蛋白样品的定量

目前常用比色法测定样品蛋白的含量:Bradford法(考马斯亮蓝法)、Lowry法(Folin-酚试剂法)、 BCA法等。但各有优缺点,大家可以根据具体情况选取。按相应蛋白质定量试剂盒操作说明操作,测定样品浓度。收集完蛋白样品后,为确保每个蛋白样品的上样量一致,需要测定每个蛋白样品的蛋白浓度。根据所使用的裂解液的不同,需要采用适当的蛋白浓度测定方法。因为不同的蛋白浓度测定方法对于一些去垢剂和还原剂等的兼容性差别很大,大家可以根据具体情况选取。Bradford法(考马斯亮蓝法):考马斯亮蓝G-250有红、蓝两种不同颜色的形式,在一定浓度的乙醇和酸性条件下,可配成淡红色的溶液,与蛋白结合后形成蓝色化合物,该化合物在595 nm处有最大吸收值,化合物颜色深浅与蛋白的浓度高低成正比。该法操作简便迅速,消耗样品量少,但不同蛋白质之间差异大,且标准曲线线性差。高浓度的Tris、EDTA、尿素、甘油、蔗糖、丙酮、硫酸铵和去污剂对测定......阅读全文

蛋白样品的定量

目前常用比色法测定样品蛋白的含量:Bradford法(考马斯亮蓝法)、Lowry法(Folin-酚试剂法)、 BCA法等。但各有优缺点,大家可以根据具体情况选取。按相应蛋白质定量试剂盒操作说明操作,测定样品浓度。收集完蛋白样品后,为确保每个蛋白样品的上样量一致,需要测定每个蛋白样品的蛋白浓度。根据所

蛋白定量技术

(一)双缩脲测定法1.原理  蛋白质中的肽键有双缩脲反应,在碱性溶液中与二价铜离子形成蓝紫色的络合物,在一定的范围内,颜色的深浅与蛋白质的含量成正比。此法特异性强,游离的氨基酸、小肽和核酸均不产生这种反应,但此法不够敏感,仅能测出毫克水平。    2.试剂配制     硫酸铜(CuSO4·5H2O)

蛋白定量介绍

  蛋白质的定量分析是生物化学和其他生命学科员常涉及的分析内容。在生化实验中,对样品中的蛋白质进行准确可靠的定量分析,是经常进行的一项非常重要的工作。蛋白质是一种十分重要的生物大分子,它的种类很多,结构不均一,分子量又相差很大,功能各异,这样就给建立一个理想而又通用的蛋白质定量分析的方法带来了许多具

样品制备影响XRF定量精度的介绍

  XRF样品制备简单,但并非无需样品处理,XRF对样品中元素分布均匀性、样品颗粒度、样品表面光滑度、表面粉尘、矿物效应等有要求,这些方面都会不同程度影响分析精度,使用者可以通过相关的样品制备方法消除或者改善这些影响,譬如:研磨、压片、抛光、熔片等方法是XRF通常采用的样品制备方法。

蛋白定量的相关介绍

  蛋白质的定量分析是生物化学和其他生命学科员常涉及的分析内容。在生化实验中,对样品中的蛋白质进行准确可靠的定量分析,是经常进行的一项非常重要的工作。蛋白质是一种十分重要的生物大分子,它的种类很多,结构不均一,分子量又相差很大,功能各异,这样就给建立一个理想而又通用的蛋白质定量分析的方法带来了许多具

相对-RTPCR:-样品定量实验

            试剂、试剂盒 双蒸水 RT-PCR 缓冲液 MMLV 逆转录酶 SUPERaseINRNA 酶抑制剂 Taq DNA 聚合酶 总 RNA

相对-RTPCR:-样品定量实验

已知线性范围的循环参数和 18SrRNA 引物与竞争子的比例,就可以用自己的样品去做相对定量 RT-PCR。下面配制的 PCR 反应混合物包含 9 个反应(4 个样品、4 个非反转录对照、1 个不加模板的对照)及 10% 的额外份额。本实验来源于 PCR 实验指南(第二版),作者:种康,瞿礼嘉。试剂

相对-RTPCR:-样品定量实验

试剂、试剂盒 双蒸水RT-PCR 缓冲液MMLV 逆转录酶SUPERaseINRNA 酶抑制剂 Taq DNA 聚合酶总 RNA 随机引物dNTP 混合物 基因特异的正向引物基因特异的反向引物[a-32P]dCTP仪器、耗材 Quantu mRNA Universal 18S standards P

蛋白质定量

Quantitative Determination of Peptides by Sulfhydryl (-SH) Groups New (Contributed by David Van Horn, Dept. of Chemistry, UC Berkeley Greg Bulaj, Dept

关于蛋白定量的相关介绍

  蛋白定量即蛋白质定量,蛋白质定量根据其目的可分为全蛋白质的“总定量法”和特定蛋白质的“个别定量法”。蛋白定量是生物学实验不可缺少的一部分。为验证细胞裂解是否成功,或为了将多个样品进行平行实验比较或标准化保存,需对细胞裂解液进行蛋白定量;为了判定蛋白的产量,需对纯化好的蛋白进行定量;为了将纯化好的

BCA蛋白定量法的原理

Bicinchoninic acid (BCA )世界用蛋白浓度检验BCA基础改进其原理与Lowery蛋白定量相似即碱性环境蛋白质与Cu 2+ 络合并Cu 2+ 原Cu + 两BCA与Cu + 螯合形稳定紫蓝色复合物

BCA蛋白定量法的原理

原理简介 BCA(bicinchoninic acid)法蛋白浓度定量试剂盒是在世界上常用的蛋白浓度检测方法之一BCA法基础上改进而成。众所周知,二价铜离子在碱性的条件下,可以被蛋白质还原成一价铜离子(biuret reaction),一价

关于脑脊液的蛋白定量和蛋白电泳的介绍

  蛋白定量  1、化脓性脑膜炎,流行性脑膜炎蛋白质含量为3-6.5g/L;结核性脑膜炎刺激症状期蛋白质含量为0.3-2.0g/L,压迫症状期为1.9-7g/L,麻痹期为0.5-6.5g/L;脑炎蛋白质含量为0.5-3.0g/L。  2、引起脑脊液循环梗阻的疾病,如脊髓蛛网膜炎与脊髓肿瘤等,其蛋白质

蛋白定量分析

Protein AssaysBelow is a list of assays for the determination of protein concentration in a solution. This list includes the sensitivity range, volume

蛋白质定量实验

考马斯亮蓝蛋白质浓度分析法 碱性铜还原分析法 胺衍生法             实验方法原理 蛋白质分子中的芳香族氨基酸酪氨酸、苯丙氨酸和色氨酸残基,其化学结构中

蛋白质定量实验

试剂、试剂盒 考马斯亮蓝 G250乙醇磷酸实验步骤 (1) 准备 100~1500 ug/ml 的标准品, 溶于 Bradford 法相兼容缓冲液中。对于较稀的样品,可能通过增加样品在试剂体积中的比率而扩大灵敏度(microBradfordassay:1~25ug/mL)。如果样品与染料的比

什么是尿蛋白定量?

尿蛋白定性试验阳性,则应进一步进行尿蛋白定量试验。尿蛋白定量是指准确测定24h内全部尿液中的蛋白质浓度。尿蛋白定量测定有助于泌尿系统疾病的诊断和鉴别诊断,了解肾脏病变的程度。留尿时要求适量添加防腐剂。

蛋白定量--Lowry法[wkh]

蛋白定量--Lowry法[wkh]   2008-07-28 20:15:35   Folin—酚试剂法(Lowry法)(一)实验原理这种蛋白质测定法是最灵敏的方法之一。过去此法是应用最广泛的一种方法,由于其试剂乙的配制较为困难(现在已可以订购),近年来逐渐被考马斯亮蓝法所取代。此法的显色原理与双缩

样品适应性影响XRF定量精度的介绍

  即使建立可靠的定量模型,但对目标样品适应性也非一劳永逸,也要充分考虑目标样品的物理形态、元素含量范围、基体与标准样品一致性等条件,这些条件与建立定量模型采用的标准样品不一致,会一定程度造成定量误差。

蛋白质的定量测定实验

试剂、试剂盒 Bradford 试剂牛血清白蛋白 (BSA) 标准溶液Tris-缓冲盐溶液 仪器、耗材 微量滴定板分光光度计或酶联仪 实验步骤 材料与设备 牛血清白蛋白 (BSA) 标准溶液 (2 mg/ml 水溶液) Bradford 试剂(Coomassi

β脂蛋白定量的检查过程

  采用静脉采血进行检测。静脉采血前要仔细检查针头是否安装牢固,针筒内是否有空气和水分。所用针头应锐利、光滑、通气,针筒不漏气。先用30g/L碘酊棉签自所选静脉穿刺处从内向外、顺时针方向消毒皮肤,待碘酊挥发后,再用75%乙醇棉签以同样方法拭去碘迹。以左手拇指固定静脉穿刺部位下端,右手拇指和中指持注射

β脂蛋白定量的注意事项

  不合宜人群:有明显出血倾向的人群。  检查前禁忌:检查前一天不吃过于油腻、高蛋白食物,避免大量饮酒。血液中的酒精成分会直接影响检验结果。体检前一天的晚八时以后,应禁食。  检查时要求:抽血时应放松心情,避免因恐惧造成血管的收缩、增加采血的困难。

β脂蛋白定量的临床意义

  异常结果:  (1) 低β-脂蛋白:低β-脂蛋白血症因apoB的基因突变所致,常常没有临床表现。  (2) 无β-脂蛋白:以完全缺乏β-脂蛋白,脂肪痢,棘形红细胞增多(红细胞膜上有尖的突出),视网膜无色素,运动失调和智能障碍为特征,可能是棘形红细胞症;Bassen-Kornzweig综合征。  

尿蛋白定量试验的检查方法

  检查方法有:沉淀法、比色法、比浊法、染料结合法、免疫测定法和尿蛋白电泳法等。目前染料结合法、比色法应用较广泛,免疫法及尿蛋白电泳法具有更高的灵敏度和特异性,有很好的临床应用前景。  尿蛋白检测方法的选择:对于进行现场快速检验,或初次就诊的门诊患者,采用试带法或磺基水杨酸法,基本可满足健康体检和疾

蛋白质的定量测定实验

            试剂、试剂盒 Bradford 试剂 牛血清白蛋白 (BSA) 标准溶液 Tris-缓冲盐溶液 仪器、耗材

尿蛋白定量试验的检查方法

检查方法有:沉淀法、比色法、比浊法、染料结合法、免疫测定法和尿蛋白电泳法等。目前染料结合法、比色法应用较广泛,免疫法及尿蛋白电泳法具有更高的灵敏度和特异性,有很好的临床应用前景。 尿蛋白检测方法的选择:对于进行现场快速检验,或初次就诊的门诊患者,采用试带法或磺基水杨酸法,基本可满足健康体检和疾病筛

蛋白质的定量测定实验

试剂、试剂盒 Bradford 试剂牛血清白蛋白 (BSA) 标准溶液Tris-缓冲盐溶液仪器、耗材 微量滴定板分光光度计或酶联仪实验步骤 材料与设备牛血清白蛋白 (BSA) 标准溶液 (2 mg/ml 水溶液)Bradford 试剂(CoomassiePlus,PierceChemicalCo.)

突破性的蛋白A定量系统

  工艺杂质的去除是生物制药产品生产过程中的关键一步,且监管指引要求鉴定出纯化过程中各个阶段的杂质。在商业化重组单克隆抗体生物药品的纯化过程中,含有固定化葡萄球菌蛋白A(天然蛋白A)、重组蛋白A(rPA)或蛋白A亚基(MabSelect SuRe™)的纯化树脂被广泛使用。必须对滤出的蛋白A进行灵

尿蛋白定量的临床意义

  异常结果:  大于150mg/24h,为蛋白尿。  不同疾病,尿中排出蛋白量不同:  1、轻度蛋白尿(4g/24h):见于急性或慢性肾小球肾炎、肾病综合征、狼疮肾炎等。  不同性质蛋白尿,见于不同疾病:  1、肾前性蛋白尿:Bence-Jones(本-周)蛋白尿、血红蛋白尿、肌红蛋白尿、炎症性蛋

β脂蛋白定量的注意事项

  异常结果:  (1) 低β-脂蛋白:低β-脂蛋白血症因apoB的基因突变所致,常常没有临床表现。  (2) 无β-脂蛋白:以完全缺乏β-脂蛋白,脂肪痢,棘形红细胞增多(红细胞膜上有尖的突出),视网膜无色素,运动失调和智能障碍为特征,可能是棘形红细胞症;Bassen-Kornzweig综合征。