Westernblot经验谈
哈哈,深蒙各位侠士对于兄弟的厚爱和信赖,恐怕我会令大家失望真正做western我也做的不多,不过由于效果都不是很差,所以就对于整个过程中的某些参数对于结果的影响没有深究,正所谓真正经历实验失败的人才会对具体细节理解深刻一样,但是从关于western方面的文献和资料来看,有关各个参数对于结果的影响是有高质量的paper阐述的,所以大侠们的这些问题和想法个人认为完全是可以做出一篇小论文评述的这两天刚好有些时间,就把曾经看的资料都大致再看了一下,自己总结了一下,可能仍然对上述大侠们的问题没有满意的解释,但可能会对大家的理解带来些许的帮助,也希望大家能提出意见和建议,在你们这些大侠面前献丑真是不好意思!首先有必要对整个蛋白电泳的背景有些了解:如今实验室中用的最多的蛋白电泳是源于Lammli于1970年发表在nature上的一篇文章中的方法,这篇文章很特别,不仅被引用的次数较多,而且该篇并不是专门阐述蛋白电泳方法上的提出和改进问题,而是对......阅读全文
专家经验谈：抗体制备法的利与弊
单克隆抗体一直是基础研究、医学诊断和疾病治疗中的重要工具。制备单克隆抗体的传统方法，是诺贝尔奖获得者Georges Köhler和César Milstein在上世纪七十年代开发出来的。这一方法包括：让小鼠接触特定抗原，收集它体内的抗体生产细胞，然后将这些细胞与骨髓瘤细胞融合，形成能够长时间体外
专家经验谈：如何减轻你的测序负担
拷贝数变异（CNV）是指基因拷贝数出现的异常，主要表现为基因组大片段的缺失和重复。CNV是基因组结构变异的重要组成部分，与自闭症、认知功能缺陷、癌症等多种疾病有关。芯片是目前临床上检测CNV的主要工具，但芯片检测在有些方面也是力不从心。举例来说，芯片只能帮助我们判断是否存在序列重复（或缺失），要
做血常规半年之个人经验谈（一）
终于再一次鼓起勇气谈经验,检验版的高手总习惯潜水.作为一个后辈,在此谈自己的经验,谈自己对检验的浅薄认识,或多或少有些买弄的味道,显露出自己不谦虚的一面.好了,废话少说,买弄正式开始,先谈一下我们的工作情况:仪器是SE9500，全自动的,每天上午120个左右,最多180个,全部我一个人做,还要每天下
做血常规半年之个人经验谈（二）
事情太多了，再说就有点卖弄的味道了，还是谈谈自己对检验的看法。1，检验最重要的是要灵活。检验的基础是准，做不准，我们就没有与临床对话的资本，做得不准，谈什么都没有意义了，但是大家不要始终在一个准字上下工夫，检验的核心应该是活，灵活。这个社会什么都要活，用时髦点的语言来讲，就是不要照抄照搬，不要教条主
妊娠期内进行腹腔镜手术经验谈
由于担心它可能对胎儿有害，因此在怀孕期间通常医生会避免进行腹腔镜手术。潜在的担忧包括：气腹期腹内压升高可降低子宫胎盘血流量，导致胎儿缺氧，胎儿吸收二氧化碳可以导致酸中毒，胎儿可能会在穿刺过程中直接或间接受伤。子宫穿孔可能导致早产胎膜早破和早产。但是目前阑尾炎，胆囊疾病，肠系膜囊肿和附件肿块/扭转已在
Westernblot实验中，蛋白上样一般多少含量
重组蛋白，推荐尝试30ng/泳道，细胞裂解液样品推荐 30µg/泳道，可以设定几个梯度。 但是具体样品需要具体分析。也要结合你的一抗对目标分子的检测限来进行调整。
专家经验谈：如何追踪癌症的生物学指标
癌症的生物学指标可以帮助研究者们诊断疾病、预测治疗效果、选择合适的治疗方案、和跟踪疾病的进程。目前，癌症指标的检测大多在集中在染色体异常上，例如染色体倍增、染色体缺失和染色体重排。染色体异常能影响蛋白的表达和功能，进而引发肿瘤或者为细胞癌变创造条件。 随着基因组技术的发展，出现了许多检测癌症指
残留溶剂及其气相分析方法的开发经验谈
前言：化学合成药物中不可避免地会使用有机溶剂，但工艺中有的有机溶剂并不能完全去除掉，这些残留溶剂对人体健康和环境又有可能造成损害，国际协调大会（ICH）对残留溶剂的分类和限量都做了规定，详见公众号转载的文章“ICH常用有机溶剂分类及残留限度”。对于溶剂残留的检测首先要明确可能会有的残留溶剂，这些溶剂
房颤患者的卒中预防——抗凝治疗经验谈
作者：Gregory Y H Lip（英国伯明翰大学心血管医学教授，伯明翰阿斯顿大学血栓形成和血管科学客座教授，丹麦奥尔堡大学心血管医学副教授，塞尔维亚贝尔格莱德大学心脏学客座教授） 卒中预防是房颤管理的核心。首先要识别出较低卒中风险、不需要进行任何抗凝治疗的患者（男性CHA2DS2-
深入了解PID：PID调节方法经验谈（一）
PID就是比例微积分调节，具体你可以参照自动控制课程里有详细介绍！正作用与反作用在温控里就是当正作用时是加热，反作用是制冷控制。 PID控制简介 目前工业自动化水平已成为衡量各行各业现代化水平的一个重要标志。同时，控制理论的发展也经历了古典控制理论、现代控制理论和智能控制理论三个阶段
血清中－miRNA－抽提和实验设计经验谈
人体内的血液循环系统犹如印度的圣河 – 恒河，河水中携带的养分滋养着古老的大地；洗涤带走地上的ㄧ切污秽，人们的一生都在河水中完成。如此的恒河可以想象，河水中充斥着各种物质，有废物有养分，只要你想都可以从河水中捞取。同样的我们的循环系统如同恒河；流动的血液如同恒河水，身体所需的ㄧ切由血液运送，身体
做液相色谱不可不知的经验谈
液相色谱仪可以说是药物分析工作者最常使用的“一门武器”。何时能做液相做的如“打游戏”一般时，才算是到了游刃有余、庖丁解牛的境界。现如今的液相色谱软件均已具备了强大的数据处理功能，如能运用自如，可达事半功倍之效。 水相中溶质的溶解 水相中需溶解的无机盐和表面活性剂等固体溶质，建议
深入了解PID：PID调节方法经验谈（二）
5、PID控制器的参数整定 PID控制器的参数整定是控制系统设计的核心内容。它是根据被控过程的特性确定PID控制器的比例系数、积分时间和微分时间的大小。PID控制器参数整定的方法很多，概括起来有两大类：一是理论计算整定法。它主要是依据系统的数学模型，经过理论计算确定控制器参数。这种方法
Westernblot电泳制胶时出现好多泡泡该怎么办？
有的同学跑Western-blot电泳制胶时出现好多泡泡，一时不知道什么原因，仔细分析后发现以下原因造成：1）首先，玻璃板一定要洗干净，用洗洁净洗，冲干净后再用双蒸水冲一，晾干。配胶的时候沿管壁缓缓加入各个成分，混匀的时候用手轻轻摇匀，如果用枪吹打时要缓慢且不要打到头。2）配胶时混匀要轻，尽量不产生
不同特点妊娠期牙龈瘤的治疗经验谈2
2.病例2 2.1病例简介 患者26岁，妊娠34周，因“上颌牙龈包块长大5周，易出血，无法咀嚼”由妇产科转诊至牙周病科。口腔卫生状况欠佳，菌斑检出率为40%，11—21牙区可见2个肿物，唇侧大小约17mm×6mm×11mm，腭侧大小约21mm×8mm×14mm，表面光滑，可见齿痕和部分假膜，质软，边
心血管疾病体格检查经验谈（精彩病例）（二）
【病例四】 男性，59岁，急性下壁、侧壁心肌梗死、急诊PCI术后3天，诉恶心、剑突下不适。 查体：神清，神志淡漠，T 36.5°C,HR 100次/分，BP 120/65 mmHg,R 18次/分。双肺未闻及干湿罗音，心律齐，心音低，未闻及杂音及附加音，无心包摩擦音。言语、肢体活动均
不同特点妊娠期牙龈瘤的治疗经验谈1
妊娠期牙龈瘤又称为孕瘤，是一种良性增生性牙龈病变，病变组织来源于牙周膜和牙槽突结缔组织。有学者报道妊娠期牙龈瘤发生率约为1.8%~5%，可发生于妊娠的任何时期，伴随着性激素水平升高而增大，龈瘤在妊娠中后期达到高峰。妊娠期牙龈瘤色泽鲜红光亮或暗紫，表面光滑，质地松软，极易出血，瘤体呈分叶状，有蒂或无蒂
心血管疾病体格检查经验谈（精彩病例）（一）
格 检查可以帮助我们进行病因分析、危险分层、并发症分析以及病情变化观察。对于心脏科医生来说，生命体征、一般情况、心肺体征和心肺外体征这几项内容都是不 可或缺的。2014年11月29日至30日，第十届心血管医师规范化培训班暨中国全科医师心血管疾病培训2014在北京召开。北京大学第三医院
经验谈香港雾霾与废弃物处置－细致监测启迪环境治理
空气雾霾与废弃物处理是长期困扰我国大城市的两个重要环境问题。通过对香港近10年(特别是3年以内)在减轻都市雾霾和废弃物处理利用方面的有效做法进行了回顾与总结，以期对京沪深等面临雾霾及垃圾处置同样困境的我国内地大城市有所启迪。经验谈香港雾霾与废弃物处置 细致监测启迪环境治理 在消除都市
DNA－Ladder的功能介绍
DNAladder的形成与细胞调亡密不可分 同时也是判断细胞凋亡的重要标准DNA ladder的形成是连接核小体间的DNA被切割，形成质量不同的片段，由于切割是随机的，各片段的质量不同，但都是一个核小体所含DNA的倍数，形成梯度，经过电泳，从而使分子量不同的部分形成梯度。DNA Ladder是一种即
WB实验中9％和11.5％的分离胶凝固时间是否不同
western-blot中分离胶浓度的选择取决于目的蛋白分子量。 不同的分离胶浓度对不同的目的蛋白分子量的分辨率不一样，比如15%的分离胶更适合45kDa的分目的蛋白，而10%的分离胶更适合70kDa的目的蛋白。
核心期刊发表论文的小技巧
以下为不同作者的经验介绍，请那些投稿经验不丰富的朋友耐心看完，希望对你发文章大有帮助 网友经验谈之（一）：投稿中遇到的问题 我个人认为，现在的中文学报文章都不怎么好： 1、投稿周期长、关系稿多，还收很贵的版面费，不合算； 2、同样影响的外文期刊，不收版面费； 3、要投中文稿件，英文摘要
WB实验中9％和11.5％的分离胶凝固时间是否不同
western-blot中分离胶浓度的选择取决于目的蛋白分子量。 不同的分离胶浓度对不同的目的蛋白分子量的分辨率不一样，比如15%的分离胶更适合45kDa的分目的蛋白，而10%的分离胶更适合70kDa的目的蛋白。 而因为western blot的膜应该是完全覆盖SD
流式细胞仪能筛选出单克隆细胞么
可以。为了制备牛型布鲁菌核蛋白L7/L12的单克隆抗体,试验采用流式细胞仪与间接ELISA相结合的方法进行单克隆筛选,以及Western-blot分析。结果表明:最终筛选出3株表达量较高的杂交瘤细胞株,细胞培养上清液的抗体效价可达1∶3 200,3株单克隆抗体均能与核蛋白L7/L12发生特异性结合,
自动研磨仪研磨小鼠皮肤提取RNA实验步骤
实验地点：南开大学试验样品：小鼠皮肤（RNA提取）实验步骤：1、在2ml圆底离心管单管放入小鼠皮肤样品40-50mg；2、在离心管中加入5mm硬质不锈钢研磨珠1颗，盖好管盖，装入鼎昊源TL1000自动研磨仪适配器中；3、将装有样品的适配器浸入液氮中；4、待液氮不沸腾后取出，迅速安装上机，采用间歇研磨
乙酰化蛋白快速检测和定量
Rapid detection and quantitation of total cellular acetylated proteins using our research products