Westernblot电泳制胶时出现好多泡泡该怎么办？
有的同学跑Western-blot电泳制胶时出现好多泡泡，一时不知道什么原因，仔细分析后发现以下原因造成：1）首先，玻璃板一定要洗干净，用洗洁净洗，冲干净后再用双蒸水冲一，晾干。配胶的时候沿管壁缓缓加入各个成分，混匀的时候用手轻轻摇匀，如果用枪吹打时要缓慢且不要打到头。2）配胶时混匀要轻，尽量不产生气泡，上胶时要快，枪也不打到底。加完分离胶后用双蒸水封，待其凝固。即使在上胶时液面上有气泡，加水后也会浮上来。分离胶凝好后，倒掉里面的水，用吸水纸吸干，再加浓缩胶，迅速插梳子。3）倒胶的时候，用1ml的枪沿一侧缓缓加入，不要打到头，以免带入气泡！4）将胶在小烧杯里配好后，将电泳槽略微倾斜，将烧杯的嘴靠在玻璃边缘，直接倒进去，速度快，而且不容易产生气泡，不妨试试5）用双蒸水封时建议用200ul的枪加水，这样压力小，以免把胶冲起来！6）国产的只能是缓慢加样，别把气泡加进去。如果加进去了，小心把整个板在桌上敲敲可以让气泡浮上来。7）分离胶中......阅读全文
Westernblot电泳制胶时出现好多泡泡该怎么办？
有的同学跑Western-blot电泳制胶时出现好多泡泡，一时不知道什么原因，仔细分析后发现以下原因造成：1）首先，玻璃板一定要洗干净，用洗洁净洗，冲干净后再用双蒸水冲一，晾干。配胶的时候沿管壁缓缓加入各个成分，混匀的时候用手轻轻摇匀，如果用枪吹打时要缓慢且不要打到头。2）配胶时混匀要轻，尽量不产生
水平电泳槽的制胶步骤介绍
主要特征: ·模具一次成型，耐冲击、耐高温、耐腐蚀、不漏液。 ·缓冲容量充足，既可以起到良好的冷却效果，又可以使电泳过程中PH值保持稳定。 ·可拆卸电极架，使电极的维修及更换更加方便、快捷、安全。 ·有效防止槽内液体挥发或触电的透明上盖，开盖自动断电，确保操作安全。·配备制胶槽，省去胶带封胶的繁琐操
1％琼脂凝胶电泳怎么制胶
操作步骤如下：1.制备1%琼脂糖凝胶(大胶用70ml,小胶用50ml):称取0.7 g(0.5 g)琼脂糖置于锥形瓶中,加入70 ml(50ml)1×TAE,瓶口倒扣小烧杯.微波炉加热煮沸3次至琼脂糖全部融化,摇匀,即成1.0%琼脂糖凝胶液.2.胶板制备:取电泳槽内的有机玻璃内槽(制胶槽)洗干净,晾
蛋白质电泳槽－Western－Blot－垂直电泳制胶器漏胶问题分析
Western Blot转膜之前免不了要在蛋白质垂直电泳槽中跑胶分离蛋白质。关于制胶，大多数用户还是喜欢用电泳槽配套的制胶器来自己制胶跑电泳，经济实惠。但是很多实验室因为设备已经使用多年，常会发现垂直电泳槽的制胶器没有原来好用了，经常会有“漏胶”或者“漏液”的现象，也就是说，凝胶溶液还没有来
电泳槽制胶优点及其注意事项
伯乐电泳槽制胶优点 封边垫条*地固定在长玻板上，保证玻板对齐，防止漏胶 凸轮卡锁的制胶框操作简单，在任何平面上都能对齐玻板 特殊的塑料电泳梳不会抑制凝胶聚合反应，制胶过程中，内置的脊可避免的空气接触，保证均一的凝胶聚合 标有厚底和孔数的玻板和电泳梳便于识别 平行排列的灌胶架能同时看到正在
蛋白质电泳制胶要注意哪些方面
总结平时的实验经验,大概需要注意以下几条：1.玻璃板需要清洗干净,不然蛋白质在凝胶中电泳会受到阻碍.一般用软布在自来水下清洗后用蒸馏水洗一下,或者直接偷懒的办法就是拿酒精棉球擦擦.2.确保制胶所用试剂有效.3.根据你的目的蛋白分子量确定胶的浓度.一般采用如下：蛋白分子量大小（kd） 凝胶百分比(10
SubCell－G－水平电泳槽制胶优点
使用bio-rad电泳Sub-Cell GT水平电泳槽制胶有以下几个优点：1、封边垫条永久地固定在长玻板上，保证玻板精确对齐，防止漏胶 2、凸轮卡锁的制胶框操作简单，在任何平面上都能精确对齐玻板 3、特殊的塑料电泳梳不会抑制凝胶聚合反应，制胶过程中，内置的脊可避免的空气接触，保证均一的凝胶聚合 4、
westernblot中分离胶的浓度怎么选择
western blot中分离胶浓度的选择取决于目的蛋白分子量 不同的分离胶浓度对不同的目的蛋白分子量的分辨率不一样，比如15%的分离胶更适合45kDa的分目的蛋白，而10%的分离胶更适合70kDa的目的蛋白而因为western blot的膜应该是完全覆盖SDS PAGE的凝胶，所以不用太担心条带在
westernblot中分离胶的浓度怎么选择
溴酚蓝跑到胶的底部为准，26kD在10%的由下往上1/4的地方，而15%就在由下往上大约1/2（不太确定）的地方，对于分子量比较小的蛋白，胶的浓度越大，分离效果越好。但是必须考虑到，胶的孔径一旦小于蛋白-SDS复合体的直径，分子量大于这个蛋白的所有蛋白仍然不能有好的分离效果。如果孔径太大，所有蛋白都
westernblot中分离胶的浓度怎么选择
western blot中分离胶浓度的选择取决于目的蛋白分子量 不同的分离胶浓度对不同的目的蛋白分子量的分辨率不一样，比如15%的分离胶更适合45kDa的分目的蛋白，而10%的分离胶更适合70kDa的目的蛋白而因为western blot的膜应该是完全覆盖SDS PAGE的凝胶，所以不用太担心条带在
westernblot中分离胶的浓度怎么选择
western blot中分离胶浓度的选择取决于目的蛋白分子量 不同的分离胶浓度对不同的目的蛋白分子量的分辨率不一样，比如15%的分离胶更适合45kDa的分目的蛋白，而10%的分离胶更适合70kDa的目的蛋白而因为western blot的膜应该是完全覆盖SDS PAGE的凝胶，所以不用太担心条带在
westernblot中分离胶的浓度怎么选择
western blot中分离胶浓度的选择取决于目的蛋白分子量 不同的分离胶浓度对不同的目的蛋白分子量的分辨率不一样，比如15%的分离胶更适合45kDa的分目的蛋白，而10%的分离胶更适合70kDa的目的蛋白而因为western blot的膜应该是完全覆盖SDS PAGE的凝胶，所以不用太担心条带在
westernblot中分离胶的浓度怎么选择
western blot中分离胶浓度的选择取决于目的蛋白分子量 不同的分离胶浓度对不同的目的蛋白分子量的分辨率不一样，比如15%的分离胶更适合45kDa的分目的蛋白，而10%的分离胶更适合70kDa的目的蛋白而因为western blot的膜应该是完全覆盖SDS PAGE的凝胶，所以不用太担心条带在
westernblot中分离胶的浓度怎么选择
溴酚蓝跑到胶的底部为准，26kD在10%的由下往上1/4的地方，而15%就在由下往上大约1/2（不太确定）的地方，对于分子量比较小的蛋白，胶的浓度越大，分离效果越好。但是必须考虑到，胶的孔径一旦小于蛋白-SDS复合体的直径，分子量大于这个蛋白的所有蛋白仍然不能有好的分离效果。如果孔径太大，所有蛋白都
westernblot胶不凝固是什么原因
1，复查一遍浓缩胶，分离胶各buffer的组分是否配制有误，特别是pH，现在气温上升，原来冬天配制的溶液的pH和现在可能会相差很多，建议复查，如果pH不对，重新配过。一般情况下，对于pH有要求的溶液，季节更换的时候，基本要重新配过的。原来以贮存液形式存在的溶液，在稀释用作工作液的时候，也要特别注意p
westernblot胶不凝固是什么原因
1，复查一遍浓缩胶，分离胶各buffer的组分是否配制有误，特别是pH，现在气温上升，原来冬天配制的溶液的pH和现在可能会相差很多，建议复查，如果pH不对，重新配过。一般情况下，对于pH有要求的溶液，季节更换的时候，基本要重新配过的。原来以贮存液形式存在的溶液，在稀释用作工作液的时候，也要特别注意p
SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳——制胶（用于垂直电泳,水平电泳）
试剂、试剂盒丙烯酰胺单体贮液磷酸缓冲液贮液咪唑缓冲液贮液过硫酸铵浓缩胶缓冲液贮液分离胶缓冲液贮液SDSTEMED实验步骤SDS 电泳的制胶方法与 “垂直平板电泳的制胶” 和 “水平平板电泳的制胶” 所述的常规聚丙烯酰胺凝胶的灌注方法基本相同，只是在 SDS 电泳制胶时单体贮液不需要抽气，以免产生泡沫
western－blot－可提前多久制胶，制好的胶可保存多久
提前一周勉强可以把。提前两三天肯定没问题。封口放4度冰箱。不要太久，会不好。
DNA电泳（agarose胶）
DNA琼脂糖凝胶电泳 实验方法原理 利用DNA分子在琼脂糖凝胶中泳动时具有的电荷效应和分子筛效应。电荷效应是指DNA分子在高于等电点的pH溶液中带负电，在电场
DNA电泳（agarose胶）
实验材料 DNA样品试剂、试剂盒 琼脂糖 电泳缓冲液溴化乙锭 上样缓冲液仪器、耗材 电泳仪电泳漕 透射紫外灯 胶带纸 紫外成像仪
DNA电泳（agarose胶）
DNA电泳可用于：（1）分离不同大小的DNA片段；（2）鉴定目的DNA片段；（3）纯化和回收DNA片段。实验方法原理利用DNA分子在琼脂糖凝胶中泳动时具有的电荷效应和分子筛效应。电荷效应是指DNA分子在高于等电点的pH溶液中带负电，在电场中向正极移动，且相同数量的双链DNA几乎具有等量的净电荷，能以
非变性胶蛋白电泳
Section 2.1Nondenaturing Polyacrylamide Gel Electrophoresis of ProteinsJohn M. Walker1. IntroductionSDS-PAGE (Section 2.2) is probably the most commo
RNA甲醛变性胶电泳
提取样品的总RNA后，一般根据RNA的凝胶电泳图来判断RNA的质量。由于RNA容易形成二级结构，因此常用甲醛变性胶来进行RNA电泳，得到的电泳图能真实反映RNA的质量状况。一、试剂：DEPC（Sigma公司产品），MOPs（Bocherigmer公司产品），甲酰胺（Formamide，Sigma公司
电泳胶浓度的选择
浓缩胶一般都是5%的,下面的是5ML的配方,其余的你可以自己算了5mlH2O 3.6acrylamide mix（30%） 0.621M Tris(PH6.8) 0.6310% SDS 0.0510% AP 0.05TEMED 0.005
电泳切胶的小窍门
一些注意事项1.电泳的buffer和gel都是新制的，切胶的台子清理干净，刀片最好洗净灭菌，总之一句话就是保证切下的带没有外源dna污染。2.切胶是要把整个目的片断所在位置的胶全部回收。为了减少胶的体积，可以用相对比较薄的胶来做，只要够点样即可，也可采用薄而宽的梳子来跑胶。3.关于防护，在一般有机玻
电泳后跑胶跑多久
2%的琼脂糖凝胶电泳跑多少时间合适 看染料的位置就好了, 怕时间太短你可以放回去继续跑嘛
免疫电泳实验_倒胶
试剂、试剂盒Tris-巴比妥缓冲液贮液电极缓冲液琼脂糖溶液实验步骤为使琼脂糖溶液均匀铺层和得到重复的结果，玻璃板必须水平放置。为便于在免疫电泳中从第一向到第二向的转移，最好使用琼脂糖凝胶支持膜。12 ml 琼脂糖溶液在 84 cm X 94 cm 上的凝胶厚度为 1.5 mm。倒胶后约 3 分钟凝固
垂直电泳槽灌胶演示
放置凝胶三明治夹的竖板使之定位更准确* “扣紧-放开的ZL设计* 透明门便于观察 *取下凝胶三明治夹时无滴水
电泳浓缩胶浓度怎么选取
1,看目的蛋白的大小 一般actin以下的可以跑12胶 红线左右可以用12或10跑 几百的很大的用6的胶 小蛋白12的10的一般都能跑 如果不考虑效率的话...能跑多慢跑多慢,越慢跑的越好看 2，看样品浓度多少，以及你想用几次 通常我们是定到4微每微，总量10...5919
电泳跑胶电压和时间
sds-page跑电泳时，跑到浓缩胶和分离胶分界处时一般是要换电压的。具体是40变60还是80变120要根据实际试验的时间来确定，而且这个时间的要求不会很严格，也就是说对电压的要求不严。我做这个试验时，师姐给我讲的是由80变到120~140即可