过柱的实验方法和技巧

常说的过柱子应该叫柱层析分离,也叫柱色谱。我们常用的是以硅胶或氧化铝作固定相的吸附柱。由于柱分的经验成分太多,所以下面我就几年来过柱的体会写些心得,希望能有所帮助。 一:柱子可以分为:加压,常压,减压 1.压力可以增加淋洗剂的流动速度,减少产品收集的时间,但是会减低柱子的塔板数。所以其他条件相同的时候,常压柱是效率最高的,但是时间也最长,比如天然化合物的分离,一个柱子几个月也是有的。 2.减压柱能够减少硅胶的使用量,感觉能够节省一半甚至更多,但是由于大量的空气通过硅胶会使溶剂挥发(有时在柱子外面有水汽凝结),以及有些比较易分解的东西可能得不到,而且还必须同时使用水泵抽气(很大的噪音,而且时间长)。以前曾经大量的过减压柱,对它有比较深厚的感情,但是自从尝试了加压后,就几乎再也没动过减压的念头了。 3.加压柱是一种比较好的方法,与常压柱类似,只不过外加压力使淋洗剂走的快些。压力的提供可以是......阅读全文

过柱的实验方法和技巧

   常说的过柱子应该叫柱层析分离,也叫柱色谱。我们常用的是以硅胶或氧化铝作固定相的吸附柱。由于柱分的经验成分太多,所以下面我就几年来过柱的体会写些心得,希望能有所帮助。    一:柱子可以分为:加压,常压,减压    1.压力可以增加淋洗剂的流动速度,减少产品收集的时间,但是会减低柱子的塔板

过柱的实验方法和技巧

常说的过柱子应该叫柱层析分离,也叫柱色谱。我们常用的是以硅胶或氧化铝作固定相的吸附柱。由于柱分的经验成分太多,所以下面我就几年来过柱的体会写些心得,希望能有所帮助。 一:柱子可以分为:加压,常压,减压1.压力可以增加淋洗剂的流动速度,减少产品收集的时间,但是会减低柱子的塔板数。所以其他条件相同的时候

关于过柱的实验方法和技巧

常说的过柱子应该叫柱层析分离,也叫柱色谱。我们常用的是以硅胶或氧化铝作固定相的吸附柱。由于柱分的经验成分太多,所以下面我就几年来过柱的体会写些心得,希望能有所帮助。 1、柱子可以分为:加压,常压,减压压力可以增加淋洗剂的流动速度,减少产品收集的时间,但是会减低柱子的塔板数。所以其他条件相同的时候,常

TLC柱层析过柱的技巧

过柱的技巧柱层析按过柱时的压力可以分为: 加压, 常压, 减压。压力可以增加淋洗剂的流动速度, 减少产品收集的时间, 但是会减低柱子的塔板数。 所以其他条件相同的时候,常压柱是效率最高的, 但是时间也最长, 例如一些天然化合物的分离,有时一个柱子过几个月也有可能。减压柱能够减少硅胶的使用量,但是由于

色谱实验室过柱子技巧归纳

柱层析分离技巧可以说是经验成分居多,本文是小编从网络摘录的一段某热心网友的过柱心得,希望能对您有所帮助。   柱层析技术也称柱色谱技术,即常说的过柱子,应该叫柱层析分离,也叫柱色谱。我们常用的是以硅胶或氧化铝作固定相的吸附柱。一根柱子里先填充不溶性基质形成固定相,将蛋白质混合样品加到柱

色谱柱的平衡和再生技巧

反向色谱柱在经过出厂测试后是保存在甲醇(或乙腈)/水中的。请一定确保您所使用的活动相和甲醇(或乙腈)/水互溶,由于色谱柱在运输过程中可能会干掉,因此在用活动相分析样品之前,应使用分10-20倍的体积的甲醇或乙腈平衡色谱柱。  假如您所使用的活动相中含有缓冲盐,应留意用含水量很高(约95%)的活动

蛋白过镍柱纯化的原理和步骤

Ni柱中的氯化镍可以与有HIs(组蛋白)标签的蛋白结合,也可以与咪唑结合。步骤是:过柱子前可以选择Ni柱重生,也就是往柱子里倒氯化镍,一个柱长体积就行了,然后平衡柱子,拿你自己的buffer,给蛋白提供最适的环境,我一般平衡4个柱长,然后蛋白上样,你可以让他自己挂,这样挂柱子的效果好一些,如果流速太

蛋白过镍柱纯化的原理和步骤

Ni柱中的氯化镍可以与有HIs(组蛋白)标签的蛋白结合,也可以与咪唑结合。步骤是:过柱子前可以选择Ni柱重生,也就是往柱子里倒氯化镍,一个柱长体积就行了,然后平衡柱子,拿你自己的buffer,给蛋白提供最适的环境,我一般平衡4个柱长,然后蛋白上样,你可以让他自己挂,这样挂柱子的效果好一些,如果流速太

关于柱层析的实验方法和技巧

(注意:有机溶剂对身体特有害别是心肺;肝脏等所有过柱操作都要在通风橱里进行!!)常说的过柱子应该叫柱层析分离,也叫柱色谱。我们常用的是以硅胶或氧化铝作固定相的吸附柱。由于柱分的经验成分太多,所以下面我就几年来过柱的体会写些心得,希望能有所帮助。 1、柱子可以分为:加压,常压,减压压力可以增加淋洗剂的

色谱柱的活化和日常维护技巧

1.新的色谱柱活化:用100%甲醇1毫升/分钟洗涤60分钟,然后更换活性相以保持平衡。如果活性相中含有缓冲盐,则在更换活性相之前,应先将活性相替换为过渡活性相,然后再更换活性相。2 .日常维护(1)主张检测前样品和活动相进行过滤;(2)建议每天完成样品后应及时清洗样品;(3)常规试验后,直接选择90

高效液相色谱柱的正确使用方法和维护技巧

一、高效液相色谱柱的方向: 柱子上的指示标签要和流动相溶液体方向一致,如果方向相反,会影响色谱柱的柱效和使用寿命 二、高效液相新色谱柱的使用: 新色谱柱使用前,先要活化一下,具体方法如下:1. 首先把色谱柱接在泵上,检测器一端不接(注意)废液直接从柱子另一端流出2. 使用纯甲醇溶液,并以1ml/mi

实验室防倒吸的方法和使用技巧

 实验室真空抽滤和废液抽吸的用户再使用操作的时候往往会碰到一个难题,进入到集液瓶中的液体很容易倒吸抽入真空泵内。造成的后果轻则需要拆开泵体进行清洗,更换进出气阀片,严重的甚至会直接损坏电机。  很多设计较为优良的过滤和吸液产品会在先期就考虑到防倒吸的功能,比如圣斯特FS3310真空抽滤装置、BV24

过柱的柱子的尺寸

应该是粗长的最好。柱子长了,相应的塔板数就高。柱子粗了,上样后样品的原点就小(反映在柱子上就是样品层比较薄),这样相对的减小了分离的难度。试想如果柱子十厘米,而样品就有二厘米,那么分离的难度可想而知,恐怕要用很低极性的溶剂慢慢冲了。而如果样品层只有0.5厘米,那么各组分就比较容易得到完全分离了。当然

柱层析分离实验方法和技巧

   常说的过柱子应该叫柱层析分离,也叫柱色谱。我们常用的是以硅胶或氧化铝作固定相的吸附柱。由于柱分的经验成分太多,所以下面我就几年来过柱的体会写些心得,希望能有所帮助。   一:柱子可以分为:加压,常压,减压   1.压力可以增加淋洗剂的流动速度,减少产品收集的时间,但是会减低柱子的塔板数。所以其

过柱的经验之谈

常说的过柱子应该叫柱层析分离,也叫柱色谱。我们常用的是以硅胶或氧化铝作固定相的吸附柱。由于柱分的经验成分太多,所以下面我就几年来过柱的体会写些心得,希望能有所帮助。柱子可以分为:加压,常压,减压。压力可以增加淋洗剂的流动速度,减少产品收集的时间,但是会减低柱子的塔板数。所以其他条件相同的时候,常压柱

实验操作技巧和禁忌

  常见化学药品的贮存  硝酸固碘硝酸银,低温避光棕色瓶。  液溴氨水易挥发,阴凉保存要密封。  白磷存放需冷水,钾钠钙钡煤油中,  碱瓶需用橡皮塞,塑铅存放氟化氢。  易变质药放时短,易燃易爆避火源。  实验室中干燥剂,蜡封保存心坦然。  解释:  1.硝酸固碘硝酸银,低温避光棕色瓶:意思是说硝酸

蛋白过镍柱纯化的原理和步骤是什么

Ni柱中的氯化镍可以与有HIs(组蛋白)标签的蛋白结合,也可以与咪唑结合。步骤是:过柱子前可以选择Ni柱重生,也就是往柱子里倒氯化镍,一个柱长体积就行了,然后平衡柱子,拿你自己的buffer,给蛋白提供最适的环境,我一般平衡4个柱长,然后蛋白上样,你可以让他自己挂,这样挂柱子的效果好一些,如果流速太

蛋白过镍柱纯化的原理和步骤是什么

步骤是:过柱子前可以选择Ni柱重生,也就是往柱子里倒氯化镍,一个柱长体积就行了,然后平衡柱子,拿你自己的buffer,给蛋白提供最适的环境,我一般平衡4个柱长,然后蛋白上样,你可以让他自己挂,这样挂柱子的效果好一些,如果流速太慢,可以加个恒流泵,但是一定不能太快,太快挂柱效果差,当然你也可以选择循环

分享色谱柱柱活化冲洗的技巧

   色谱柱使用pH范围在1.5~10.0,通常建议使用范围pH为2.0~8.0比较合适,流动相超出pH范围将会导致硅胶基质流失和键合相断裂使柱效下降,使用寿命变短,所以要严格控制pH范围。   新的色谱柱活化:采用100%甲醇1ml/min冲洗60min,再换成流动相进行平衡;如果流动相中含有缓

分享色谱柱柱活化冲洗的技巧

   色谱柱使用pH范围在1.5~10.0,通常建议使用范围pH为2.0~8.0比较合适,流动相超出pH范围将会导致硅胶基质流失和键合相断裂使柱效下降,使用寿命变短,所以要严格控制pH范围。   新的色谱柱活化:采用100%甲醇1ml/min冲洗60min,再换成流动相进行平衡;如果流动相中含有缓

新的色谱柱柱活化冲洗技巧

  一、新的色谱柱活化:采用100%甲醇1ml/min冲洗60min,再换成流动相进行平衡;如果流动相中含有缓冲盐,在换成流动相前,请使用过渡流动相过渡后再换流动相平衡;  二、日常维护  1、建议检测前样品和流动相进行过滤;  2、建议每天做完样品后及时进行清洗;  3、常规检测  测试完后,直接

分享色谱柱柱活化冲洗的技巧

  色谱柱使用pH范围在1.5~10.0,通常建议使用范围pH为2.0~8.0比较合适,流动相超出pH范围将会导致硅胶基质流失和键合相断裂使柱效下降,使用寿命变短,所以要严格控制pH范围。新的色谱柱活化:采用100%甲醇1ml/min冲洗60min,再换成流动相进行平衡;如果流动相中含有缓冲盐,在换

最全的液相色谱柱知识和选择技巧

众所周知,现代高效液相色谱分析中,色谱柱的选择直接影响了分离效果的好坏,选择合适的色谱柱可以缩短方法开发所需的时间,并且使方法更具稳定性。但是现在市场上色谱柱种类繁多,不同类型的色谱柱分离对象不同,因此,要做合适的选择,必须对此有一定的认识和了解。 色谱柱参数物理性质 柱长,内径,如250*4.6m

高效液相色谱柱的使用方法技巧

色谱柱的使用和维护:液相色谱仪由高压液压泵、检测器和液相色谱柱组成,其中正确安装和使用液相色谱柱是液相色谱工作的关键。这也是液相色谱工作者获得正确可靠的实验数据的必由之路。为什么要学习使用高效液相色谱柱?色谱柱的使用与维护:液相色谱仪由高压液泵、检测器和液相色谱柱组成。液相色谱柱的正确安装和使用是液

过柱子操作问题——装柱

柱子下面的活塞一定不要涂润滑剂,会被淋洗剂带到产品中的,可以采用四氟节门的。干法和湿法装柱觉得没什么区别,只要能把柱子装实就行。装完的柱子应该要适度的紧密(太密了淋洗剂走的太慢),一定要均匀(不然样品就会从一侧斜着下来)。书中写的都是不能见到气泡,我觉得在大多数情况下有些小气泡没太大的影响,一加压气

最全的液相色谱柱知识分享和选择技巧

现代高效液相色谱分析中,色谱柱的选择直接影响了分离效果的好坏,选择合适的色谱柱可以缩短方法开发所需的时间,并且使方法更具稳定性。但是现在市场上色谱柱种类繁多,不同类型的色谱柱分离对象不同,因此,要做合适的选择,必须对此有一定的认识和了解。色谱柱参数物理性质柱长,内径,如250*4.6mm。一般柱长在

最全的液相色谱柱知识分享和选择技巧

现代高效液相色谱分析中,色谱柱的选择直接影响了分离效果的好坏,选择合适的色谱柱可以缩短方法开发所需的时间,并且使方法更具稳定性。但是现在市场上色谱柱种类繁多,不同类型的色谱柱分离对象不同,因此,要做合适的选择,必须对此有一定的认识和了解。  色谱柱参数  物理性质  柱长,内径,如250*4.6mm

最新液相色谱柱知识分享和选择技巧

现代高效液相色谱分析中,色谱柱的选择直接影响了分离效果的好坏,选择合适的色谱柱可以缩短方法开发所需的时间,并且使方法更具稳定性。但是现在市场上色谱柱种类繁多,不同类型的色谱柱分离对象不同,因此,要做合适的选择,必须对此有一定的认识和了解。色谱柱参数 物理性质:柱长,内径,如250*4.6mm。一般

电泳做Western-Blot实验的方法技巧

电泳做western blot的时候,大家往往会摸索一抗、二抗的浓度,封闭时间,曝光时间等等,而每次变换其中的一个条件就需要从新跑胶、转膜,甚至重新提蛋白,这样会浪费大量的时间。其实完全没有必要这样。一次转膜后,将PVDF膜晾干,裁减成小块,保存起来,用的时候取出一块,没有任何影响。这对于摸索条

盘绕螺旋结构的设计和优化技巧实验

盘绕螺旋结构的设计和优化技巧             实验步骤 本节讨论盘绕螺旋特异性设计所涉及的几个不同方面。我们的目标是在核心处和