关于柱层析的实验方法和技巧
(注意：有机溶剂对身体特有害别是心肺；肝脏等所有过柱操作都要在通风橱里进行！！)常说的过柱子应该叫柱层析分离，也叫柱色谱。我们常用的是以硅胶或氧化铝作固定相的吸附柱。由于柱分的经验成分太多，所以下面我就几年来过柱的体会写些心得，希望能有所帮助。 1、柱子可以分为：加压，常压，减压压力可以增加淋洗剂的流动速度，减少产品收集的时间，但是会减低柱子的塔板数。所以其他条件相同的时候，常压柱是效率最高的，但是时间也最长，比如天然化合物的分离，一个柱子几个月也是有的。减压柱能够减少硅胶的使用量，感觉能够节省一半甚至更多，但是由于大量的空气通过硅胶会使溶剂挥发（有时在柱子外面有水汽凝结），以及有些比较易分解的东西可能得不到，而且还必须同时使用水泵抽气（很大的噪音，而且时间长）。以前曾经大量的过减压柱，对它有比较深厚的感情，但是自从尝试了加压后，就几乎再也没动过减压的念头了。加压柱是一种比较好的方法，与常压柱类似，只不过外加压力使淋洗......阅读全文
关于柱层析的实验方法和技巧
(注意：有机溶剂对身体特有害别是心肺；肝脏等所有过柱操作都要在通风橱里进行！！)常说的过柱子应该叫柱层析分离，也叫柱色谱。我们常用的是以硅胶或氧化铝作固定相的吸附柱。由于柱分的经验成分太多，所以下面我就几年来过柱的体会写些心得，希望能有所帮助。 1、柱子可以分为：加压，常压，减压压力可以增加淋洗剂的
柱层析分离实验方法和技巧
常说的过柱子应该叫柱层析分离，也叫柱色谱。我们常用的是以硅胶或氧化铝作固定相的吸附柱。由于柱分的经验成分太多，所以下面我就几年来过柱的体会写些心得，希望能有所帮助。 一：柱子可以分为：加压，常压，减压 1.压力可以增加淋洗剂的流动速度，减少产品收集的时间，但是会减低柱子的塔板数。所以其
关于过柱的实验方法和技巧
常说的过柱子应该叫柱层析分离，也叫柱色谱。我们常用的是以硅胶或氧化铝作固定相的吸附柱。由于柱分的经验成分太多，所以下面我就几年来过柱的体会写些心得，希望能有所帮助。 1、柱子可以分为：加压，常压，减压压力可以增加淋洗剂的流动速度，减少产品收集的时间，但是会减低柱子的塔板数。所以其他条件相同的时候，常
TLC柱层析上样的技巧
上样的技巧上样也有湿法和干法之分： 湿法一般用淋洗剂溶解样品， 也可以用二氯甲烷、 乙酸乙酯等， 但溶剂越少越好。再用胶头滴管转移得到的溶液，沿着层析柱内壁缓慢地均匀加入。在不用海沙的情况下， 尽量不要破坏硅胶面。加样后， 打开柱底活塞， 让固定相充分地吸附所加样品。然后再加入一些洗脱剂，再充分地吸
TLC柱层析过柱的技巧
过柱的技巧柱层析按过柱时的压力可以分为： 加压， 常压， 减压。压力可以增加淋洗剂的流动速度， 减少产品收集的时间， 但是会减低柱子的塔板数。 所以其他条件相同的时候，常压柱是效率最高的， 但是时间也最长， 例如一些天然化合物的分离，有时一个柱子过几个月也有可能。减压柱能够减少硅胶的使用量，但是由于
过柱的实验方法和技巧
常说的过柱子应该叫柱层析分离，也叫柱色谱。我们常用的是以硅胶或氧化铝作固定相的吸附柱。由于柱分的经验成分太多，所以下面我就几年来过柱的体会写些心得，希望能有所帮助。 一：柱子可以分为：加压，常压，减压 1.压力可以增加淋洗剂的流动速度，减少产品收集的时间，但是会减低柱子的塔板
过柱的实验方法和技巧
常说的过柱子应该叫柱层析分离，也叫柱色谱。我们常用的是以硅胶或氧化铝作固定相的吸附柱。由于柱分的经验成分太多，所以下面我就几年来过柱的体会写些心得，希望能有所帮助。 一：柱子可以分为：加压，常压，减压1.压力可以增加淋洗剂的流动速度，减少产品收集的时间，但是会减低柱子的塔板数。所以其他条件相同的时候
TLC中柱层析时装柱子的技巧
装柱子的技巧柱层析的装柱非常重要，装柱的效果会直接影响层析分离效果。有湿法装柱和干法装柱等两种方法。湿法装柱很简单，使用也最普遍， 就是先用比固定相多一倍的洗脱剂将固定相活成匀浆，柱子底部先用脱脂棉塞紧， 然后倒入洗脱剂将脱脂棉中气泡赶出。用漏斗将活好的固定相倒入柱子中， 打开底部活塞， 将柱子中高
关于柱层析的装柱方法介绍
装柱子（添硅胶）时，有两种方法：即湿法装柱和干法装柱，二者各有优劣。不论干法还是湿法，硅胶（固定相）的上表面一定要平整，并且硅胶（固定相）的高度一般为15cm左右，太短了可能分离效果不好，太长了也会由于扩散或拖尾导致分离效果不好。 湿法装柱是先把硅胶用适当的溶剂拌匀后，再填入柱子中，然后再加压
实验室防倒吸的方法和使用技巧
实验室真空抽滤和废液抽吸的用户再使用操作的时候往往会碰到一个难题，进入到集液瓶中的液体很容易倒吸抽入真空泵内。造成的后果轻则需要拆开泵体进行清洗，更换进出气阀片，严重的甚至会直接损坏电机。 很多设计较为优良的过滤和吸液产品会在先期就考虑到防倒吸的功能，比如圣斯特FS3310真空抽滤装置、BV24
柱层析的装柱和上样方法
装柱子（添硅胶）时，有两种方法：即湿法装柱和干法装柱，二者各有优劣。不论干法还是湿法，硅胶（固定相）的上表面一定要平整，并且硅胶（固定相）的高度一般为15cm左右，太短了可能分离效果不好，太长了也会由于扩散或拖尾导致分离效果不好。湿法装柱是先把硅胶用适当的溶剂拌匀后，再填入柱子中，然后再加压用淋洗剂
实验操作技巧和禁忌
常见化学药品的贮存 硝酸固碘硝酸银，低温避光棕色瓶。 液溴氨水易挥发，阴凉保存要密封。 白磷存放需冷水，钾钠钙钡煤油中， 碱瓶需用橡皮塞，塑铅存放氟化氢。 易变质药放时短，易燃易爆避火源。 实验室中干燥剂，蜡封保存心坦然。 解释： 1.硝酸固碘硝酸银，低温避光棕色瓶：意思是说硝酸
柱层析的装柱方法和常见问题
装柱子（添硅胶）时，有两种方法：即湿法装柱和干法装柱，二者各有优劣。不论干法还是湿法，硅胶（固定相）的上表面一定要平整，并且硅胶（固定相）的高度一般为15cm左右，太短了可能分离效果不好，太长了也会由于扩散或拖尾导致分离效果不好。湿法装柱是先把硅胶用适当的溶剂拌匀后，再填入柱子中，然后再加压用淋洗剂
柱层析的装柱方法
装柱子（添硅胶）时，有两种方法：即湿法装柱和干法装柱，二者各有优劣。不论干法还是湿法，硅胶（固定相）的上表面一定要平整，并且硅胶（固定相）的高度一般为15cm左右，太短了可能分离效果不好，太长了也会由于扩散或拖尾导致分离效果不好。湿法装柱是先把硅胶用适当的溶剂拌匀后，再填入柱子中，然后再加压用淋洗剂
电泳做Western－Blot实验的方法技巧
电泳做western blot的时候，大家往往会摸索一抗、二抗的浓度，封闭时间，曝光时间等等，而每次变换其中的一个条件就需要从新跑胶、转膜，甚至重新提蛋白，这样会浪费大量的时间。其实完全没有必要这样。一次转膜后，将PVDF膜晾干，裁减成小块，保存起来，用的时候取出一块，没有任何影响。这对于摸索条
离心柱层析的概念和应用
中文名称离心柱层析英文名称spun-column chromatography定 义将小型的层析柱置于离心管中以离心力代替重力进行小量样品的快速层析法。常用于小量样品凝胶过滤脱盐和吸附层析等。应用学科生物化学与分子生物学（一级学科），方法与技术（二级学科）
柱层析操作方法的选择
目前 ,柱色谱分离的操作方式 ,主要包括常压分离、减压分离和加压分离 3种模式。常压分离是最简单的分离模式方便、简单 ,但是洗脱时间长。减压分离尽管能节省填料的使用量 ,但是由于大量的空气通过填料会使溶剂挥发 ,并且有时在柱子外面会有水汽凝结 ,以及有些易分解的化合物也难以得到 ,而且还必须同时
盘绕螺旋结构的设计和优化技巧实验
盘绕螺旋结构的设计和优化技巧 实验步骤 本节讨论盘绕螺旋特异性设计所涉及的几个不同方面。我们的目标是在核心处和
盘绕螺旋结构的设计和优化技巧实验
虽然表观上简单，盘绕螺旋（coiled coil ) 模体是高度专一的，并在理解三级结构及其形成方面具有重要意义。最常观察到的盘绕螺旋形态——平行二聚态，其一般的结构类型仍有待全面的描述。尽管如此，其结构已呈现出在某些特定位置需要某些特定类型氨基酸的严格规则。本实验来源「现代蛋白质工程实验指南」〔德
简述硅胶柱层析惯用方法
1.称量。200-300目硅胶，称30-70倍于上样量；如果极难分，也可以用100倍量的硅胶H。干硅胶的视密度在0.4左右，所以要称40g硅胶，用烧杯量100ml也可以。 2.搅成匀浆。加入干硅胶体积一倍的溶剂用玻璃棒充分搅拌。如果洗脱剂是石油醚/乙酸乙酯/丙酮体系，就用石油醚拌；如果洗脱剂是
全面的实验炉操作知识和技巧
全面的实验炉操作知识和技巧：实验炉是所有高温热处理实验用电炉的统称，其可分为箱式实验炉、管式实验炉、升降实验炉、真空实验炉和升降实验炉等等。按照不同行业需求，实验炉的工作温度一般分为800℃、1000℃、1200℃、1400℃、1600℃及1800℃，高可达2200℃。因此，在操作实验炉时要先做好防
－柱层析技术的概念和应用
柱层析技术(Column chromatography) 又称柱色谱技术，主要原理是根据样品混合物中各组分在固定相和流动相中分配系数不同，经多次反复分配将组分分离开来。
实验室溶液配制方法与技巧
液体溶液配制可以说是实验室分析人员最基础的一门技术，也是每天工作中的必选项。液体溶液的配置包括溶质的计算、移液、定容等基础操作，还包括一些混合溶液的前后加入顺序及利用一些试剂自身的化学性质，掌握了溶液配制的技巧，可以大大缩短配置时间，提高实验效率。 我们都知道，溶液是由至少
关于硅胶柱层析法的基本介绍
硅胶层析法的分离原理是根据物质在硅胶上的吸附力不同而得到分离， 一般情况下极性较大的物质易被硅胶吸附，极性较弱的物质不易被硅胶吸附，整个层析过程即是吸附、解吸、再吸附、再解吸过程。
盘绕螺旋结构的设计和优化技巧实验（一）
本节讨论盘绕螺旋特异性设计所涉及的几个不同方面。我们的目标是在核心处和边沿位置选择氨基酸以得到期望的寡聚态（ 见 3. 2.1)、特异性（见 3. 2. 2 ) 和螺旋取向 ( 见 3.2.3 )。这里，我们也把针对特定稳定性的不同设计方案联系起来。第 4 小节（见 3. 2.4 ) 涉及整
盘绕螺旋结构的设计和优化技巧实验（二）
( 3 ) 在研究设计好的反平行盘绕螺旋核心位置的丙氨酸的位置效应时（见注 3 )，Monera 等发现，当丙氨酸残基在适当位置（即在同一个环上）时，会形成二聚体 [ 20 ] 。如果丙氨酸残基不同步，会形成四聚体。对此，最可能的解释是，四聚体中同步丙氨酸形成的孔穴高度地不稳定，因而倾向
盘绕螺旋结构的设计和优化技巧实验（四）
( 5 ) Arndt 等设计了一个多肽库。此库的设计基于 Jim-Fos 杂二聚，库中 b、c 和 f 残基来自于各自的野生型蛋白，a 位和 d 位为 Val 和 Leu ( 带有 a3Asn 在核心的插入例外，此插入引导期望的螺旋取向和寡聚态），e 和 g 残基则用三核苷酸作改变以得
盘绕螺旋结构的设计和优化技巧实验（三）
( 9 ) Ji 等突变了 gp41—— 来自猿猴免疫缺陷病毒的 6 螺旋束包膜蛋白，与 gp120 一起，负责病毒与 CD4+ 细胞的融合 [ 34 ] 。在结构上，它是由反平行杂二聚体组成的三聚体蛋白。在这一研究中，为核心氢键和盐桥负责的（两个 Gln 和两个 Thr 残基）4 个被掩埋
盘绕螺旋结构的设计和优化技巧实验（六）
3.2.5.1 简并密码子使用简并密码子，可在希望改变的位点上编码若干氨基酸的混合密码。同样，在仔细选择要随机化的对应位点引入简并密码子，不仅可以引入期望的碱基，而且可以引人期望的氨基酸。如已经讨论过的，盘绕螺旋在不同位置对氨基酸类型有偏好。例如，e 和 g 残基常是极性且互补的（表 3. 4)
盘绕螺旋结构的设计和优化技巧实验（五）
3.2.4.1 螺旋长度一般来说，在盘绕螺旋链长度增加时，观察到稳定性的（线性）增加 [61] 。这是因为盘绕螺旋的序列将会起到额外的重要作用。例如，Lau 和 Hodges 构建了一个比原肌球蛋白（ 284 残基盘绕螺旋）还稳定的 29 聚体（见 注 25；参考文献 [ 62] )。在