与做荧光染色的同学共享些经验
Hoechst 33258染色固定液 50 ml Hoechst 33258染色液 50 ml 抗荧光淬灭封片液 5 ml 说明书 1 份 保存条件: 4℃保存,Hoechst 33258染色液需4℃避光保存。本试剂盒自订购之日起六个月内有效。 注意事项: Ø 需荧光显微镜或激光共聚焦显微镜。 Ø 需PBS或0.9%NaCl溶液。 Ø 需盖玻片与载玻片。 Ø 荧光物质均易发生淬灭,染色后的样品宜避光保存。 Ø 在使用抗淬灭封片液的情况下可以减缓淬灭,但仍宜尽量避光。使用说明: 1. 贴壁细胞 A. 取普通洁净盖玻片于70%乙醇中浸泡5分钟或更长时间,无菌超净台内吹干或用细胞培养级PBS或0.9......阅读全文
振动试验机操作前应做的一些准备
1、供试品之安装:将供试品依组件标准规定之方法,直接或使用夹具坚固地安装于振动台上。使用夹具时,须能施加振动于组件标准规定之方向,且夹具应具足够机械强度,安装后亦不得松动或发生共振,组件标准应规定下列任一种安装方法。 (1)固定组件本体(有导线之组件,亦同时固定导线)。 (2)仅固定导线。
什么是荧光染色法
用各种可以发荧光的物质来染色微生物样品,如利用荧光染色剂将人的染色体染色,可以通过染色不同,看到显微镜下染色体上的基因
细胞免疫荧光染色实验
实验原理利用抗原抗体反应,鉴定细胞是否表达某种蛋白。细胞经固定后,用特异性抗体(一抗)识别目的蛋白,再用一抗的抗体(二抗)识别一抗,二抗一般耦联荧光基团或化学反应基团,通过荧光或化学发光显示目的蛋白。主要试剂防淬灭剂、DPBS、指甲油、4% PFA、10 μg/mL PI、10 μg/mL Hoec
细胞免疫荧光染色实验
实验原理利用抗原抗体反应,鉴定细胞是否表达某种蛋白。细胞经固定后,用特异性抗体(一抗)识别目的蛋白,再用一抗的抗体(二抗)识别一抗,二抗一般耦联荧光基团或化学反应基团,通过荧光或化学发光显示目的蛋白。主要试剂防淬灭剂、DPBS、指甲油、4% PFA、10 μg/mL PI、10 μg/mL Hoec
免疫荧光染色(间接法)
1、切片固定后用毛细滴管吸取经适当稀释的免疫血清滴加在其上,置于染色盒中保持一定的湿度,37℃作用30min。然后用0.01mol/l pH7.2PBS洗两次,10min,用吸水吸去或吹干余留的液体。 2、再滴加间接荧光抗体(如兔抗人 -球蛋白荧光抗体等),同上步骤,染色30min,37℃,缓冲盐水
自带红色荧光的细胞怎样做流式凋亡
流式凋亡检测的方法很多。如果细胞只是自带红色荧光,那就用其他颜色的荧光染料来检测。比如检测caspase-3/7活性,底物可以用绿色荧光标记。如果是要做DNA单色,看sub-G1,那可以用DAPI。要测annexin V,也可以用绿色标记物加DAPI
荧光定量pcr的标准曲线怎么做
采用相对法定量要求必须目的基因和内参具有相同的扩增效率,所以需要做efficiencycurve如果得到的斜率小于0.1,可以采用相对法,否则,需要重新设计能达到相同扩增效率的引物,或者就需要制作标准曲线,制作标准曲线,可以将基因片段克隆到质粒,然后体外转录成rna,定量以后合成cdna,然后按比例
角膜荧光素染色的注意事项
不合宜人群:角膜上皮没有损伤或有溃疡者。 检查前禁忌:禁忌消毒荧光素滤纸。 检查时要求:操作时注意勿污染被检者面部及衣服。
角膜荧光素染色的检查过程
(1) 用玻璃棒蘸少许荧光素液涂于结膜囊内。 (2) 将荧光素液置于眼药水瓶内直接滴入结膜囊。 (3) 将荧光素液抽入注射器内向结膜囊内滴入。
角膜荧光素染色的临床意义
异常结果:角膜、结膜破损处有嫩绿色着色,上皮完整处不染色。如有角膜瘘,点荧光素后作轻压眼球,可见角膜表面布满黄绿色荧光素,而在瘘管处则有液体流出,状如清泉外流。 需要检查的人群:角膜、结膜上皮损伤或有溃疡患者。
搭建太赫兹时域光谱仪THz-TDS的一些经验总结
一,基于太赫兹光电导天线的THz-TDS如果你们实验室已经具备了飞秒激光器,飞秒光纤激光器,或是钛蓝宝石飞秒激光器都可以,振荡级放大级出光都行,只要脉冲宽度在100fs量级。你就可以以一个低成本的价格搭建一套太赫兹时域光谱仪系统。搭建常规的基于太赫兹光电导天线的THz-TDS,系统对fs激光器的要求
搭建太赫兹时域光谱仪THz-TDS的一些经验总结
一,基于太赫兹光电导天线的THz-TDS如果你们实验室已经具备了飞秒激光器,飞秒光纤激光器,或是钛蓝宝石飞秒激光器都可以,振荡级放大级出光都行,只要脉冲宽度在100fs量级。你就可以以一个低成本的价格搭建一套太赫兹时域光谱仪系统。搭建常规的基于太赫兹光电导天线的THz-TDS,系统对fs激光器的要求
培养细胞的染色实验——吖啶橙染色荧光观察法
实验方法原理吖啶橙(Acridine Oringe:AO)是一种常用荧光染料,用于直接染色观察活细胞或固定染色观察细胞均可。吖啶橙对DNA和RNA都能染色,快速、简便和有一定的特异性。吖啶橙对活细胞毒性小,配成2×10-4~1×10-4 可用于直接染色观察法更好。实验材料细胞试剂、试剂盒酒精PBSC
原子荧光光谱仪存在的一些常见故障与处理方法
原子荧光光谱仪主要在中药中砷、汞、硒、镉、铅、锑和锗等金属元素分析中得到了应用。1、通讯失败:产生原因之一是先开软件后开仪器,由于在仪器关闭状态下电脑软件无法接收仪器传输的信号,导致出现错误。正确顺序是先开仪器,等30s-1min后仪器稳定下来再打开软件。2、氩气不足:氩气剩余量不足以支持实验用量,
云南大型科研仪器共享经验交流会在昆明召开
2015年8月4日,受云南省科技厅委托,云南省科学技术情报研究院(以下简称“情报院”)联合国土资源部昆明矿产资源监督检测中心,组织14家分析检测单位和20家企业的80名代表,召开了“云南省大型科研仪器协作共用网络服务平台仪器共享经验交流暨分析检测服务培训会”。云南省科技厅、云南省地矿局的有关领导
正置荧光显微镜共享应用
仪器名称:正置荧光显微镜仪器编号:A23000007产地:日本生产厂家:Olympus型号:BX53出厂日期:20230216购置日期:20230216所属单位:化学系>分析中心>光学显微成像放置地点:清华大学生命科学馆141固定电话:010-62771139固定手机:13121649595固定em
Nikon-普通倒置荧光显微镜共享
仪器名称:Nikon 普通倒置荧光显微镜仪器编号:17026962产地:德国生产厂家:Zeiss型号:Stemi508出厂日期:201606购置日期:201710所属单位:生命学院>蛋白质研究技术中心>细胞影像平台>细胞影像 平台放置地点:生物医学馆U6 121固定电话:固定手机:固定email:联
X荧光光谱仪如何做定性与定量分析
定性与定量分析 (一)、定性分析定性分析是X荧光光谱分析的基础,因为只有从仪器获得的谱图中辨认峰谱,才能知道待测试样中还有那些元素,并且分析待测元素的主要谱线,以及常见的干扰谱线,以便选择合适的测量谱线,用于定量分析方法,确定谱线的重叠校正方法,选择校正元素,终达到准确测试
异染色质与常染色的区别
常染色质易被碱性染料染成浅色,或对福尔根反应呈弱阳性。异染色质易被碱性染料染成深色,或对福尔根反应呈阳性。 异染色质着色较深,常位于细胞核的边缘和核仁周围,构成核仁相随染色质的一部分。可以分为结构性异染色质(constitutive heterochromatin)和兼性异染色质(facult
什么是免疫荧光染色诊断
免疫荧光染色诊断:用于检测或定位各种抗原,也可以与其他蛋白质结合,用于检测或定位抗体。 用免疫荧光技术显示和检查细胞或组织内抗原或半抗原物质等方法称为免疫荧光细胞(或组织)化学技术。原理:免疫学的基本反应是抗原-抗体反应。由于抗原抗体反应具有高度的特异性,所以当抗原抗体发生反应时,只要知道其中的一个
免疫荧光细胞化学染色方法
免疫荧光细胞化学染色方法 一、标本制作 可制作涂片、印片、细胞单层培养物、组织切片,经适当固定或不固定,作免疫荧光染色用。 二、荧光抗体染色方法 (一)直接法 1.染色 切片经固定后,滴加经稀释至染色效价如1:8或1:16的荧光抗体(如兔抗人γ-球蛋白荧光 抗体或兔抗人 IgG 或 IgA 荧光抗体
什么是免疫荧光染色诊断
免疫荧光染色诊断:用于检测或定位各种抗原,也可以与其他蛋白质结合,用于检测或定位抗体。 用免疫荧光技术显示和检查细胞或组织内抗原或半抗原物质等方法称为免疫荧光细胞(或组织)化学技术。原理:免疫学的基本反应是抗原-抗体反应。由于抗原抗体反应具有高度的特异性,所以当抗原抗体发生反应时,只要知道其中的一个
荧光抗体染色三大方法
1.直接染色法将标记的特异荧光抗体直接加在抗原标本上,经一定温度和时间的染色,洗去未参加反应的多余荧光抗体,在荧光显微镜下便可见到被检抗原与荧光抗体形成的特异性结合物而发出的荧光。直接染色法的优点是:特异性高,操作简便,比较快速。缺点是:一种标记抗体只能检查一种抗原,敏感性较差。直接法应设阴、阳性标
免疫荧光细胞化学染色方法
一、标本制作 可制作涂片、印片、细胞单层培养物、组织切片,经适当固定或不固定,作免疫荧光染色用。 二、荧光抗体染色方法 (一)直接法 1.染色 切片经固定后,滴加经稀释至染色效价如1:8或1:16的荧光抗体(如兔抗人γ-球蛋白荧光抗体或兔抗人IgG或IgA荧光抗体等),在室温或37℃染色30
什么是免疫荧光染色诊断
免疫荧光染色诊断:用于检测或定位各种抗原,也可以与其他蛋白质结合,用于检测或定位抗体。 用免疫荧光技术显示和检查细胞或组织内抗原或半抗原物质等方法称为免疫荧光细胞(或组织)化学技术。原理:免疫学的基本反应是抗原-抗体反应。由于抗原抗体反应具有高度的特异性,所以当抗原抗体发生反应时,只要知道其中的一个
吖啶橙/溴化乙锭双荧光染色
AO / EB原理与流程zhongyisheng:1、原理:吖啶橙(AO)能透过胞膜完整的细胞,嵌入细胞核DNA,使之发出明亮的绿色荧光。溴乙锭(E仅能透过胞膜受损的细胞,嵌入核DNA,发橘红色荧光。凋亡的细胞呈现为染色增强,荧光更为明亮,均匀一致的圆状或固缩状、团块状结构。非凋亡细胞核呈现荧光深浅
免疫荧光染色原理及步骤
免疫荧光又称免疫荧光抗体。免疫荧光实验原理是将荧光素标记在相应的抗体上,直接与相应抗原反应。其优点是方法简便、特异性高,非特异性荧光染色少,相对使用标记抗体用量偏大。利用抗原抗体反应进行组织或细胞内抗原物质的定位。下面详细介绍免疫荧光染色步骤:1. 滴加 0.01mol/L,pH7.4 的PBS于待
什么是免疫荧光染色诊断
免疫荧光染色诊断:用于检测或定位各种抗原,也可以与其他蛋白质结合,用于检测或定位抗体。 用免疫荧光技术显示和检查细胞或组织内抗原或半抗原物质等方法称为免疫荧光细胞(或组织)化学技术。原理:免疫学的基本反应是抗原-抗体反应。由于抗原抗体反应具有高度的特异性,所以当抗原抗体发生反应时,只要知道其中的一个
类器官荧光染色实验流程(二)
染色(免疫荧光)10. 晾干切片,使用免疫组化笔标出类器官切片的部分。11. 使用适合的封闭缓冲液在室温封闭1小时(或按照常用的封闭方法进行封闭)。12. 加一抗,室温孵育2小时,或在4度孵育过夜。13. 用PBS清洗2次,每次2分钟。14. 加二抗,室温孵育1小时。避光。15. 用PBS清洗两遍,
类器官荧光染色实验流程(一)
固定注意: 合并2-3孔的几十个类器官最为理想,但也可只使用一个孔的类器官。使用PFA固定和O.C.T包埋的实验流程使用1.5 mL的EP管收集类器官,使用4% PFA溶液室温固定半小时。室温下用PBS清洗3次,每次5分钟。然后将样本转移至30% 蔗糖溶液4度孵育过夜。第二天,移除蔗糖溶液,在O