解析多肽分离实验
基本方案 实验方法原理 实验材料 多肽混合物 试剂、试剂盒 0.05 mol／L 和 0.25 mol／L 磷酸钠缓冲液(pH 2.30 存储于 4℃) 0.1 mol／L 氢氧化钠 仪器、耗材 75 μm 内径的融合硅毛细管柱 CE 仪器 实验步骤 ......阅读全文
解析多肽分离实验
实验方法原理 实验材料 多肽混合物试剂、试剂盒 0.05 mol／L 和 0.25 mol／L 磷酸钠缓冲液(pH 2.30 存储于 4℃)0.1 mol／L 氢氧化钠仪器、耗材 75 μm 内径的融合硅毛细管柱 CE 仪器实验步骤 1. 用以下溶液冲洗进行预处理毛细管：10 倍柱体积的 0.1 m
解析多肽分离实验
基本方案 实验方法原理 实验材料 多肽混合物
解析多肽分离实验
CE 分离来自复合体混合物如蛋白酶解产物的特定多肽尤其有用。以下的方案阐述使用低压样品注射的 P/ACE 5000 CE 仪器（Beckman） 的用法。但其他仪器也可以依据制造商的操作指南进行同样的分离。实验材料多肽混合物试剂、试剂盒0.05 mol／L 和 0.25 mol／L 磷酸钠缓冲液(p
蛋白质、多肽提取分离
1 分离方法 采取何种分离纯化方法要由所提取的组织材料、所要提取物质的性质决定。对蛋白质、多肽提取分离常用的方法包括：盐析法、超滤法、凝胶过滤法、等电点沉淀法、离子交换层析、亲和层析、吸附层析、逆流分溶、酶解法等。这些方法常常组合到一起对特定的物质进行分离纯化，同时上述这些方
蛋白质、多肽提取分离
1 分离方法 采取何种分离纯化方法要由所提取的组织材料、所要提取物质的性质决定。对蛋白质、多肽提取分离常用的方法包括：盐析法、超滤法、凝胶过滤法、等电点沉淀法、离子交换层析、亲和层析、吸附层析、逆流分溶、酶解法等。这些方法常常组合到一起对特定的物质进行分离纯化，同时上述这些方法也是蛋白、多肽类物
膜分离技术解析
膜分离是利用薄膜以分离水溶液中某些物质的方法的统称。废水处理中目前常用的方法有渗析法、电渗析法、反渗透法及超滤法等，其基本特性如表5-2。膜分离技术有以下共同特点：①分离过程不发生相变，因此能量转化效率高；②分离在常温下进行，特别适合于热敏性物料，如果汁、酶、药物等的分离、分级和浓缩；③适用范围广，
反相高效液相层析实验_多肽和蛋白质的分离
实验材料蛋白质试剂、试剂盒TFA乙腈盐酸胍仪器、耗材层析柱HPLC进样器实验步骤1. 用经脱气的HPLC级水洗去反相柱的有机溶剂，梯度从100%有机溶剂到100%水，流速1 ml/min，持续15 min 以上。 2. 以100%的TFA/乙腈缓冲液平衡柱子至柱压和光吸收值达到恒定。用10~15
多肽物质分离与分析方法研究（二）
1.2 亲和层析(Affinity Chromatography,AC) AC是利用连接在固定相基质上的配基与可以和其特异性产生作用的配体之间的特异亲合性而分离物质的层析方法。自1968年Cuatrecasas提出亲和层析概念以来，在寻找特异亲和作用物质上发现了许多组合，如抗原-抗体、酶-催化底物
多肽物质分离与分析方法研究（一）
摘 要 综述了近几年来多肽类物质的提取分离与分析方法，主要包括高效液相色谱法、电泳、质谱及核磁共振等方法在肽类物质研究中的最新应用进展。 多肽类化合物广泛存在于自然界中，其中对具有一定生物学活性的多肽的研究，一直是药物开发的一个主要方向。生物体内已知的活性多肽主要是从内分泌腺组织器官、分泌细
多肽的分离制备,－如何上量？如何增大分离度
反相HPLC应当是很好的分离小肽方法，用CH3CN或CH3OH：H2O（95：5）做流动相，看保留如何，若无保留，建议改用其他色谱方法进行分离。关于多肽的分离，首先要知道它的分子量大小，然后选择不同类型的填料，如孔径的大小。我们先在分析柱（4.6MM内径）上做一下实验,找到最大的分离度,这一过程的难
蛋白质与多肽提取分离方法1
1 分离方法采取何种分离纯化方法要由所提取的组织材料、所要提取物质的性质决定。对蛋白质、多肽提取分离常用的方法包括：盐析法、超滤法、凝胶过滤法、等电点沉淀法、离子交换层析、亲和层析、吸附层析、逆流分溶、酶解法等。这些方法常常组合到一起对特定的物质进行分离纯化，同时上述这些方法也是蛋白、多肽类物质分析
多肽物质分离与分析方法研究进展
摘 要 综述了近几年来多肽类物质的提取分离与分析方法，主要包括高效液相色法、电泳、质谱及核磁共振等方法在肽类物质研究中的最新应用进展。 多肽类化合物广泛存在于自然界中，其中对具有一定生物活性的多肽的研究，一直是药物开发的一个主要方向。生物体内已知的活性多肽主要是从内分泌腺组织器官、分泌细胞和体
蛋白质与多肽提取分离方法3
1．3．4胶束电动毛细管层析（Micellar Electrokinetic Electorphoresis Chromatography, MECC）MECC的原理是在电泳液中加入表面活性剂，如SDS，使一些中性分子带相同电荷分子得以分离。特别对一些小分子肽，阴离子、阳离子表面活性剂的应用都可使之
蛋白质与多肽提取分离方法2
1.1.7 灌注层析（Perfusion Chromatography，PC）PC是一种基于分子筛原理与高速流动的流动相的层析分离方法，固定相孔径大小及流动相速度直接影响分离效果。试验证明其在生产、制备过程中具有低投入、高产出的特性。目前市场上可供应的PC固定相种类较多，适合于不同分子量的多肽分离
现代生物分离技术在多肽蛋白质分离纯化中的应用
摘要：蛋白质是生物体的重要组成部分，在现代生物制药领域有着重要的作用，本文介绍了现代生物分离技术反胶束萃取、双水相萃取和电泳在多肽蛋白质分离中的应用和现状。关键词：蛋白质 反胶束萃取 双水相萃取 电泳一、前言随着基因工程和细胞工程的发展，尽管传统的分离方法(如溶剂萃取技术)已在抗生素等物质的生
专家共议驼血多肽分离制备关键技术
近日，由中科院兰州化物所和内蒙古东汇生物科技有限公司联合召开的“驼血资源高值化利用研讨会”在化物所召开。中科院兰州分院、兰州大学、甘肃省科学院自然能源研究所、内蒙古阿拉善盟科技局的相关领导和专家参加会议。 会议中，与会专家就“驼血多肽分离制备关键技术及产业化”系列问题进行了讨论。专家认为，该项
蛋白质的单向SDS凝胶电泳实验——用Tris缓冲液分离多肽
实验材料蛋白质试剂、试剂盒SDSTris·Cl仪器、耗材电泳仪离心机实验步骤1. 参照“Laemmli凝胶电泳法”步骤1~4，配制并灌制分离胶。2. 参照“Laemmli凝胶电泳法”步骤5~7，配制并灌制积层胶，但在移去分离胶顶层覆盖的异丁醇 时，以2×Tris·Cl/SDS，pH8.8而不用1
胰蛋白酶切磷酸化多肽作图_双向薄层电泳/层析分离多肽
实验材料多肽样品试剂、试剂盒电泳缓冲液仪器、耗材平板电泳仪实验步骤1. 将平板电泳仪（型号 FBE-3000, Phannacia) 放在通过循环仪连接到恒温水浴的冷却板上进行电泳。电泳前 30 分钟将水浴温度调至 10℃ 到 15℃ 之间。每个电极槽加 400 ml 缓冲液。切两张 Whatman
分离核仁实验——分离核仁
实验材料肝脏试剂、试剂盒NKM仪器、耗材粗孔滤纸Teflon-玻璃匀浆器实验步骤1. 制备溶液：NKM：0.13 mol/L NaCl，5 mmol/L KCl，8 mmol/L MgCl20.34 mol/L 蔗糖，3 mmol/L MgCl22.3 mol/L 蔗糖，10 mmol/L MgCl
生物亲和色谱仪分离模式解析
生物亲和色谱仪是利用蛋白质或生物大分子等样品与固定相上生物活性配位体之间的特异亲和力进行分离的。一、固定相：将具有生物活性的配位体以共价键结合到不溶性固体基质上制得。二、生物活性配位体：1、酶：底物及其类似物。2、辅酶：类固醇等。3、抗体：植物激素等。4、激素：糖和多糖等。5、抗生素：核苷酸等。三、
生物亲和色谱仪分离模式解析
生物亲和色谱仪是利用蛋白质或生物大分子等样品与固定相上生物活性配位体之间的特异亲和力进行分离的。一、固定相：将具有生物活性的配位体以共价键结合到不溶性固体基质上制得。二、生物活性配位体：1、酶：底物及其类似物。2、辅酶：类固醇等。3、抗体：植物激素等。4、激素：糖和多糖等。5、抗生素：核苷酸等。三、
色谱仪分析的分离度解析
色谱仪分析的分离度反应了组分在色谱仪色谱柱中的分离情况，同时体现了选择性和柱效能，即热力学因素和动力学因素，将实现分离的可能性与现实性结合了起来。一、影响分离度大小的因素：1、色谱过程的热力学因素：保留值之差（tR2－tR1）2、色谱过程的动力学因素：峰宽（W1+W2）二、分离度的计算公式：
色谱仪分析的分离度解析
色谱仪分析的分离度反应了组分在色谱仪色谱柱中的分离情况，同时体现了选择性和柱效能，即热力学因素和动力学因素，将实现分离的可能性与现实性结合了起来。一、影响分离度大小的因素：1、色谱过程的热力学因素：保留值之差（tR2－tR1）2、色谱过程的动力学因素：峰宽（W1+W2）二、分离度的计算公式：R =
分离核仁实验
分离核仁 从人肝脏或胎盘组织中分离核仁 HeLa细胞细胞核或核仁的制备 高镁法分离核仁 实验材料 肝脏
分离核仁实验
分离核仁从人肝脏或胎盘组织中分离核仁HeLa细胞细胞核或核仁的制备高镁法分离核仁实验材料肝脏 试剂、试剂盒NKM
线粒体分离实验
实验材料 细胞试剂、试剂盒 RSBMS 缓冲液仪器、耗材 Dounce 匀浆器实验步骤 1. 用 11 ml 冰上预冷过的 RSB 重新悬浮细胞，转移到一个 15 ml 的 Dounce 匀浆器中RSB（使组织培养细胞膨胀的低渗缓冲液）10 mmol/L NaCl2.5 mol/L MgCl210
线粒体分离实验
从组织培养细胞中分离线粒体 从组织中分离线粒体 用蔗糖密度梯度法纯化线粒体 实验材料 细胞
分离核仁实验
实验材料 肝脏试剂、试剂盒 NKM仪器、耗材 粗孔滤纸Teflon-玻璃匀浆器实验步骤 1. 制备溶液：NKM：0.13 mol/L NaCl，5 mmol/L KCl，8 mmol/L MgCl20.34 mol/L 蔗糖，3 mmol/L MgCl22.3 mol/L 蔗糖，10 mmol/L
RNA分离与分析实验_分离RNA
实验材料标记细胞试剂、试剂盒乙酸缓冲液仪器、耗材漩涡器实验步骤1. 收获标记细胞。2. 小心处置上清液，用含 0.3% SDS 的 10 mmol/L 乙酸缓冲液悬浮细胞沉淀，每 1 ml 压积细胞用 10 ml 缓冲液。3. 于室温用漩涡器振荡裂解细胞。4. 加等体积的水饱和酚，充分混匀，于 60
离子色谱仪的分离模式解析
离子色谱仪的分离模式有离子交换色谱、离子排斥色谱和离子对色谱等。一、离子交换色谱：离子交换色谱使用的是低交换容量的离子交换剂，交换剂的表面有离子交换基团。带负电荷的交换基团（如磺酸基和羧酸基）可用于阳离子的分离，带正电荷的交换基团（如季胺盐）可用于阴离子的分离。阴离子的分离过程：由于静电场相互作用，