CIPTreatment
set up the following reaction:CIP RxnH2O7.8 ml10x cip rxn buffer2.0 mlDNA(e.g; 3 kb vector; 0.2 mg/ml; 2 mg total)10.0 ml(1 u/ml) CIP0.2 mltotal20.0 mlincubate for 60 min at 37°Cadd 1.14 ml 0.2 M trinitriloacetic acid/NaOH pH 8.0heat inactivate for 10 min at 70°Cphenolize 3xdo an EtOH precipitation and take up pellet in 10 ml H2O (0.2 mg/ml) Solutions:10x CIP Buffer:0.5 M Tris-HCl pH 8.5, 1 mM EDTA, pH 8.5 (supp......阅读全文
CIP－Treatment
set up the following reaction:CIP RxnH2O7.8 ml10x cip rxn buffer2.0 mlDNA(e.g; 3 kb vector; 0.2 mg/ml; 2 mg total)10.0 ml(1 u/ml) CIP0.2 mltotal20.0 m
MITOMYCIN－C－TREATMENT－OF－PMEFs
Cultures to be treated should be sub confluent ie actively growing.1. Add 1/20 volume Mitomycin C (200 ug/ml 10 ug/ml), to culture and incubate at 37
RNAse－A－Treatment－of－Mouse－Cells
IntroductionRNAse A treatment of permeabilized cells followed by immunostaining is a method which allows to show if the localization of a protein into
Formaldehyde－Treatment－of－Tissue－Culture－Hoods
You will need:-12g Potassium Permanganate 6g Crushed paraformaldehyde1) Set the hood so that it can vent outside.2) Mix the two chemicals above togeth
RNase－and－DEPC－Treatment:－Fact－or－Laboratory－Myth
Researchers are usually trained in RNA isolation and analysis methods by one another or by technical manuals. Experimental procedures are often not qu
DNAse－posttreatment－for－nuclear－antigens
Rationale: The use of DNAse to improve nuclear antigen staining has been published long before the AR era 1, 2.DNAse treatment is currently suggested
Effect－of－UV－Treatment－on－Early－Development－of－Sea－Urchin－Embryos
Objective:To test the effects of UV radiation at 254nm on Sea Urchin embryo development after radiation at the 2-cell stage.Background:Sea Urchins exh
microScan3－CIP－Safety安全扫描仪介绍
CIP Safety 安全网络集成服务什么是CIP SafetyCIP Safety是一系列高度集成的安全服务，利用通用工业协议(CIP)网络的下层通讯堆栈，可以将安全数据从数据源传送到目的地。CIP Safety是独立于网络的，最初的版本是用于DeviceNet上的。现在经过拓展支持Eth
发酵罐在线清洗（CIP）系统基础知识
一个具备工业使用的 CIP 系统应该具备以下特性: 通过消耗最少的水和化学药剂、消耗最少的电、蒸汽等成本，产生最小量的污水并实现剩余化学药剂的回收; 最大限度地避免 CIP 系统人为的操作失误，确保可重复的生产操作，而使产品质量产生的偏差达到最小; 可以在保证产品质量的同时缩短不同批次间
[3H]－Choline－Labeling－and－TNF－Treatment－of－HL60－Cells
1) Grow cells to a density of 5-8 X 105 cells/ml in RPMI 1640 containing serum.2) Pellet cells and wash 1 time with room temperature PBS.3) Resuspend
冻干机抽真空速率测试和在线清洗CIP覆盖率介绍
1、冻干机抽真空速率测试 (1)启动冻干机。根据冻干产品工艺需求设置冻干机真空度为25Pa，并进行抽真空测试，需3次重复测试。 (2)合格标准。真空度达到25 Pa以下，所需时间≤40 min（参考药用真空冷冻干燥机行业标准JB/T20032 -2012， 同时结合产品工艺要求）。 2、冻
DNA的酶学操作
DNA的酶学操作DNA Modifying Enzymes (Michael Blaber)Introduction to bacterial restriction/modification system. It provides very useful background knowledge
Erythropoietin－mediated－neuroprotection－through－NFkB
Erythropoietin (Epo) is most commonly known as the cytokine secreted by the kidneys that stimulates red blood cell production and is used as a drug fo
用碱性磷酸酶进行DNA片段的去磷酸化
实验材料 牛小肠碱性磷酸酶 虾碱性磷酸酶 蛋白酶 K 限制性内切核酸酶 DNA 样品 试剂、试剂
大型发酵罐配备清洁除菌系统有什么特点和好处
大型发酵罐在使用过程中必须认真考虑如何才能符合可验证的清洁除菌要求。所以在规划时必须考虑到的很重要的一点就是如何能够将无需拆卸的、自动的、就地清洁除菌系统（也叫CIP系统）设计到生产运行中。清洁除菌系统所需的流量和压力取决于发酵罐的喷淋装置和管线尺寸所决定的。静止喷头是最常用的喷淋装置；但是，为了对
用碱性磷酸酶进行DNA片段的去磷酸化
实验材料牛小肠碱性磷酸酶虾碱性磷酸酶蛋白酶 K限制性内切核酸酶DNA 样品试剂、试剂盒氯仿EDTA乙醇酚氯仿SDS醋酸钠TETris-ClCIP 去磷酸化缓冲液SAP 去磷酸化缓冲液仪器、耗材水浴或加热板实验步骤一、材料1. 缓冲液和溶液氯仿EDTA ( 0.5 mol/L，pH 8.0) 或 EG
用碱性磷酸酶进行DNA片段的去磷酸化
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Dephosphorylation－...
实验概要The method provides a protocol for removal of phosphate groups from proteins, before or after blotting. To demonstrate the specificity of an ant
DEPHOSPHORYLATION－OF－LINEARIZED－DNA
DEPHOSPHORYLATION OF LINEARIZED DNAALKALINE PHOSPATASE(CIP) DIGESTIONDigestion of protruding 5'-ends1. Precipitate digested DNA and resuspend in a
克隆中载体的处理和去磷酸化
克隆成功与否,除与连接方式以及载体选择有关外，载体的处理也是一个重要环节。为了提高连接效率，处理载体时应注意以下几点： (1)应加入常用量5～10倍的内切酶水解载体，以保证载体被完全酶切； (2)如用双酶切割载体，则必须电泳回收载体片段，除去双酶切所产生的小DNA片段； (3)如粘端连接,
克隆中载体的处理和去磷酸化
克隆成功与否,除与连接方式以及载体选择有关外,载体的处理也是一个重要环节。为了提高连接效率,处理载体时应注意以下几点:(1)应加入常用量5~10倍的内切酶水解载体,以保证载体被完全酶切;(2)如用双酶切割载体,则必须电泳回收载体片段,除去双酶切所产生的小DNA片段;�(3)如粘端连接,单酶切处理过的
Dephosphorylation－of－DNA
De-phosphorylation of DNAThe preferred method of de-phosphorylation uses the buffer system described by Pharmacia for most of their restriction endonu
克隆中载体的处理和去磷酸化方法
克隆成功与否,除与连接方式以及载体选择有关外，载体的处理也是一个重要环节。为了提高连接效率，处理载体时应注意以下几点：(1)应加入常用量5～10倍的内切酶水解载体，以保证载体被完全酶切；(2)如用双酶切割载体，则必须电泳回收载体片段，除去双酶切所产生的小DNA片段；(3)如粘端连接,单酶切处理过的载
PCR仪得不到全长的5’RACE－PCR产物
*CIP反应后的RNA降解产生了新的带有5’磷酸的断裂模板，可以同GeneRacer RNA Oligo连接。一定要小心操作，保证RNA无降解。 *CIP脱磷酸不完全，可以增加反应中CIP的量或减少RNA的量。 *PCR产生了杂带，并不是真正的连接产物，可以使用上述建议优化PCR。
动物所发现雷公藤红素的直接靶点
肺癌是目前全球发病率最高的恶性肿瘤，病人预后很差，5年生存率仅为15%，因此发现新的治疗靶点并开发针对该靶点的小分子抑制剂对肺癌的治疗具有重要意义。 CIP2A(cancerous inhibitor of protein phosphatase 2A)是近年来发现的PP2A内源性癌性
Hypoxia－and－p53－in－the－Cardiovascular－system
Hypoxic stress, like DNA damage, induces p53 protein accumulation and p53-dependent apoptosis in oncogenically transformed cells. Unlike DNA damage, h
手性印迹表面增强拉曼散射检测技术获进展
原文地址：http://news.sciencenet.cn/htmlnews/2022/10/488309.shtm a) SERS-CIP检测策略示意图；b)含SERS标记物的SERS-CIP玻璃毛细管照片，识别区域用红色圆圈表示；c)在SERS-CIP上实现手性氨基酸识别检测原理
科学家发现新的“痛觉基因”－有望带来缓解疼痛新方法
最近，一个由英国剑桥大学科学家领导的国际研究小组识别出一种新基因PRDM12，对痛觉神经的产生和形成至关重要，可作为药物标靶，有助于开发出缓解疼痛的新方法。相关论文发表在最近的《自然·遗传学》杂志上。 据每日科学网25日报道，痛觉是进化过程中保留下来的一种预警机制，能警告生物环境中的危险和潜在
关于Ras2MAPK信号转导途径Rho/Rac通路的介绍
Rho家族蛋白质是小G蛋白的Ras超家族成员，其氨基酸序列大约有30%与Ras蛋白相同，三个主要的Rho蛋白是Cdc42,Rho,Rac.Cdc42刺激Rac,Rac接下来刺激Rho.然而，这个直线模型对于精确的信号转导通路来说过于简单，因为有证据显示交叉联系存在，例如Cdc42不通过Rac能影
西北农科大段金友团队开发新型抗菌微粒靶向病原体
作为与外部环境的主要接口，胃肠道代表了一个巨大的粘膜表面区域，容易受到肠道病原体的侵袭。由食源性沙门氏菌引起的沙门氏菌病是最常发生的肠道疾病之一。在全球范围内，每年约有1.53亿例胃肠炎和57,000例死亡。沙门氏菌病的典型症状，包括胃痉挛，恶心和急性腹泻，在食用受污染的食物或水后约6-72小时