RNAi常见问题及问答(FAQs)
有关Stealth™ RNAi的问题什么是Stealth™ RNAi?Stealth™ RNAi是RNAi化学的新一代产品。Stealth™ RNAi分子是经过ZL化学修饰的、钝末端、双链25聚体(25mer)。这些化学修饰专门用来消除诱导的细胞应激反应。它也使Stealth™ RNAi比标准的siRNA在血清中更稳定,通过确保Stealth™ RNAi双链中只有反义链进入RNAi通路,减少脱靶效应(off-target)的可能性。如何设计Stealth™ RNAi?RNAi Designer 免费在线工具是设计有效Stealth™ RNAi的理牍ぞ摺NAi Designer使用独特的、基于公开设计法则的算法(algorithm),复杂的同源消除以及获得的来自invitrogen广泛的成功的RNAi实验室数据。使用RNAi Designer,你可以设计独一无二的Stealth TM RNAi分子,来靶定目的mRNA分子,进行有......阅读全文
RNAi常见问题及问答(FAQs)
有关Stealth™ RNAi的问题什么是Stealth™ RNAi?Stealth™ RNAi是RNAi化学的新一代产品。Stealth™ RNAi分子是经过ZL化学修饰的、钝末端、双链25聚体(25mer)。这些化学修饰专门用来消除诱导的细胞应激反应。它也使Stealth™ RNAi比标准的si
ph常见问题问答
1、为什么电极测量值不稳定? 1、电极选型不合适 2、点击老化2、PH电极寿命多长? PH电极的寿命与测量样品的性质、样品温度计使用的频率、电极保养情况有关。在正常使用正确保养的情况下,PH电极寿命为1年左右。哎呀我眼睛坏了,给我换个眼睛吧。3、如何选择合适的PH缓冲液? 校准一个PH电极通
残留溶剂测定课题组常见问题解答(FAQs)
一、概述药物中的残留溶剂系指在原料药或辅料的生产中,以及制剂制备过程中使用的,但在工艺过程中未能完全去除的有机溶剂。按有机溶剂的毒性和对环境的危害,ICH将有机溶剂分为避免使用、限制使用、低毒和毒性依据尚不足四种情况。因残留溶剂会影响产品的安全性,故需对其进行研究。二、残留溶剂检查方法的选择中残留溶
菌种保存常见问题问答汇总
1.菌株保存的是第三代,-80℃保存,再取出来活化的话属于第几代?答:保存的是第三代复活出来后,如果采用平板或肉汤活化相当于转接了一代,就是第四代了,如果还在瓷珠里的话就还是原来的代数。如果是保存在斜面上,这一支斜面一直就是第三代,如果转接到另一支斜面就是第四代了。传代原则,菌株活化复苏不论以任何形
关于电热套的常见问题问答
关于电热套的问答 提问:烧瓶能接触电热套壁吗,会不会有受热不均的问题? 回答:可以,我们经常在电热套里加热蒸馏! 不过温度不超过180度。 应该会有加热不均匀的问题,毕竟不是水浴。 提问:平底烧瓶是否可用电热套长时间加热?(通常都用圆底烧瓶进行
关于电热套的常见问题问答
关于电热套的问答 提问:烧瓶能接触电热套壁吗,会不会有受热不均的问题? 回答:可以,我们经常在电热套里加热蒸馏! 不过温度不超过180度。 应该会有加热不均匀的问题,毕竟不是水浴。 提问:平底烧瓶是否可用电热套长时间加热?(通常都用圆底烧瓶进行
流式细胞术常见问题问答
1、流式细胞仪上的FL2-W FL2-A FL2-H 分别是做什么的? FL2-W是只检测荧光的脉冲宽度, FL2-H是指脉冲高度。通常在做细胞周期分析时应用,用于去除粘连细胞。 2、流式同型对照怎样选择? 同型对照(Isotype Control):使用与一抗相同
Agrisera公司抗体常见问题问答(二)
9. 问:选择哪个物种用于免疫接种?答:使用IgG (兔、山羊)和IgY(鸡)抗体针对同一抗原的优势:----独立确认预期的目标蛋白质被检测。——抗体库具有不同的特性,在不同的技术中能起到互补的作用(免疫印迹、免疫沉淀反应等)双重染色。----一般从遗传角度上选择与抗原有较远的亲源关系的物种用于免疫
环保验收监测常见问题问答
1Q:废气验收监测时,低浓度颗粒物是否必须进行同步双样,全程序空白是否要扣除?A:同步双样是一种质控措施,HJ836-2017中7.3.8 规定“采集同步双样时,每个样品均应采集同步双样,同步双样的采集应符合附录A的要求”。其中所指的“每个样品” 为一个有效数据的组成样品(如1小时内等时间间隔采集多
Agrisera公司抗体常见问题问答(一)
1. 问:多克隆抗体的优势是什么?答:多克隆抗体能够同时识别具有多种不同表位的抗原,具有能够容忍抗原微小的改变如聚合或轻微的变性。检测变性蛋白质多克隆抗体是理想的选择。2. 问:血清中的多克隆抗体的具体浓度是多少?答:最常见的是,血清中特异性抗体浓度变化是0.05-0.2 mg/ml (基于Agri
流式细胞术常见问题问答
1、流式细胞仪上的FL2-W FL2-A FL2-H 分别是做什么的?FL2-W是只检测荧光的脉冲宽度, FL2-H是指脉冲高度。通常在做细胞周期分析时应用,用于去除粘连细胞。2、流式同型对照怎样选择?同型对照(Isotype Control):使用与一抗相同种属来源、相同亚型、相同剂量和相同的免
膜电阻测量的FAQs
EVOM2是WPI全球ZL产品,是最新一代用于特异性完成组织培养研究中TEER测量的电阻仪。它不仅可以定性地测量单层贴壁细胞的健康状态,而且也能定量地测量单层细胞的融合情况,可用于上皮细胞、胃肠道和呼吸道黏膜细胞、血管上皮细胞及血脑屏障等培养过程中细胞生长状态的评价以及药效动力学评价。独特的EVOM
表面电阻测试仪常见问题问答
1、便携式表面电阻测试仪和双极式表面电阻测试仪有什么不同?便携式表面电阻测试仪因为它体积小,好携带,可以测试一些常规的ESD产品,所以ESD一般都会随身携带。双级式电租测试仪用于测试物体表面的点对点电 阻。测量要求来测量独立于接地的两点之间的电阻,用这个测量方法得出的测量结果与被测物体的处理、两个探
细胞鉴定(Cell-Line-Authentication)-FAQs
1. 什么是细胞株鉴定?答:细胞株鉴定是对科研实验中所使用的细胞株进行身份鉴定的过程。进行细胞株鉴定是为了确保细胞株的身份是正确的、没有被其他细胞污染。如果细胞株有问题,就会影响实验结果的有效性。2. 为什么细胞株鉴定非常重要?答:细胞株鉴定对于科研实验来说十分重要。因为使用错误识别 (miside
RNAi及基因沉默原理
RNA 干扰(RNAinterference,RNAi)是由双链RNA (double-strandedRNA,dsRNA) 引发的转录后基因静默机制。其原理是:RNaseIII 核酶家族的Dicer,与双链RNA 结合,将其剪切成21 - 25nt 及3'端突出的小干扰RNA (small
ELISA检测试剂盒常见问题问答(三)
(21)问:样本稀释液可以用来直接稀释血清吗? 答:可以,直接加40ul就可以。(22)问:检测的时候需要在操净台中操作吗,还是在外面操作就可以了? 答:要求不是很严格,根据自己实验室的设备而定,都可以。(23)问:人和肽素(copeptin)Elisa,洗涤液是浓缩的,是一次配
甲醛分析仪使用时常见问题问答
由于甲醛分析仪具有非常高的灵敏度和分辨率(可检测并分辨出亿分之一的甲醛含量),同所有精密仪器一样,在使用时都要求排除环境影响,以保证仪器检测结果的准确性. 1、仪器显示负值或数值波动 仪器显示负值通常是人呼出气体的影响,检测时应将采样管进气口离开检测者1米以上,或者将采样管进气口指向检
ELISA检测试剂盒常见问题问答(一)
(1)问:小鼠乙酰胆碱Elisa检测试剂盒后期数据处理中空白的OD值有什么作用? 答:可以将标准品和样本的OD值同时减去空白的值进行计算,或者都不减,保持同一水平就行。 (2)问:那我们算出来的ACH含量为什么出现负值? 答:说明个别样本的浓度很低,当浓度接近第6个点的时候,直线方程
偶然找到流式细胞术常见问题问答,经典!
1、流式细胞仪上的FL2-W FL2-A FL2-H 分别是做什么的?FL2-W是只检测荧光的脉冲宽度, FL2-H是指脉冲高度。通常在做细胞周期分析时应用,用于去除粘连细胞。2、流式同型对照怎样选择?同型对照(Isotype Control):使用与一抗相同种属来源、相同亚型、相同剂量和相同的免疫
ELISA检测试剂盒常见问题问答(二)
(11)问:收集血清的时候用什么管? 答:普通离心管即可。(12)问:96t可以检测多少个样本?48t可以检测多少个样本? 答:96t标准的可以检测85个样本,其他有10个标准品孔,1个空白对照。96t单孔可以检测90个样,7个标准品控 1个空白对照。48t标准的可以检测
RNAi
1995年,康乃尔大学的Su Guo博士在试图阻断秀丽新小杆线虫(C. elegans)中的par-1基因时,发现了一个意想不到的现象。她们本是利用反义RNA技术特异性地阻断上述基因的表达,而同时在对照实验中给线虫注射正义RNA(sense RNA)以期观察到基因表达的增强。但得到的结果是二者都同样
RNAi及siRNA转染相关实验攻略
RNAi 是一种高效的特异性强的基因表达抑制,应用RNAi生物学机制进行基因功能研究已经成为一种创新性的新方法,人们第一次可以如此快速和方便地抑制细胞中特定基因的表达水平,从而用于分析特定基因在细胞中的功能。RNAi 技术还为新药开发、疾病治疗提供了创新性的方法和途径,有着极其广阔的应用前景。转染是
RNAi总结
RNA干涉(RNAi)是指双链RNA分子使基因表达沉寂的现象,是在线虫中发现的,在 1998年的一篇Nature论文中被公诸于众。过去几年中,科研工作者已明确转录后基因沉默现象普遍存在于动、植物中,在机体防御病毒入侵和转座子沉默效应中起着重要作用。近年来的研究表明,将与mRNA对应的正义RNA和反义
RNAi技术
DNA芯片检测siRNA专一性 长片断的双链RNA (dsRNA) 导入例如植物,真菌,果蝇,线虫等生物的细胞中会引发同源mRNA的降解——这就是所谓的RNA interference (RNAi)。RNAi分两个步骤,首先是长片断双链dsRNAs被核酶Dicer切割成21—25个碱基的sm
RNAi-protocol
siRNA protocolsOur current strategy with siRNA is to synthesis relatively small amounts enzymatically and use these to test for efficiency by western
RNAi干扰技术及应用进展研究(四)
3.5 转基因研究在动植物的转基因试验中, 经常发生基因沉默。因此, 对转基因沉默机制的探索可以为在转基因研究中避免基因沉默提供对策。在转基因植物研究中避免基因沉默可提高试验成功率,且节省时间,而在大型动物转基因研究中避免基因沉默可节约成本,提高产率。 3.6 干细胞研究在干细胞研究方面,在dsRN
RNAi干扰技术及应用进展研究(三)
3.2 基因治疗及药物筛选探索由于RNAi是针对转录后阶段的基因沉默,相对于传统基因治疗对基因水平上的敲除,整个流程设计更简便,且作用迅速,效果明显,为基因治疗开辟了新的途径。 其总体思路是通过加强关键基因的RNAi机制,控制疾病中出现异常的蛋白合成进程或外源致病核酸的复制及表达。尤其针对引起一
RNAi干扰技术及应用进展研究(一)
RNAi是Napoli CD等在试图向紫色矮牵牛花转导色素合成基因,用以增加其花色时发现的。结果出乎预料,转基因的植株不仅没有新基因的表达,反而自身的色素合成也减弱了,一些转基因的花出现了全白色或部分白色。他们把这种导入的基因未表达和植物本身合成色素基因的失活现象命名为共抑制(cosuppressi
RNAi干扰技术及应用进展研究(二)
1.2 RNAi的作用特点 (1)“共抑制”性。RNAi是双链RNA介导的转录后基因沉默机制,它的启动子相当活跃,外源基因可以转录,但不能正常积累mRNA;RNAi作用不仅使外源基因在转录后水平上失活,同时诱导与其同源的内源基因沉默。 (2) 高效性。试验证明双链RNA干扰mRNA 翻译的效率比
RNAi作用机理及药物研发进展(一)
RNAi历史 RNAi现象早在1993年就有报道:将产生紫色素的基因转入开紫花的矮牵牛中,希望得到紫色更深的花,可是事与愿违,非但没有加深紫色,反而成了白色。当时认为这是矮牵牛本来有的紫色素基因和转入的外来紫色素基因都失去了功能,称这种现象是“共抑制”。1995年,康奈尔大学的Su Guo博士用