只要获得
做荧光定量PCR时,它的计算公式是什么
Ct=-1/lg(1+Ex)*lgX0+lgN/lg(1+Ex)。n为扩增反应的循环次数,X0为初始模板量,Ex为扩增效率,N为荧光扩增信号达到阈值强度时扩增产物的量。起始拷贝数越多,Ct值越小。利用已知起始拷贝数的标准品可作出标准曲线,其中横坐标代表起始拷贝数的对数,纵坐标代Ct值。因此,只要获得
做荧光定量PCR时,它的计算公式是什么
Ct=-1/lg(1+Ex)*lgX0+lgN/lg(1+Ex)。n为扩增反应的循环次数,X0为初始模板量,Ex为扩增效率,N为荧光扩增信号达到阈值强度时扩增产物的量。起始拷贝数越多,Ct值越小。利用已知起始拷贝数的标准品可作出标准曲线,其中横坐标代表起始拷贝数的对数,纵坐标代Ct值。因此,只要获得
常染色质与异染色质的功能差异
常染色质区域的基因可以被转录为信使RNA。常染色质区域非折叠的结构允许基因调控蛋白和RNA聚合酶与其上的DNA序列结合,从而开启转录过程。在转录过程中,并非所有的常染色质都会被转录,但基本上非转录的部分会折叠为异染色质以保护暂时其上不用的基因。因此细胞的活性与细胞核中的常染色质数目有直接关系。常染色
荧光原位杂交染色体分析技术
FISH是上世纪80年代中期发展起来并直到现在仍在不断改进、完善的技术。其基本过程是:首先制成染色体标本,和与所感兴趣的目的基因(或染色体片段)互补的探针,并在探针上标记荧光色素,当探针与染色体标本上的靶序列杂交后,利用荧光显微镜观察荧光信号从而获得染色体核型的信息。此技术具有灵敏度强、背景低、
荧光原位杂交染色体分析技术
FISH是上世纪80年代中期发展起来并直到现在仍在不断改进、完善的技术。其基本过程是:首先制成染色体标本,和与所感兴趣的目的基因(或染色体片段)互补的探针,并在探针上标记荧光色素,当探针与染色体标本上的靶序列杂交后,利用荧光显微镜观察荧光信号从而获得染色体核型的信息。此技术具有灵敏度强、背景低、