PCR拖尾及假阳性的原因及对策
拖尾 现象：产物在凝胶上呈Smear状态。 原因： 1.模板不纯 2.Buffer不合适 3.退火温度偏低 4.酶量过多 5.dNTP、Mg2+浓度偏高 6.循环次数过多 对策： 1.纯化模板 2.更换Buffer 3.适当提高退火温度 4.适量用酶 5.适当降低dNTP和镁离子的浓度 6.减少循环次数 假阳性 现象：空白对照出现目的扩增产物 原因： 靶序列或扩增产物的交叉污染 对策： 1.操作时应小心轻柔，防止将靶序列吸入加样枪内或溅出离心管外； 2.除酶及不能耐高温的物质外，所有试剂或器材均应高压消毒。所用离心管 及加样枪头等均应一次性使用。 3.各种试剂最好先进行分装，然后低温贮存......阅读全文
PCR拖尾及假阳性的原因及对策
拖尾 现象：产物在凝胶上呈Smear状态。 原因： 1.模板不纯 2.Buffer不合适 3.退火温度偏低 4.酶量过多 5.dNTP、Mg2+浓度偏高 6.循环次数过多 对策： 1.纯化模板 2.更换Buffer 3.适当提高退火温度 4.适量用酶 5.适当降低dNTP
血培养假阳性的原因及对策
色原法血培养系统采用比色计传感器和反射光原理，监测溶于培养基中的二氧化碳（CO2）的产生和存在状况。样本中存在的微生物在新陈代谢或分解糖类过程中产生CO2导致培养基酸碱度（PH）改变，从而导致培养瓶底部的半透硅胶材料（Liquid Emulsion Sensor ， LES）颜色变浅，通过照射感应器
血培养假阳性的原因及对策
色原法血培养系统采用比色计传感器和反射光原理，监测溶于培养基中的二氧化碳（CO2）的产生和存在状况。样本中存在的微生物在新陈代谢或分解糖类过程中产生CO2导致培养基酸碱度（PH）改变，从而导致培养瓶底部的半透硅胶材料（Liquid Emulsion Sensor ， LES）颜色变浅，通过
ELISA法测梅毒抗体假阳性原因分析及对策
梅毒血清学试验对梅毒的诊断有很大的价值，但它存在着一定的假阳性和假阴性情况，其结果一定要结合病史和临床、体格检查综合分析考虑。近年来梅毒在我国的发病率呈上升趋势。梅毒是由梅毒螺旋体感染引起的一种性传播性疾病之一，可侵犯全身各脏器，几乎可以引起全身所有组织器官的损害和病变，导致功能障碍。梅毒螺旋体抗体
PCR假阳性的原因分析及解决办法
假阳性是指出现的 PCR 扩增条带与目的靶序列条带一致，有时其条带更整齐，亮度更高。产生的原因有：①引物设计不合适：选择的扩增序列与非目的扩增序列有同源性，因而在进行 PCR 扩增时，扩增出的 PCR 产物为非目的序列；②靶序列太短或引物太短；③靶序列或扩增产物的交叉污染。解决方法有：操作轻柔，防止
PCR拖尾是什么原因
拖尾在生物专业词汇叫做smear。造成此的原因有多种。一般来讲，有以下几点：1，引物设计不佳，造成了拖尾现象。2，PCR中DNA浓度加的太多，造成了拖尾。3，mg2+浓度加的太高，造成了拖尾。4，跑胶电压不合适，造成了拖尾。5，退火温度不合适，造成了拖尾。这些都可能造成拖尾，请认真分析之。谢谢。
PCR拖尾是什么原因
拖尾在生物专业词汇叫做smear。造成此的原因有多种。一般来讲，有以下几点：1，引物设计不佳，造成了拖尾现象。2，PCR中DNA浓度加的太多，造成了拖尾。3，mg2+浓度加的太高，造成了拖尾。4，跑胶电压不合适，造成了拖尾。5，退火温度不合适，造成了拖尾。
PCR假阳性产生原因分析
假阳性是指出现的 PCR 扩增条带与目的靶序列条带一致，有时其条带更整齐，亮度更高。产生的原因有：①引物设计不合适：选择的扩增序列与非目的扩增序列有同源性，因而在进行 PCR 扩增时，扩增出的 PCR 产物为非目的序列；②靶序列太短或引物太短；③靶序列或扩增产物的交叉污染。解决方法有：操作轻柔，防止
峰拖尾原因分析及解决办法
1 衬管，色谱柱被污染或者衬管，色谱柱安装不当，存在死体积；改进方法：注射甲烷，峰若拖尾，则重新安装。2、进样器温度过高；3色谱柱柱头不平；改进方法：用金刚砂切割。4 固定相的极性指标与样品不匹配；改进方法：换匹配的柱子。5 样品流通路线中有冷井；改进方法：消除路线中的过低温度区。6衬管或色谱柱中有
如何消除PCR的拖尾
消除PCR拖尾的方法：1、纯化模板2、更换Buffer3、适当提高退火温度4、适量用酶5、适当降低dNTP和镁离子的浓度6、减少循环次数PCR拖尾产生的原因：1、模板不纯2、Buffer不合适3、退火温度偏低4、酶量过多5、dNTP、Mg 2*浓度偏高6、循环次数过多
如何消除PCR的拖尾
消除PCR拖尾的方法：1、纯化模板2、更换Buffer3、适当提高退火温度4、适量用酶5、适当降低dNTP和镁离子的浓度6、减少循环次数PCR拖尾产生的原因：1、模板不纯2、Buffer不合适3、退火温度偏低4、酶量过多5、dNTP、Mg 2*浓度偏高6、循环次数过多
如何消除PCR的拖尾
消除PCR拖尾的方法：1、纯化模板2、更换Buffer3、适当提高退火温度4、适量用酶5、适当降低dNTP和镁离子的浓度6、减少循环次数PCR拖尾产生的原因：1、模板不纯2、Buffer不合适3、退火温度偏低4、酶量过多5、dNTP、Mg 2*浓度偏高6、循环次数过多
如何消除PCR的拖尾
消除PCR拖尾的方法：1、纯化模板2、更换Buffer3、适当提高退火温度4、适量用酶5、适当降低dNTP和镁离子的浓度6、减少循环次数PCR拖尾产生的原因：1、模板不纯2、Buffer不合适3、退火温度偏低4、酶量过多5、dNTP、Mg 2*浓度偏高6、循环次数过多
如何消除PCR的拖尾
消除PCR拖尾的方法：1、纯化模板2、更换Buffer3、适当提高退火温度4、适量用酶5、适当降低dNTP和镁离子的浓度6、减少循环次数PCR拖尾产生的原因：1、模板不纯2、Buffer不合适3、退火温度偏低4、酶量过多5、dNTP、Mg 2*浓度偏高6、循环次数过多
PCR－反应出现假阳性结果原因
1 ) 引物设计不合适： 选择的扩增序列与非目的扩增序列有同源性，因而，在进行PCR扩增时，扩增出的PCR产物为非目的性的序列。靶序列太短或引物太短，容易出现假阳性。需重新设计引物。 2 ) 靶序列或扩增产物的交叉污染： 这种污染有两种原因： 一是整个基因组或大片段的交叉污染，导致假
气相色谱峰拖尾原因分析及处理方法
气相色谱峰拖尾原因分析及处理方法每个实验猿的实验生涯，总会遇到那么n次色谱峰拖尾。那么色谱峰为什么会拖尾呢？是柱子坏了？还是操作失误？一般处理气相色谱峰拖尾问题时总结成一句话就是：XXX样品在XXX色谱柱拖尾啦，什么原因？1.活性组分拖尾极性或活性化合物容易被样品流经途径中的活性位点吸附而呈现出拖尾
PCR仪PCR结果出现假阳性是什么原因？
假阳性假阳性是指出现的 PCR 扩增条带与目的靶序列条带一致，有时其条带更整齐，亮度更高。产生的原因有：①引物设计不合适：选择的扩增序列与非目的扩增序列有同源性，因而在进行 PCR 扩增时，扩增出的 PCR 产物为非目的序列；②靶序列太短或引物太短；③靶序列或扩增产物的交叉污染。解决方法有：操作轻柔
基因扩增PCR的扩增结果假阳性的原因
出现的PCR扩增条带与目的靶序列条带一致,有时其条带更整齐,亮度更高。 引物设计不合适:选择的扩增序列与非目的扩增序列有同源性,因而在进行PCR扩增时,扩增出的PCR产物为非目的性的序列。靶序列太短或引物太短,容易出现假阳性。需重新设计引物。 靶序列或扩增产物的交叉污染:这种污染有两种原因:一是整个
峰形后拖尾的原因
[柱物理损坏] 色谱柱有物理损坏是造成峰形拖尾的根源。*的解决方法就是更换新柱。[柱内填料污染] 流动相和样品中的杂质是色谱柱主要污染源。 流动相所用的各种溶剂至少是分析纯，尽量使用色谱纯试剂。流动相所用的水zui好是超纯水或全玻璃器皿双蒸水。用前先用0.45um溶
什么是PCR假阳性？
假阳性是指出现的 PCR 扩增条带与目的靶序列条带一致，有时其条带更整齐，亮度更高。产生的原因有：①引物设计不合适：选择的扩增序列与非目的扩增序列有同源性，因而在进行 PCR 扩增时，扩增出的 PCR 产物为非目的序列；②靶序列太短或引物太短；③靶序列或扩增产物的交叉污染。解决方法有：操作轻柔，防止
RNA电泳条带拖尾原因
提得RNA溶液降解，有DNA污染。需要处理耗材，台面，电泳槽，仪器的RNA酶污染，防止RNA降解，外源RNA酶清除剂，能有效替代致癌物DEPC使用，能够高效清除各种外源RNA酶，如RNase H,RNase T等。
PCR假阴性的原因分析及解决办法
假阴性是指不出现特异扩增带。可能原因：引物设计不合理，酶失活或酶量不足，模板量太少，退火温度不合适，循环次数过少，产物未及时电泳检测等。解决方法有：重新设计引物，增加酶量或调换酶，增加模板量，调整退火温度，增加循环次数，及时检测扩增产物，一般在 48h 以内进行。
HPLC造成峰拖尾的原因分析
a.筛板阻塞；反冲色谱柱、更换进口筛板b.色谱柱塌陷；填充色谱柱c.有干扰物质的存在；使用更长的色谱柱、改变流动相或更换色谱柱e.流动相PH值不合适；调整PH值，对于碱性化合物，低PH值更有利于得到对称峰f.样品与填料表面的溶化点发生反应；加入离子对试剂或碱性挥发性修饰剂或更改色谱柱
PCR污染及解决对策
聚合酶链反应(polymerase chain reaction, PCR)是一种选择性体外扩增DNA或RNA片段的方法，在微生物感染的诊断中具有重要的价值。在PCR扩增过程中，扩增的DNA产量是呈指数上升的，经过n个循环的扩增，一个DNA分子的产量便达到2n个拷贝。PCR产物一般为1013拷贝/
为什么pcr会有不同程度的拖尾
模板浓度太高了,把模板稀释10倍,100倍试试看,可以找到最合适的浓度,或者减少扩增的循环数,减个10个循环
什么是菌落pcr假阳性
利用菌落作为模板进行PCR扩增，验证该菌落里是否带有目标片段。但是由于PCR是一个级联放大的过程，所以即使菌落中不含有目标片段，而是菌落表面沾有一部分之前连接，转化中用的目标DNA，也会导致PCR获得扩增条带，从而误认为这个菌落已经带有了目标片段，称之为假阳性。可以通过提质粒酶切，或者测序验证，排除
气相色谱仪分析中峰拖尾的原因及处理方法
气相色谱仪分析中峰拖尾的原因及处理方法：一、可能原因：衬管和色谱柱被污染，有活性点。 处理方法：清洗，更换（如有必要）。二、可能原因：衬管和色谱柱安装不当，存在死体积。 处理方法：重新安装。三、可能原因：色谱柱柱头不平。 处理方法：用金刚砂切割，使之平。四、
western转膜后marker拖尾原因
western转膜有时候marker深，有时候浅是很正常的事情因为不同批次转膜的时候，电压电流缓冲液温度等等条件不可能完全保持一致，在各种条件变化的情况下，很容易造成批次间的差异，具体表现就是有时候marker深，有时候浅所以western转膜有时候marker深，有时候浅是很正常的事情
总结气相色谱拖尾可能原因
气相色谱拖尾可能的原因： 1) 汽化管破损或未安装好，使得样品只能以拖尾的形式进入色谱柱； 2) 汽化温度偏低，样品未完全汽化； 3) 汽化室被样品中高沸点杂质，或隔垫污染物污染； 4) 载气流量偏低； 5) 进样量过大； 6) 进样口泄露，如进样隔垫泄露； 7) 色谱柱安装不正确
PCR的假阳性和假阴性如何解释
假阳性假阳性是指出现的 PCR 扩增条带与目的靶序列条带一致，有时其条带更整齐，亮度更高。产生的原因有：①引物设计不合适：选择的扩增序列与非目的扩增序列有同源性，因而在进行 PCR 扩增时，扩增出的 PCR 产物为非目的序列；②靶序列太短或引物太短；③靶序列或扩增产物的交叉污染。解决方法有：操作轻柔