杂交和放射自显影
固定于滤膜上的RNA的预杂交、杂胶及淋洗等条件，与DNA杂交的相应条件基本相同。现简述如下1）用下列两种溶液之一进行预杂交，时间1－2小时。若于42℃进行，应采用。50％甲酰胺5xSSPE2xDenhardt试剂0.1％SDS若于68℃进行，应采用：6xSSC2xDenhardt试剂0.1％SDS 2）在预杂交液中加入变性的放射性标记探针，如欲检测低丰度mRNA， 所用探针的量至少为0.1μg，其放射性比活度应大于2x108计数/（分．μg）在适宜的温度条件下继续温育16-24小时。切记RNA只与双链DNA中一条单链互补，因此如用单链探针， 则必须是能与RNA互补的一条单链。 3）用1xSSC、0.1％SDS于室温洗漠20分钟， 随后用0.2xSSX、 0.1％SDS于68℃洗膜3次每次20分钟。 4）用X光片（......阅读全文
原位杂交和核酸杂交是一种吗
核酸杂交方法是一种分子生物学的标准技术,用于检测DNA或RNA分子的特定序列（靶序列）.经典的核酸杂交方法是将DNA或RNA先转移并固定到硝酸纤维素或尼龙膜上,与其互补的单链DNA或RNA探针用放射性或非放射性标记,在膜上杂交时,探针通过氢键与其互补的靶序列结合,洗去未结合的游离探针后,经放射自显影
凝胶放射自显影的定义
中文名称凝胶放射自显影英文名称gel autoradiograph定 义对拟分析的样品(如蛋白质、多肽、核酸等)经放射性核素标记后，做凝胶电泳分离，再用感光胶片或磷屏等显示凝胶上的放射性进行定位或定量分析的技术。应用学科生物化学与分子生物学（一级学科），方法与技术（二级学科）
方案27.2－放射自显影术
方案27.2 放射自显影术 实验材料 DPX 试剂、试剂盒
放射自显影的工作原理
在应用这一技术时先把含有放射性同位素的化合物引入生物体内，经过一定时间后，将其组织取下，制成切片或涂片，然后将其与照相乳胶相接触。由于放射性元素所产生的α粒子和β粒子能和可见光一 对照相乳胶发生作用，用普通照相技术进行显影和定影，即可得到放射性同位素的正确位置。 并根据放射性元素对乳胶作用的黑化程度
什么是放射自显影术？
免疫放射自显影术（autoradiograph)旨在追踪某些物质在体内、组织或细胞中的分布与代谢径路。首先，将放射性同位素或放射性同位素的标记物注入动物体内或加入培养基中，间隔一定时间取材，制成标本（如切片），在暗室中于标本的上面涂以液体原子核乳胶，置暗处曝光，数日后再经显影和定影处理，或经染色
放射自显影技术的概述
放射自显影技术是利用放射性同位素的电离辐射对乳胶（含AgBr或AgCl）的感光作用，对细胞内生物大分子进行定性、定位与半定量研究的一种细胞化学技术。放射自显影技术（radioautography；autoradiography）用于研究标记化合物在机体、组织和细胞中的分布、定位、排出以及合成、更
预杂交的定义和应用
中文名称预杂交英文名称prehybridization定 义在分子杂交实验之前对杂交膜上非样品区域进行封闭，用以降低探针在膜上的非特异性结合。封闭试剂成分主要是大量的非同源性的核酸或蛋白质等。应用学科生物化学与分子生物学（一级学科），方法与技术（二级学科）
Southern杂交分析原理和操作
【原理】Southern杂交是分子生物学的经典实验方法。其基本原理是将待检测的DNA样品固定在固相载体上,与标记的核酸探针进行杂交,在与探针有同源序列的固相DNA的位置上显示出杂交信号。通过Southern杂交可以判断被检测的DNA样品中是否有与探针同源的片段以及该片段的长度。一．基因组DNA的限制
消减杂交的概念和意义
消减杂交(subtractive hybridization,扣除杂交) 是指利用不同组织、细胞或不同状态下组织、细胞基因表达的差异性，并结合核酸杂交建立的克隆差异表达基因的技术。是差别杂交的改进，用过量的参照细胞的mRNA 或CDNA 与目的细胞的CDNA 或mRNA (目的序列) 杂交，形成的R
杂交的定义和技术应用
杂交（hybridization；cross；crossing）定义：两条单链DNA或RNA的碱基配对。遗传学中经典的也是常用的实验方法。通过不同的基因型的个体之间的交配而取得某些双亲基因重新组合的个体的方法。一般情况下，把通过生殖细胞相互融合而达到这一目的过程称为杂交；而把由体细胞相互融合达到这一
核酸杂交的概念和意义
核酸杂交（Hybridization）： 互补的核苷酸序列（DNA与DNA、DNA与RNA、RNA与RNA等）通过Watson-Crick碱基配对形成非共价键，从而形成稳定的同源或异源双链分子的过程，称为核酸分子杂交技术，又称核酸杂交。
核酸的变性、复性和杂交
变性在一定理化因素作用下，核酸双螺旋等空间结构中碱基之间的氢键断裂，变成单链的现象称为变性（denaturation）。引起核酸变性的常见理化因素有加热、酸、碱、尿素和甲酰胺等。在变性过程中，核酸的空间构象被破坏，理化性质发生改变。由于双螺旋分子内部的碱基暴露，其A260值会大大增加。A260值的增
在原位杂交中－为什么rna可以和dna杂交
因为碱基互补配对啊。RNA不光和DNA杂交，还可以和RNA杂交。RNA原位核酸杂交又称RNA原位杂交组织化学或RNA原位杂交。该技术是指运用cRNA或寡核苷酸等探针检测细胞和组织内RNA表达的一种原位杂交技术。其基本原理是：在细胞或组织结构保持不变的条件下，用标记的已知的RNA核苷酸片段，按核酸杂交
流式荧光杂交法和PCR反向点杂交法优劣对比
流式是检测相对荧光强度的，最后的信号高低取决于检测时机器PMT上所施加的电压。而PCR是核酸体外扩增的一种手段。所以两者是不同的哟。。
放射自显影[术]的技术特点
中文名称放射自显影[术]英文名称autoradiography;radioautography定 义利用放射性同位素所产生的电离辐射对感光乳胶的氯化银晶体而产生潜影，再经过显影定影处理，把感光的氯化银还原成黑色的银颗粒，即可根据这些银颗粒的部位和数量分析出标本中放射性示踪物的分布，以进行定位和定量
关于放射自显影的基本介绍
放射自显影即利用放射性可使照像乳胶和软片感光的原理，对标本中放射性分子进行定位的技术。放射性同位素在衰变过程中发射出电离辐射，射线可使照像乳胶感光。乳胶同标本接触后，放射性物质存在的部位溴化银胶体被还原，产生银粒子沉淀，从而显示出放射性物质存在的部位。
放射自显影技术的工作原理
其原理是将放射性同位素（如14C和3H）标记的化合物导入生物体内，经过一段时间后，将标本制成切片或涂片，涂上卤化银乳胶，经一定时间的放射性曝光，组织中的放射性即可使乳胶感光。然后经过显影、定影处理显示还原的黑色银颗粒，即可得知标本中标记物的准确位置和数量，放射自显影的切片还可再用染料染色，这样便
放射自显影的操作方法
放射自显影操作的第一步是制备放射性同位素标记的化合物，通常是选用发射低能β射线的同位素，如14C、3H等。然后，使标记化合物被生物组织或细胞吸收，参加生物代谢。把含有标记化合物的组织做成切片，置于载片上，再把切片表面上涂一薄层乳胶，在暗盒中放置一定时间，进行放射性“暴光”。最后按处理照像底片过程，经
分子杂交仪的结构和功能
根据实验的需求，可以将分子杂交仪分为5大类。 1、是用于大容量的分子杂交仪; 2、用于Southern 或者 Northern技术点杂交的杂交仪; 3、用于小容量的核酸杂交仪; 4、微孔板原位杂交仪; 5、载玻片原位杂交和平板杂交仪; 6、Western 杂交仪。 原位分子杂交，斑点分
Northern印迹和总RNA杂交实验
试剂、试剂盒 甲醛凝胶溶液RNA 电泳缓冲液仪器、耗材 凝胶模梳齿凝胶用具实验步骤 1. 用肥皂和水彻底清洗凝胶模，梳齿和凝胶用具。2. 准备甲醛凝胶溶液。甲醛凝胶溶液（300 ml 1％ 琼脂糖凝胶）：琼脂糖，3.0 g10x RNA 电泳缓冲液，30 ml Milli-Q 或用玻璃器皿蒸
分子杂交的原理和技术特点
不同的DNA片段之间，DNA片段与RNA片段之间，如果彼此间的核苷酸排列顺序互补也可以复性，形成新的双螺旋结构。这种按照互补碱基配对而使不完全互补的两条多核苷酸相互结合的过程称为分子杂交。分子杂交（molecular hybridization）确定单链核酸碱基序列的技术。其基本原理是待测单链核酸与
Northern印迹和总RNA杂交实验
Northern印迹分析杂交和放射自显影试剂、试剂盒甲醛凝胶溶液 RNA 电泳缓冲液
Northern印迹和总RNA杂交实验
Northern印迹分析 杂交和放射自显影 试剂、试剂盒 甲醛凝胶溶液 RNA 电泳缓冲液
杂交瘤细胞和重组抗体
在过去的二十五年里，利用杂交瘤细胞生产了成千上万的鼠单克隆抗体。人们用同样的技术从转基因鼠中克隆人类的抗体，并设计了全长型抗体和重组片段，它们可以被用于多种诊断和治疗。而且如果他们能在哺乳动物细胞，牛奶及植物中表达，就可以大量获得。 一个世纪以前，Paul Ehrlich提出了著名的侧链理论来解
消减杂交的方法和应用介绍
中文名称消减杂交英文名称subtracting hybridization定 义利用不同组织、细胞或不同状态下组织、细胞基因表达的差异性，并结合核酸杂交建立的克隆差异表达基因的技术。一般是将一种细胞的互补DNA(cDNA)或信使核糖核酸(mRNA)与第二种细胞cDNA或mRNA相互杂交，其不被杂交
Southern杂交技术的方法和步骤
Southern杂交可用来检测经限制性内切酶切割后的DNA片段中是否存在与探针同源的序列,它包括下列步骤:(1) 酶切DNA, 凝胶电泳分离各酶切片段,然后使DNA原位变性。(2) 将DNA片段转移到固体支持物(硝酸纤维素滤膜或尼龙膜)上。(3) 预杂交滤膜,掩盖滤膜上非特异性位点。(4) 让探针与
原位杂交的定义和应用
原位杂交是指将特定标记的已知顺序核酸为探针与细胞或组织切片中核酸进行杂交，从而对特定核酸顺序进行精确定量定位的过程。原位杂交可以在细胞标本或组织标本上进行。
双杂交系统的定义和应用
中文名称双杂交系统英文名称two-hybrid system定 义分别带有转录激活功能域与DNA结合功能域的两个杂合蛋白在酵母细胞内相互作用重组成转录因子，可报告基因转录表达，从而检测蛋白质之间相互作用的一种实验系统。应用学科遗传学（一级学科），基因组学（二级学科）
抑制消减杂交的概念和意义
抑制消减杂交(suppression subtractive hybridization,SSH) 是建立在抑制PCR 与消运用杂交二级动力学原理，减杂交技术相结合的基础上的更简单快速的分离差异基因的方法。即丰度高的单链DNA 在退火时产生同源杂交的速度快于丰度低的单链DNA，使原来在丰度上有差别的
原位杂交技术原理和应用
原理： 荧光，又作“萤光”，是指一种光致发光的冷发光现象。当某种常温物质经某种波长的入射光（通常是紫外线或X射线）照射，吸收光能后进入激发态，并且立即退激发并发出比入射光的的波长长的出射光（通常波长在可见光波段）；而且一旦停止入射光，发光现象也随之立即消失。具有这种性质的出射光就被称之为荧光。