现代生物分离技术在多肽蛋白质分离纯化中的应用
摘要:蛋白质是生物体的重要组成部分,在现代生物制药领域有着重要的作用,本文介绍了现代生物分离技术反胶束萃取、双水相萃取和电泳在多肽蛋白质分离中的应用和现状。关键词:蛋白质 反胶束萃取 双水相萃取 电泳一、前言随着基因工程和细胞工程的发展,尽管传统的分离方法(如溶剂萃取技术)已在抗生素等物质的生产中广泛应用,并显示出优良的分离性能,但它难以提取和分离蛋白质。其主要原因有两个:被分离对象—蛋白质等在40~500C便不稳定,开始变性,而且绝大多数蛋白质都不溶于有机溶剂,若使蛋白质与有机溶剂接触,也会引起蛋白质的变性;萃取剂问题—蛋白质分子表面带有许多电荷,普通的离子缔合型萃取剂很难奏效。新兴的生物分离技术反胶束萃取、双水相萃取和电泳在蛋白质的分离纯化方面显示出了自身的优势,并展现出了广阔的前景。二、反胶束萃取2.1 反胶束萃取技术及其萃取蛋白质的机理2.1.1 反胶束及......阅读全文
现代生物分离技术在多肽蛋白质分离纯化中的应用
摘要:蛋白质是生物体的重要组成部分,在现代生物制药领域有着重要的作用,本文介绍了现代生物分离技术反胶束萃取、双水相萃取和电泳在多肽蛋白质分离中的应用和现状。关键词:蛋白质 反胶束萃取 双水相萃取 电泳一、前言随着基因工程和细胞工程的发展,尽管传统的分离方法(如溶剂萃取技术)已在抗生素等物质的生
高性能微球在多肽药物分离纯化中的应用(一)
由于多肽药物结构复杂、稳定性差、浓度低且目标分子与杂质的结构相类似,有的只有一个氨基酸的差别,因此多肽药物的分离纯化一直是多肽药物生产过程中最具挑战性的一部分,多肽分离纯化也主要依赖于高性能的微球制备色谱填料,其具有分离效果好、分辨率高、重复性好、回收率高等优点,是目前多肽药物的主要分离纯化方法。无
高性能微球在多肽药物分离纯化中的应用(三)
「 色谱填料孔径对多肽分离纯化的影响 」 除了体积排阻色谱外,其它色谱分离机理都离不开样品与色谱填料表面的作用。 色谱填料孔径大小、分布及比表面积对多肽分离性能也有重大的影响,对于分子量小于1000的多肽样品,一般选择孔径在100Å 以下的就可以。 对于大多数分离模式来说有效的比表面积越大,载量越大
高性能微球在多肽药物分离纯化中的应用(二)
01 「 多肽分离纯化色谱填料的选择 」一个理想的多肽药物分离纯化色谱填料必须满足以下特性:(a)高选择性,高分离度;(b)柱效高,分辨率高;(c)载量大;单位体积填料处理多肽样品的能力大(d)化学性能稳定,适用pH范围宽(1-14);可在线清洗, 耐脏性强,使用寿命长;(e)机械强度大,反压低
蛋白质分离纯化应用范围
1、 化学物质的分离、提纯、浓缩;2、染料、染料中间体的浓缩及脱盐3、超细粉体生产过程中的产品回收;4、生产废水中有用物质的提纯、回用;5、海洋生物提取物的浓缩、提纯6、氨基酸、蛋白质的浓缩、提纯
蛋白质分离纯化常用技术
1、沉淀,2、电泳:蛋白质在高于或低于其等电点的溶液中是带电的,在电场中能向电场的正极或负极移动。根据支撑物不同,有薄膜电泳、凝胶电泳等。3、透析:利用透析袋把大分子蛋白质与小分子化合物分开的方法。4、层析:利用蛋白质在固定相与流动相之间不同的分配比例,达到分离目的的技术。a.离子交换层析,利用蛋白
蛋白质分离纯化技术详解
沉淀法沉淀法也称溶解度法。其纯化生命大分子物质的基本原理是根据各种物质的结构差异性来改变溶液的某些性质,进而导致有效成分的溶解度发生变化。1、盐析法盐析法的根据是蛋白质在稀盐溶液中,溶解度会随盐浓度的增高而上升,但当盐浓度增高到一定数值时,使水活度降低,进而导致蛋白质分子表面电荷逐渐被中和,水化膜逐
Gradiflow-技术在蛋白质分离研究中的应用(二)
2. 蛋白质组预分离2DE是研究者常用的蛋白质组分析方法,这种方法很有用,但是它的限制因素在实验过程中逐渐呈现出来,比如一些膜蛋白,高分子量和低分子量的蛋白质,就很难用2DE检测出来。特别是一些蛋白样品中包含高丰度的蛋白质,这样就很有可能将研究者感兴趣的蛋白质掩盖,在2DE图谱上体现不出来,从而减少
Gradiflow-技术在蛋白质分离研究中的应用(一)
电泳是现代蛋白质研究常用和有效的工具,但是电泳过程中所产生的热量对蛋白质结构的破坏,以及目的蛋白从蛋白胶或其他介质中低的回收效率等等问题,常常让蛋白质更深入的研究戛然而止,而Gradiflow 技术的应用解决了研究者头疼的难题 ! Gradiflow 技术要点可以简单概括为如下几点:1. 应用不同孔
分离纯化蛋白质的分离方法介绍
* 透析(dialysis)利用透析袋把大分子蛋白质与小分子化合物分开的方法。 * 超滤法,应用正压或离心力使蛋白质溶液透过有一定截留分子量的超滤膜,达到浓缩蛋白质溶液的目的。 *丙酮、乙醇等有机溶剂沉淀法,可破坏蛋白质的水化层,在0~4℃低温下,使蛋白质沉淀。环境温度高等不良因素影响下,有
蛋白质分离纯化设备的蛋白质的分离纯化方法介绍
一、沉淀法 沉淀法也称溶解度法。其纯化生命大分子物质的基本原理是根据各种物质的结构差异性来改变溶液的某些性质,进而导致有效成分的溶解度发生变化。 1、盐析法 盐析法的根据是蛋白质在稀盐溶液中,溶解度会随盐浓度的增高而上升,但当盐浓度增高到一定数值时,使水活度降低,进而导致蛋白质分子表面电荷
蛋白质分离纯化
蛋白质分离纯化是用生物工程下游技术从混合物之当中分离纯化出所需要得目的蛋白质的方法。
蛋白质、多肽提取分离
1 分离方法 采取何种分离纯化方法要由所提取的组织材料、所要提取物质的性质决定。对蛋白质、多肽提取分离常用的方法包括:盐析法、超滤法、凝胶过滤法、等电点沉淀法、离子交换层析、亲和层析、吸附层析、逆流分溶、酶解法等。这些方法常常组合到一起对特定的物质进行分离纯化,同时上述这些方法也是蛋白、多肽类物
蛋白质、多肽提取分离
1 分离方法 采取何种分离纯化方法要由所提取的组织材料、所要提取物质的性质决定。对蛋白质、多肽提取分离常用的方法包括:盐析法、超滤法、凝胶过滤法、等电点沉淀法、离子交换层析、亲和层析、吸附层析、逆流分溶、酶解法等。这些方法常常组合到一起对特定的物质进行分离纯化,同时上述这些方
超滤在中药提取物分离纯化中的应用
中药是我国传统药物的总称,其使用以中医理论为基础,具有独特的理论体系和应用形式,充分反映了我国传统文化、自然资源等方面的特点。中医根据阴阳五行说,使用不同性质的药材,使其相辅相成,调和阴阳五行,以达到治疗的效果。中药来源于植物、矿物和动物,尤以植物类药材居多。而植物类中草药的化学成分十分复杂,通常
真空控制在旋蒸分离纯化中的应用
在使用旋转蒸发仪过程中,分离纯化过程中,所用的温度和真空度是重要的设置参数。物质的饱和蒸气压是温度和真空度控制的参考标准(见附表)。* 什么是饱和蒸气压?无论是液体还是固体,时时刻刻都存在蒸发(升华)、凝结过程,而气化后的气体分子会对物质表面形成压力。而蒸气压指的就是液体或固体表面存在着的该物质的蒸
真空控制在旋蒸分离纯化中的应用
什么是饱和蒸气压? 无论是液体还是固体,时时刻刻都存在蒸发(升华)、凝结过程,而气化后的气体分子会对物质表面形成压力。而蒸气压指的就是液体或固体表面存在着的该物质的蒸气,这些蒸气对液体或固体表面产生的压强。 饱和蒸气压就是指在密闭条件中、一定温度和气压下,物质的蒸发(升华)与凝结
蛋白质的分离纯化
一,蛋白质(包括酶)的提取 大部分蛋白质都可溶于水、稀盐、稀酸或碱溶液,少数与脂类结合的蛋白质则溶于乙醇、丙酮、丁醇等有机溶剂中,因些,可采用不同溶剂提取分离和纯化蛋白质及酶。(一)水溶液提取法 稀盐和缓冲系统的水溶液对蛋白质稳定性好、溶解度大、是提取蛋白质最常用的溶剂,通常用量是原材料体积的1
蛋白质的分离纯化
蛋白质的分离纯化方法如下:一、根据蛋白质溶解度不同的分离方法1、蛋白质的盐析法:中性盐对蛋白质的溶解度有显著影响,一般在低盐浓度下随着盐浓度升高,蛋白质的溶解度增加,此称盐溶;当盐浓度继续升高时,蛋白质的溶解度不同程度下降并先后析出,这种现象称盐析。2、等电点沉淀法:蛋白质在静电状态时颗粒之间的静电
微生物酯酶的分离纯化技术及应用
酯酶,又称羧酸酯酶,是一类能够对羧酸酯酯键作用的水解酶,可在水分子的参与下,经由水解作用,将酯类切割成酸类与醇类。酯酶普遍存在于动物、植物和微生物中,在水分子的参与下能够催化裂解酯键形成相应的醇和酸。微生物酯酶作为生物催化剂,具有很高的催化功能、底物特异性和反应特异性,利用其水解反应、酯转换以及酯合
生物分离纯化系统
生物分离纯化系统是一种用于水产学领域的分析仪器,于2018年12月5日启用。 技术指标 系统泵:双泵四泵头,每个泵头都有独立除气阀,每个泵后都有润洗通路,润洗泵的柱塞杠,延长泵的使用寿命;流速0.001-25ml/min(单泵);装柱可以双泵模式运行,达到0.1–50ml/min;压力范围0
蛋白质分离纯化的新技术及技术要点
浅述蛋白质分离纯化的新技术摘 要: 本文主要介绍了浊点萃取法、置换色谱法、亲和层析法、亲和色谱法、凝胶电泳、双水相萃取等蛋白质的最新分离纯化技术,综和近年来国内外的一些研究结果,结合实际应用的例子,分析了各种分离纯化方法的优点,同时指出其不足之处。文章最后展望了蛋白质分离纯化技术的发展趋势。 关 键
蛋白质纯化药物分离
一、根据蛋白质溶解度不同的分离1、蛋白质的盐析法:中性盐对蛋白质的溶解度有显著影响,一般在低盐浓度下随着盐浓度升高,蛋白质的溶解度增加,此称盐溶;当盐浓度继续升高时,蛋白质的溶解度不同程度下降并先后析出,这种现象称盐析。2、等电点沉淀法:蛋白质在静电状态时颗粒之间的静电斥力最小,因而溶解度也最小,各
膜分离技术在果胶提取中的应用
由于膜分离过程不需要加热,可防止热敏物质失活、杂菌污染,无相变,集分离、浓缩、提纯、杀菌为一体,分离效果高,操作简单,费用低,特别适合食品工业的应用.周仲实采用超滤膜装置对果胶提取液进行处理,初步浓缩除去大部分对胶凝度无贡献的杂质后,再经电渗析脱去大部分盐酸和无机离子,所得提取液可直接干燥获得高
膜分离技术在酿酒工业中的应用
随着人们对酒的质量要求越来越高, 膜分离技术开始用于造酒行业, 特别是低度酒的除浊澄清。采用超过滤技术对传统工艺的重要变革,不仅能明显提高酒的澄清度, 保持酒的色、香、味, 而且可以无热除菌, 提高酒的保存期。用无机微滤膜可去除啤酒中的浑浊漂浮物(酒花树脂、单宁、蛋白质等) , 除去酵母、乳酸菌
细胞分离纯化技术
Ficoll密度梯度离心法分离外周血单个核细胞 Percoll不连续密度梯度沉淀法分离纯化淋巴细胞和淋巴母细胞 实验方法原理 常用来分离人外周血单个
细胞分离纯化技术
Ficoll密度梯度离心法分离外周血单个核细胞 Percoll不连续密度梯度沉淀法分离纯化淋巴细胞和淋巴母细胞 实验方法原理 常用来分离人外周血单个
细胞分离纯化技术
Percoll不连续密度梯度沉淀法分离纯化淋巴细胞和淋巴母细胞实验方法原理Percoll是一种包有乙烯吡咯烷酮的硅胶颗粒。渗透压很低(
细胞分离纯化技术
实验方法原理 常用来分离人外周血单个核细胞(PBMC)的分层液比重是 1.077±0.001 的 聚 蔗糖(Ficoll)-泛影葡胺(Urografin)(F/H)分层液。Ficoll是蔗糖的多聚体,呈中性,水性高,平均分子量为400000,当密度为1.2 g/ml仍未超出正常生理性