RNAi载体pSIRENDNRVector
Restriction Map and Cloning Site of the RNAi-Ready pSIREN-DNR Vector. Unique restriction sites are in bold. RNAi-Ready pSIREN-DNR is provided as a linearized vector digested with BamH I and EcoR I. Nucleotides in gray were removed during linearization. This linearized vector is ready for ligation of an appropriate siRNA containing BamH I and EcoR I overhangs. RNAi-Ready pSIREN-DNR is provided......阅读全文
DNA转化实验指导4
2B. Transformation 1. Preparation of electrocompetent DH5a cells: autoclave 4 baffled 1 liter flasks containing 500 mL LB. Remove a 1 mL aliquo
siRNA－Design－Guidelines
Using siRNA for gene silencing is a rapidly evolving tool in molecular biology. There are several methods for preparing siRNA, such as chemical synthe
How－to－build－a－BAC－library
Introduction The most important aspect of our cloning vectors is that they are based on the E. coli F-factor replicon. It allows for strict
分子克隆蛋白表达实验指南（四）
7. PCR产物与TA载体连接 pGEM-T vector is T-tailed at the insert site. To improve the ligation efficiency, it is recommended PCR product be A-tailed. +A s
Universal－RiboClone®－cDNA－Synthesis－System
Universal RiboClone® cDNA Synthesis SystemThe Universal RiboClone® cDNA Synthesis System contains the reagents required for the synthesis of double-st
细菌人工染色体
The Construction of Bacterial Artificial Chromosome (BAC) Libraries (complete manuscript) (Clemson University Genomics Institute) Construction of BAC
如何查找质粒图谱
方法一：使用Vector NT 软件 做分子实验，经常和不同的质粒打交道，了解各种质粒的图谱信息是必需的，invitrogen公司的这款软件绝对是分子生物学虫子们的福音，要想对质粒图谱了解更直观，安装这款软件是非常必要的。这款软件的软件包里面会包括invitrogen公司的所有质粒图谱信息和
Hematopoietic－Stem－Cell－Targeting－with－Surface1
Hematopoietic Stem Cell Targeting with Surface-Engineered Lentiviral VectorsEls Verhoeyen and François-Loïc CossetAdapted from Gene Transfer: Delivery
cDNA文库组标准流程6
2．pBlueScriptII的双酶切消化 1．以如下体系进行EcoRI酶切： pBSK(+) X µl（6µg） ddH2O 174-X µl 10×Buffer E 20 µl 混匀，加入限制性内切酶： EcoRI （10U/ µl） 6 µl 总体积为200 µl。 2．轻弹管壁或用枪头轻轻吹
7年分子克隆经验总结
做了快7年的分子克隆，从加样加不好，到现在轻松PCR，我想分子生物学这块还是有很多经验可以分享一下的。或许很多人会说分子克隆过程中出现问题最多的大概就是连接了，大家抱怨的也最多，我也陷入在个步骤上很久。经过长时间的摸索我在连接这个问题上有一些体会，我认为连接的问题多集中在连接的体系、DNA的用量、v
重组DNA的分离、克隆与测序实验手册5
C. Random fragment end-repair, size selection, and phosphorylationSince both sonicated and nebulized DNA fragments usually contain single-stranded end
基因载体的相关介绍
基因载体本身是DNA,除根据其来源分为质粒载体、噬菌体载体、病毒载体等外，还可以根据它们的主要用途分为克隆载体与表达载体。根据它们的性质分为温度敏感型载体(temperature sensitive vector)、融合型表达载体、非融合型表达载等。 基因载体(vector) 的作用是运载目的
慢病毒转染肝细胞方法
Lentivirus Transduction of Hematopoietic CellsMing-Jie Li and John J. RossiDivision of Molecular Biology, Beckman Research Institute of the City of Ho
Phosphatasing－with－Shrimp－Alkaline－Phosphatase－(S.A.P.)
Phosphatasing with Shrimp Alkaline Phosphatase (S.A.P.)Use to prevent linearized vector plasmid from recircularizing.The phosphatase from shrimp is ea
用DAPI进行细胞染色
用DAPI进行细胞染色DAPI的配置Stock solution of 1mg/ml in ddH2O; working solution of 0.25mg/ml to 50mg/ml in ddH2O or PGM. 1.Place sample on slide. 2.Add a few dr
RNAi相关的名词解释[英文]
Argonaute - A family of proteins containing multiple domains and involved in RNA interference (RNAi). Argonatue is the main component of RNAi effector
病毒介导基因转移
病毒介导基因转移：前述的化学和物理方法都是通过传染方式基因转移。病毒介导基因转移（viral mediatedgene transfer）是通过转换方式完成基因转移，即以病毒为载体（vector），将外源目的基因通过基因重组技术，将其组装于病毒上，让这种重组病毒去感染受体宿主细胞，这种病毒称为病毒运
病毒介导基因转移技术介绍
病毒介导基因转移：前述的化学和物理方法都是通过传染方式基因转移。病毒介导基因转移（viral mediatedgene transfer）是通过转换方式完成基因转移，即以病毒为载体（vector），将外源目的基因通过基因重组技术，将其组装于病毒上，让这种重组病毒去感染受体宿主细胞，这种病毒称为病毒运
合成孔径雷达原理（五）
Lay OverThe direction of relief displacement is different for optical and radar systems. A camera sees the relief displaced away from the nadir po
CIP－Treatment
set up the following reaction:CIP RxnH2O7.8 ml10x cip rxn buffer2.0 mlDNA(e.g; 3 kb vector; 0.2 mg/ml; 2 mg total)10.0 ml(1 u/ml) CIP0.2 mltotal20.0 m
pEGFPC2质粒图谱及信息
多克隆位点区（MCS）Restriction Map and Multiple Cloning Site of pEGFP-C2. (Unique restriction sites are in color or bold.) Note that the Eag I site is not uni
VideometerLab多光谱成像在玛咖掺伪定性鉴别和定量分析...
VideometerLab多光谱成像在玛咖掺伪定性鉴别和定量分析的应用最近科学家利用videometerLab多光谱成像系统发表了题为Qualitative Identification and Quantitative Analysis of Maca Adulteration Based on
pEGFPC1质粒图谱及信息
pEGFP-C1Restriction Map and Multiple Cloning Site of pEGFP-C1. (Unique restriction sites are in bold.) The Xba I and Bcl I sites (*) are methylated in
General－Cloning－Protocols
Large Scale Preps: (See Large scale plsasmid prep protocol for more details)Cultures: Inoculate a 5 mL LB/Amp (50 - 100 µg/mL) culture in early a.m. w
Gateway的原理
Gateway也可以被视为一种克隆操作平台：把目的基因克隆到入门载体（Entry Vector）后，就不用依赖限制性内切酶，而靠载体上存在的特定重组位点和重组酶，高效、快速地将目的基因克隆到其它的受体载体（Destination Vector，目的载体）上。Gateway的原理也是建立在噬菌体DNA
腺相关病毒（AAV）在动物实验中的应用（二）
三、肝脏AAV2、AAV5、AAV7 和 AAV8，其中 AAV7 和 AAV8 的效率是 AAV2 的 10-100 倍。注射部位常选择门静脉、外周静脉和尾静脉。注射病毒滴度一般选择 8×10^10-2×10^12(GC/kg)（人、灵长类）；1×10^11 GC/只鼠，稀释成 50-10
酵母人工染色体
· Easy YAC Preparation Method (Andrew Davies,Shaw lab)· Screening YAC libraries (Donis Keller Lab)This is a method for screening YAC l
TA克隆常见问题分析
现象可能原因解决方案 转化后无菌落生长 感受态细胞已经失效用pUC18质粒进行转化，确认细胞的感受态效率。1ng pUC18质粒至少应得到1000个以上的转化子。如有问题，重新制备感受态细胞。 平板所用抗性不对pBS-T载体为amp抗性，工作浓度 100 ug/ml 连接中使用了不恰当的vector
一步实现单拷贝到高拷贝的转换——CopyControl克隆技术
单拷贝克隆产量低，高拷贝克隆稳定性差，一直让研究者在克隆 表达时难以选择。蛋白的表达就有诱导表达系统，可以实现人为地控制蛋白的表达时间和表达量——现在连质粒的拷贝数可以借助诱导的方法来人为控制了！Epicentre的ZL技术——CopyControl克隆 系统能够让您共享单拷贝和高拷贝的
基因治疗创新多重技术组合严控腺相关病毒（AA...（三）
灵敏度及线性将变性的AAV2从〜3 x 1012 GC/mL连续滴定至〜3 x 1011 GC/mL（图6）以建立方法的灵敏度。该滴定范围内观察到很强的线性相关性，R2为0.9956。监测AAV颗粒稳定性对完整的AAV样品进行温度压力测试，以确定是否可以使用Maurice监测病毒载体的稳定性或衣壳蛋