CoIP
Protocol for Co-IP of different proteins with RFP-MeCP2Preperation of cells (for p100):• 1st day split 293T EBNA cells in DMEM (high glucose + 10% FCS + 5mM glutamine + 5µg/ml gentamycine)• 2nd day cells should be 80-90% confluent Transfection (TransFectin, Biorad):• 15 µg plasmid DNA in 250µl serum-fre......阅读全文
CoIP
Protocol for Co-IP of different proteins with RFP-MeCP2Preperation of cells (for p100):• 1st day split 293T EBNA cells in DMEM (high glucose +
免疫共沉淀(CoIP)
实验方法原理 以抗体和抗原之间的专一性作用为基础的用于研究蛋白质相互作用的经典方法，是确定两种蛋白质在完整细胞内生理性相互作用的有效方法。其原理是：当细胞在非变性条件下被裂解时，完整细胞内存在的许多蛋白质－蛋白质间的相互作用被保留了下来。如果
免疫共沉淀(CoIP)
免疫共沉淀可应用于：（1）测定两种目标蛋白质是否在体内结合；（2）确定一种特定蛋白质的新的作用搭档；（3）分离得到天然状态的相互作用蛋白复合物。实验方法原理以抗体和抗原之间的专一性作用为基础的用于研究蛋白质相互作用的经典方法，是确定两种蛋白质在完整细胞内生理性相互作用的有效方法。其原理是：当细胞在非
免疫共沉淀(CoIP)
实验方法原理 免疫共沉淀（Co-Immunoprecipitation）是以抗体和抗原之间的专一性作用为基础的用于研究蛋白质相互作用的经典方法。是确定两种蛋白质在完整细胞内生理性相互作用的有效方法。其原理是：当细胞在非变性条件下被裂解时，完整细胞内存在的许多蛋白质－蛋白质间的相互作用被保留了下来。如
免疫共沉淀（coIP）实验案例分享
—— co-IP 检测 Hsp90 与 Cdc37 结合情况1、实验材料SKBR3 细胞，PMSF（Amresco，cat:329-98-6），cocktail（上海晶莱生物），脱脂奶粉（cat:66196131T），β-actin（上海晶莱生物）。Anti-Hsp90(santa,cat:
免疫共沉淀(CoIP)详细步骤教程（二）
注意：在准备做磷酸（酯）酶实验的时候，不加磷酸酯酶抑制剂工作液配制：配制100ml的modified RIPA buffe：1. 称取790mg 的Tris-Base，加到75ml 去离子水中，加入900mg的NaCl，搅拌，直到全部溶解，用HCl调节PH值到7.42. 加10 ml 10%的NP-
免疫共沉淀(CoIP)的原理及步骤
一．原理免疫共沉淀（Co-Immunoprecipitation）是以抗体和抗原之间的专一性作用为基础的用于研究蛋白质相互作用的经典方法，是确定两种蛋白质在完整细胞内生理性相互作用的有效方法。其原理是：当细胞在非变性条件下被裂解时，完整细胞内存在的许多蛋白质－蛋白质间的相互作用被保留了下来。如果用蛋
免疫共沉淀(CoIP)详细步骤教程（一）
一、原理：免疫共沉淀（Co-Immunoprecipitation）是以抗体和抗原之间的专一性作用为基础的用于研究蛋白质相互作用的经典方法。是确定两种蛋白质在完整细胞内生理性相互作用的有效方法。其原理是：当细胞在非变性条件下被裂解时，完整细胞内存在的许多蛋白质－蛋白质间的相互作用被保留了下来。如果用
实时无标记SPR技术研究分子相互作用的优势介绍（一）
分子间相互用是细胞接受信号和传递信号的基础，是研究药物作用的本质所在，因此研究分子间的相互作用对于揭示生命起源、细胞病变、药物开发等是不可忽视的过程，也是当前生命科学与医药领域的研究热点；传统研究分子相互作用的方法众多，包括酵母双杂、噬菌体展示、Elisa、Western、FRET、Co-IP、Pu
实时无标记SPR技术研究分子相互作用的优势介绍（二）
综合比较SPR与CO-IP实验：相同点：（1）测定两种甚至更多种蛋白质是否在体内结合；（2）鉴定一种特定蛋白质的作用搭档；（3）分离得到天然状态的相互作用蛋白复合物。SPR检测优势： 传统SPR技术的仪器使用复杂，让很多老师望而却步，加拿大Nicoya公司的下一代的LSPRZL技术系统OpenSPR
银染的应用
主要是用于垂直凝胶电泳中低丰度蛋白的检测，如内源性GST-Pulldown、Co-IP等实验中相互作用蛋白的研究 。
COIP实验为什么要设置IgG阴性对照
CO-IP是免疫共沉淀实验。阴性对照的目的是排除非特异性免疫反应。如果阴性对照做成了阳性，说明存在干扰，也就是说非特异性免疫反应。做出阴性，可以用来做结果参考。
免疫共沉淀的原理介绍
免疫共沉淀（Co-Immunoprecipitation），简称 Co-IP，其原理是当细胞在非变性条件下被裂解时，完整细胞内存在的许多蛋白质－蛋白质间的相互作用被保留了下来, 如果用蛋白质 X 的抗体 anti-X（通常称为 IP 抗体）将 X 特异地抓住并沉淀下来，那么与 X 在体内结合的蛋白质
看得见的蛋白互作新技术Duolink－PLA
现今，科技发展的齿轮正在高速运转，每隔2-3年就会出现一个重大的技术变革引领生命科学走向更精细、更微观、更真实的水平，这其中也包括蛋白的研究。在疾病的致病机理、分子机制、信号通路、药物筛选以及新型诊断标志物的发现中，传统的蛋白研究“金标准”方法如Co-IP、Western blot、ELISA、
发现非典型G蛋白信号转导调节因子同源结构域
中国科学院广州生物医药与健康研究院刘劲松课题组通过结构生物学研究，在分选转运蛋白（SNXs）中发现了一类新型的非典型G蛋白信号转导调节因子（RGS）同源结构域（RGS homology，RH）。相关研究近日在线发表于Journal of molecular biology。博士生张玉龙为该论文第一作
发现非典型G蛋白信号转导调节因子同源结构域
中国科学院广州生物医药与健康研究院刘劲松课题组通过结构生物学研究，在分选转运蛋白（SNXs）中发现了一类新型的非典型G蛋白信号转导调节因子（RGS）同源结构域（RGS homology，RH）。相关研究近日在线发表于Journal of molecular biology。博士生张玉龙为该论文第
免疫亲和纯化与coip有什么区别
IP是在已知一种蛋白质的抗体情况下，直接用这种抗体将目标蛋白质提取出来，是一种提纯蛋白质的方法。 Co-IP主要用于检测蛋白质与蛋白质之间连接作用，如你想检测蛋白质A与蛋白质B之间是否有相互作用，你手中又有蛋白质A的特异抗体，就将蛋白质A和抗体加入到含有蛋白质B的细胞解液中去，利用抗体提纯，如果蛋白
实验选多肽还是蛋白作为抗原更加合适？
1.实验过程中蛋白处于天然状态，这时使用的抗体识别的一般是蛋白的构象表位和线性表位；这样的实验主要有CO-IP、FACS、Neutralizing/Blocking以及Elisa法检测天然蛋白等。2.实验过程中蛋白处于变性或半变性状态，这时大部分的构象表位已被破坏，抗体识别的一般都是线性表位；这样的
细胞裂解液作为对照的原因
WCL的全称是whole cell lysate,中文就是全细胞裂解液对吧?如果是这样的话,这个部分的目的就是研究细胞里面你想要研究的蛋白表达情况.IP的就是你用抗体pull down以后得到的目的蛋白.我们做co-IP研究A和B蛋白相互作用的时候,一般会在细胞里面转染质粒,分别表达A和B蛋白.等蛋
SMAD2/3与TGFβ通路协同影响转录因子发生m6A－RNA甲基化调...
SMAD2/3与TGF-β通路协同影响转录因子发生m6A RNA甲基化调控干细胞发育文章导读：胚胎干细胞作为一种全能性细胞，通过增殖和分化，产生动物体所有组织和器官的细胞。已有研究表明，胚胎干细胞发生m6A RNA甲基化，大多与细胞增殖[1-2]，免疫应答[4]关系密切。然而，对于m6A修饰在胚
关于免疫共沉淀的简介
免疫共沉淀（Co-Immunoprecipitation）是以抗体和抗原之间的专一性作用为基础的用于研究蛋白质相互作用的经典方法，是确定两种蛋白质在完整细胞内生理性相互作用的有效方法。免疫共沉淀具有经翻译后修饰的，处于天然状态的优点。 免疫共沉淀（Co -Immunoprecipitation
免疫沉淀法的主要类型
个别免疫沉淀法(IP)：用来分离某个细胞萃取物中的已知特定蛋白质免疫共沉淀法(Co-IP)：研究整个蛋白质复合体染色质免疫沉淀法(ChIP)：用来研究DNA上的特定蛋白质RNA免疫沉淀法(RIP)：和ChIP相近，但RNA免疫沉淀法是用来研究会与RNA结合的蛋白质RIP技术（RNA Binding
GOLM1调控肝癌转移机制研究（二）
4. GOLM1作用机制分析通过免疫亲和纯化和高通量液质检测（LC-MS/MS），研究人员发现EGFR蛋白可以与GOLM1结合。在不同细胞中的co-IP实验也验证了他们的结合关系。通过对EGFR/RTK下游蛋白检测也发现，GOLM1-KD可显著降低MMP9的表达。因此，GLOM1可能通过结合和激活E
植物寄生线虫调控寄主自噬体通路研究获进展
原文地址：http://news.sciencenet.cn/htmlnews/2022/12/491032.shtm 近日，广东省农业科学院水稻研究所联合美国康奈尔大学在植物寄生线虫调控寄主自噬体通路方面取得新进展。相关研究发表于New Phytologist。 自噬是真核生物中一种高度保
植物寄生线虫调控寄主自噬体通路研究获进展
近日，广东省农业科学院水稻研究所联合美国康奈尔大学在植物寄生线虫调控寄主自噬体通路方面取得新进展。相关研究发表于New Phytologist。 自噬是真核生物中一种高度保守的生物学过程，它利用双层膜结构的自噬体来隔离和运输细胞质物质，并与溶酶体融合进行降解和再循环。在植物中，自噬是植物免疫的
免疫沉淀法的类型
个别免疫沉淀法(IP)：用来分离某个细胞萃取物中的已知特定蛋白质免疫沉淀法免疫共沉淀法(Co-IP)：研究整个蛋白质复合体染色质免疫沉淀法(ChIP)：用来研究DNA上的特定蛋白质RNA免疫沉淀法(RIP)：和ChIP相近，但RNA免疫沉淀法是用来研究会与RNA结合的蛋白质RIP技术（RNA Bin
如何预测和鉴定miRNA的靶基因
免疫沉淀当然，确定miRNA与mRNA之间的互作，我们还有更直接的方法，那就是从实验上寻找物理相互作用。我们可以利用RNA诱导沉默复合物（RISC）中的Argonaut（AGO）蛋白的抗体进行免疫共沉淀（co-IP）。目前更先进的方法是通过紫外线照射以交联复合物，然后开展深度测序以鉴定发现的RNA，
锌指蛋白ZFP217通过介导m6A－mRNA甲基化导致肥胖的原理
过去三十年来，全球肥胖和2型糖尿病的发病率有所上升，而脂肪组织是肥胖相关疾病的重要因素，因此，控制脂肪细胞分化和成熟可能是治疗肥胖相关疾病的一个有希望的策略（1）。为了阐明转录和表观遗传调控在脂肪形成中的作用，并确定一个主要的关键调控因子和途径（1，2），人们做了大量的努力，然而，转录后调控在脂肪形
钟声教授团队开发高通量蛋白互作检测技术
通过深入了解基因组产物形成的相互作用网络，人类基因组注释功能得以飞速发展。随着技术的进步，我们已经实现了DNA-DNA、蛋白质 -DNA、RNA-DNA和RNA-RNA相互作用的全基因组映射图谱。但完成人类蛋白质-蛋白质相互作用（PPI）的全基因组映射图谱仍然是一项艰巨任务。 目前，大规模PP
云序RNA修饰技术在华南农大余义勋课题组植物m1A修饰...2
2. m6A甲基转移酶METTL3的泛素化调节其功能 发表期刊：Nucleic Acids Research影响因子：11.147发表日期：2018.06.01实验方法： m6A-seq，RNA-seq，MeRIP-PCR，RIP等（云序提供） 上海交通大学医学院余健秀组在著名期刊《核酸研究》发