基因载体的相关介绍
基因载体本身是DNA,除根据其来源分为质粒载体、噬菌体载体、病毒载体等外,还可以根据它们的主要用途分为克隆载体与表达载体。根据它们的性质分为温度敏感型载体(temperature sensitive vector)、融合型表达载体、非融合型表达载等。 基因载体(vector) 的作用是运载目的基因进人宿主细胞,使之能得到复制和进行表达。也就是说,离开染色体的外源DNA 不能复制,而插入到复制子(replicon) DNA 的外源DNA 可作为复制子的一部分在受体菌中进行复制,这种复制子就是外源基因的载体。复制子是指基因空间结构上独立的复制单位。 基因载体是把基因导入细胞的工具,它的作用是运载目的基因进入宿主细胞,使之能得到复制和进行表达。是分子生物学科尖端技术。......阅读全文
基因载体的相关介绍
基因载体本身是DNA,除根据其来源分为质粒载体、噬菌体载体、病毒载体等外,还可以根据它们的主要用途分为克隆载体与表达载体。根据它们的性质分为温度敏感型载体(temperature sensitive vector)、融合型表达载体、非融合型表达载等。 基因载体(vector) 的作用是运载目的
关于基因载体的分类相关介绍
基因载体,即gene delivery或gene vector,是作为基因导入细胞的工具。犹如火箭能把卫星射向九天一样,基因载体可以把目的基因送入靶细胞内,然后将目的基因释放出来,有的目的基因还可以整合到细胞核中,从而发挥目的基因的特定功能。 1. 基因载体是把基因导入细胞的工具,它的作用是①
关于载体蛋白的相关介绍
载体蛋白又称做载体(carrier)、通透酶(permease)或转运器(transporter)。能够与特异性溶质结合,通过自身构象的变化,将与它结合的溶质转移到膜的另一侧 载体蛋白,是多回旋折叠的跨膜蛋白质,它与被传递的分子特异结合使其越过质膜。其机制是载体蛋白分子的构象可逆地变化,与被转
腺相关病毒载体的基本介绍
腺相关病毒载体是利用天然存在的腺相关病毒某些特性经过基因工程改造后产生的一种可供人工转基因的载体。腺相关病毒(adeno-associated virus,AAV)是简单的非致病性单链DNA病毒,需要辅助病毒参与生活周期,辅助病毒通常为腺病毒(Ad)或者单纯疱疹病毒(HSV)。基因组两端为末端反
可视化基因载体的介绍
据介绍,微环DNA被认为是最具潜力的基因治疗载体,而如何实现微环DNA的高效递送以及载体非侵入性生物学信息的获取是当前亟待解决的问题。聚乙烯亚胺(PEI)作为阳离子基因传递载体,已广泛应用于生物医学研究。但由于高分子量PEI在提高基因转染效率的同时也增加了细胞毒性,其在体内的应用受到制约。如何实
关于基因表达载体的基本介绍
基因表达载体的构建(即目的基因与运载体结合)是实施基因工程的第二步,也是基因工程的核心。其构建目的是使目的基因能在受体细胞中稳定存在,并且可以遗传给下一代,同时,使目的基因能够表达和发挥作用。 基因工程(genetic engineering) 构成:启动子、终止子、标记基因、目的基因 又
腺相关病毒载体的基本构建介绍
1、AAV病毒的感染细胞 AAV载体对于骨骼肌、视网膜、肝细胞、心脏平滑肌细胞、神经元细胞、胰岛B细胞、关节滑膜细胞等具有良好的感染效果,而对于淋巴细胞、造血干细胞、神经胶质细胞、成纤维细胞等感染效果较差。 2、病毒的加样量 病毒量为10-10V.P/Cell时最佳。如果太低,基本检测不出
关于腺相关病毒载体的基本介绍
腺病毒相关病毒(adeno-associated virus,AAV)是一类单链线状DNA缺陷型病毒。其基因组DNA小于5 kb,无包膜,外形为裸露的20面体颗粒。AAV不能独立复制,只有在辅助病毒(如腺病毒、单纯疱疹病毒、痘苗病毒)存在时,才能进行复制和溶细胞性感染,否则只能建立溶源性潜伏感染
常用的基因转染技术病毒载体介绍
1、逆转录病毒载体 逆转录病毒为RNA病毒,它们的基因组编码在一条单链RNA上,病毒进入细胞通过逆转录作用,病毒RNA即转变为双链DNA分子,DNA进入细胞核并整合在细胞染色体中,这种整合的病毒称为原病毒。在原病毒的两端各有一长末端重复序列(LTR),LTR内侧还有为复制所必需的其他顺序,包括
腺相关病毒载体的基本信息介绍
腺相关病毒载体是利用天然存在的腺相关病毒某些特性经过基因工程改造后产生的一种可供人工转基因的载体。腺相关病毒(adeno-associated virus,AAV)是简单的非致病性单链DNA病毒,需要辅助病毒参与生活周期,辅助病毒通常为腺病毒(Ad)或者单纯疱疹病毒(HSV)。基因组两端为末端反
关于腺相关病毒载体的优缺点介绍
1、优点 在辅助腺病毒存在下,AAV可以高效定点整合至人染色体中;而现在的AAV载体已经不需要腺病毒辅助,不插入宿主的基因组,而是游离于宿主细胞基因之外,呈卫星状稳定表达。 腺相关病毒载体(AAV)体内的感染效率极高。不同血清型可以相对特异性的感染心脏,肝脏,骨骼肌等。 腺相关病毒是RG1
关于DNA重组的基因表达载体的介绍
将目的基因与运载体结合的过程,实际上是不同来源的DNA重新组合的过程。如果以质粒作为基因表达运载体, 首先要用一定的限制酶切割质粒,使质粒出现一个缺口,露出黏性末端。然后用同一种限制酶切断目的基因,使其产生相同的黏性末端(部分限制性内切酶可切割出平末端,拥有相同效果)。将切下的目的基因的片段插
关于基因克隆载体的基本信息介绍
把能够承载外源基因,并将其带入受体细胞得以稳定遗传的DNA分子称为基因克隆载体。 在转基因研究中,单独一个包含启动子、编码区和终止子的基因,或者组成基因的某个原件,一般是不容易进入受体细胞的,即使采用理化方法进入细胞后,也不容易在受体细胞内稳定维持。目的基因能否有效转入受体细胞,并在其中维持和
基因克隆的载体类型
①在宿主细胞中能保存下来并能大量复制,且对受体细胞无害,不影响受体细胞正常的生命活动。②有多个限制酶(Restriction enzymes)切点,而且每种酶的切点最好只有一个,如大肠杆菌pBR322就有多种限制酶的单一识别位点,可适于多种限制酶切割的DNA插入。③含有复制起始位点,能够独立复制;通
腺相关病毒的载体特点
安全性好对肌肉、肝脏、神经组织等感染效率高载体自身免疫原性低长期表达比较稳定,易于保存和运输缺点:容量较小
腺相关病毒载体的简介
腺病毒相关病毒(adeno-associated virus,AAV)是一类单链线状DNA缺陷型病毒。其基因组DNA小于5 kb,无包膜,外形为裸露的20面体颗粒。AAV不能独立复制,只有在辅助病毒(如腺病毒、单纯疱疹病毒、痘苗病毒)存在时,才能进行复制和溶细胞性感染,否则只能建立溶源性潜伏感染
质粒载体的载体大小的介绍
大的质粒(大于15kb)不会很好转化而且DNA产量通常很低。在设计实验时要考虑到加入插入片段的最终载体大小,尽量用更小的载体。 兼容性 当多于一个质粒载体必须同时存在于同一个细菌细胞中,这两个质粒的复制子必须是兼容的。当他们不能稳定地共存时,则认为这两个质粒是不兼容的。 选择/检测插入片段
基因扩增的相关介绍
基因扩增就是基因拷贝数增加或表达活性增强。 gene amplification 为一特异蛋白质编码的基因的拷贝数选择性地增加而其他基因并未按比例增加的过程。在自然条件下,基因扩增是通过从染色体切除基因的重复序列再在质粒中进行染色体外复制或通过将核糖体RNA的全部重复序列生成RNA转录物再转录
基因重组的相关介绍
基因重组指在生物体进行有性生殖的过程中,控制不同性状的基因重新组合。 其发生在二倍体生物的每一个世代中。每条染色体的两份拷贝在有些位置可能具有不同的等位基因,通过互换染色体间相应的部分,可产生于亲本不同的重组染色体。重组来源于染色体物质的物理交换,减数分裂前期,每条染色体有4份拷贝,所有的4份
基因工程的载体2
2、pUC质粒载体 1987年,J.Messing和J.Vieria采用MCS技术在pBR322基础上构建的。 结构: (1)来自于pBR322的Ori (2)氨苄青霉素的抗性基因(ampr)。 但核苷酸序列发生
基因工程的载体1
引 言基因克隆的本质是使目的基因在特定的条件下得到扩增和表达,而目的基因本身无法进行复制和表达、不易进入受体细胞、不能稳定维持,所以就必须借助于“载体”及其“寄主细胞”来实现。作为基因克隆的载体必须具备以下特性:⑴载体必须是复制子。⑵具有合适的筛选标记,便于重组子的筛选。⑶具备多克隆位点(MCS),
基因工程的载体3
⑷基因组成 lDNA至少包括61个基因,大多基因按功能相似性成簇排列,其中一部分为噬菌体生命活动的必须基因,另一部分约1/3为非必须区段。 3. l噬菌体载体的类型 插入型 (Insertion vectors )
癌基因相关介绍
癌基因,也称为致癌基因(英语:Oncogene)是一类能使正常细胞转化为癌细胞的基因。一般而言,癌基因是功能出现异常的原癌基因(英语:Proto-oncogene)。原癌基因一般与细胞的增殖生长相关,功能正常的原癌基因并不会导致癌症。当原癌基因发生片段丢失、点突变、复制等突变后,就可能转化为癌基因。
简述腺相关病毒载体的应用
经过十几年的研究,重组腺相关病毒的生物学特性已被深入了解,尤其是其在各种细胞、组织和体内实验中的应用效果方面已经积累了许多资料。在医学研究中,rAAV被用于多种疾病的基因治疗的研究(包括体内、体外实验);同时作为一种有特点的基因转移载体,还广泛用于基因功能研究、构建疾病模型、制备基因敲除鼠等方面
简述腺相关病毒的载体特点
1、安全性好 2、对肌肉、肝脏、神经组织等感染效率高 3、载体自身免疫原性低 4、长期表达 5、比较稳定,易于保存和运输
腺相关病毒载体的应用简介
经过十几年的研究,重组腺相关病毒的生物学特性已被深入了解,尤其是其在各种细胞、组织和体内实验中的应用效果方面已经积累了许多资料。在医学研究中,rAAV被用于多种疾病的基因治疗的研究(包括体内、体外实验);同时作为一种有特点的基因转移载体,还广泛用于基因功能研究、构建疾病模型、制备基因敲除鼠等方面
基因治疗时代到来:常用基因治疗载体的介绍与选择
基因治疗载体分为两大类:病毒载体(主要包括慢病毒、腺病毒、逆转录病毒、腺相关病毒等),非病毒载体(主要包括裸露DNA、脂质体、纳米载体等) 在讲基因治疗载体前,我们先讲一下基因治疗中的两个概念:in vivo和ex vivo。 in vivo:活体直接转移,将带有遗传物质的载体直接注射到实验
关于基因工程表达载体的技术前景介绍
科学界预言,21世纪是一个基因工程世纪。基因工程是在分子水平对生物遗传作人为干预,要认识它,我们先从生物工程谈起:生物工程又称生物技术,是一门应用现代生命科学原理和信息及化工等技术,利用活细胞或其产生的酶来对廉价原材料进行不同程度的加工,提供大量有用产品的综合性工程技术。生物工程的基础是现代生命
如何阅读基因载体图谱?
基因载体是基因工程的核心,也是基因治疗中强有力的生物工具,我们先来认识和阅读载体图谱吧。 载体分类及载体组成元件 载体分类 1、按属性分类:病毒载体和非病毒载体 病毒载体是一种常见的分子生物学工具,可将遗传物质带入细胞,原理是利用病毒具有传送其基因组进入目的细胞,进行感染的分子机制。
如何阅读基因载体图谱
基因载体是基因工程的核心,也是基因治疗中强有力的生物工具,我们先来认识和阅读载体图谱吧。 一、载体分类及载体组成元件 载体分类 1、按属性分类:病毒载体和非病毒载体 病毒载体是一种常见的分子生物学工具,可将遗传物质带入细胞,原理是利用病毒具有传送其基因组进入目