PlasmidorCosmidDNAMiniprep

This protocol can be used to isolate sufficient amount DNA from 1.5ml o/n culture or 3ml 6hr culture to do several enzyme digestions.Spin 1.5ml o/n culture at 1,2000rpm for 30 Sec. Discard the supernatant.Resuspend the pellet by vertex in 100ul QP buffer, R.T. 5min.Mix 200ul 10N NaOH and 500ul 20% SDS add water to final volume 10ml.Add 200ul the solution above to the suspension (#2), invert 5 times, R.T. 5min.Add 150......阅读全文

核酸提取技术简史

核酸提取被用于许多分子生物化学试验和诊断,是克隆、转化、酶切、体外转录、扩增、测序等试验的第一个步骤。然而由于细胞内存在大量蛋白质、碳水化合物、原始样品中的代谢物以及其它污染物,提取高质量的核酸并非易事。现阶段的层析柱核酸提取方法有:(重要东西一般都放在前边的,所以先介绍最新的技术,我们精耐特基因的

质粒的生物学特性

(1)质粒是独立于染色体以外的能自主复制的裸露的双链环状(少数为线形和RNA) DNA分子。广泛从在于细菌细胞中,比病毒更简单。在霉菌、蓝藻、酵母和一些动植物细胞中也发现了质粒,目前对细菌的质粒研究得比较深入,特别是大肠杆菌的质粒。大肠杆菌的质粒主要有F质粒(F因子)、R质粒(抗药性因子)和Col质

Quick-and-reliable-method-to-analyze-meiotic-segregation-patterns

It is well known that multiple auxotrophic markers impede fruiting in Coprinus cinereus. Restriction fragment length polymorphisms have been used to a

DNA转化实验指导1

CONTENT Transformation-Competent E. coli preparation   Inoue "ultra-competent" methodRubidium chloride methodCosmid packaging protocol DNA Ligation an

小规模制备的定义

中文名称小规模制备英文名称minipreparation;miniprep定  义相对于大规模制备而言,指在实验室规模内进行小量分离提纯或制备特定物质的方式。应用学科生物化学与分子生物学(一级学科),方法与技术(二级学科)

原核细胞的细胞质与核质体的相关介绍

  细菌和其它原核生物一样,没有核膜,DNA集中在细胞质中的低电子密度区,称核区或核质体(nuclear body)。细菌一般具有1-4个核质体,多的可达20余个。核质体是环状的双链DNA分子,所含的遗传信息量可编码2000-3000种蛋白质,空间构建十分精简,没有内含子。由于没有核膜,因此DNA的

细菌的细胞质|核质体介绍

  细菌和其它原核生物一样,没有核膜,DNA集中在细胞质中的低电子密度区,称核区或核质体(nuclear body)。细菌一般具有1-4个核质体,多的可达20余个。核质体是环状的双链DNA分子,所含的遗传信息量可编码2000~3000种蛋白质,空间构建十分精简,没有内含子。由于没有核膜,因此DNA的

细菌的细胞质和核质体概述

  细菌和其它原核生物一样,没有核膜,DNA集中在细胞质中的低电子密度区,称核区或核质体(nuclear body)。细菌一般具有1-4个核质体,多的可达20余个。核质体是环状的双链DNA分子,所含的遗传信息量可编码2000~3000种蛋白质,空间构建十分精简,没有内含子。由于没有核膜,因此DNA的

细菌的细胞质|核质体介绍

  细菌和其它原核生物一样,没有核膜,DNA集中在细胞质中的低电子密度区,称核区或核质体(nuclear body)。细菌一般具有1-4个核质体,多的可达20余个。核质体是环状的双链DNA分子,所含的遗传信息量可编码2000~3000种蛋白质,空间构建十分精简,没有内含子。由于没有核膜,因此DNA的

细胞质与核质体

  细菌和其它原核生物一样,只有拟核,没有核膜,DNA集中在细胞质中的低电子密度区,称核区或核质体(nuclearbody)。细菌一般具有1-4个核质体,多的可达20余个。核质体是环状的双链DNA分子,所含的遗传信息量可编码2000~3000种蛋白质,空间构建十分精简,没有内含子。由于没有核膜,因此

细胞质与核质体

  细菌和其它原核生物一样,只有拟核,没有核膜,DNA集中在细胞质中的低电子密度区,称核区或核质体(nuclearbody)。细菌一般具有1-4个核质体,多的可达20余个。核质体是环状的双链DNA分子,所含的遗传信息量可编码2000~3000种蛋白质,空间构建十分精简,没有内含子。由于没有核膜,因此

A-simple,-rapid-procedure-for-the-isolation-of-DNA-for-PCR

The polymerase chain reaction (PCR) is a method for amplifying specific segments of DNA defined by the small primers used to start the reaction. Using

DNA提取方法DNA-提取后纯化:将-DNA-与色谱柱结合

离液盐对于裂解至关重要,而且对于将 DNA(或 RNA)与色谱柱结合也是如此。此外,为了增强和影响核酸与二氧化硅的结合,还添加了酒精。大多数情况下这是乙醇,但有时可能是异丙醇。乙醇百分比和体积有很大的影响。太多,你会带入大量降解的核酸和小物种,这会影响 A260 读数并降低你的一些产量。太少,可能难

Preparing-Overnight-Bacterial-Culture

Materials:Sterile LB medium (Luria-Bertani Medium) with or without antibiotic:water 500 mlbacto-tryptone 10 gbacto-yeast extracts 5 gsodium chloride 1

DEPHOSPHORYLATION-OF-LINEARIZED-DNA

DEPHOSPHORYLATION OF LINEARIZED DNAALKALINE PHOSPATASE(CIP) DIGESTIONDigestion of protruding 5'-ends1. Precipitate digested DNA and resuspend in a

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Agarose Gel Electroporesis of DNA Making the gel: 1.  Place casting platform with well former sideways in gel stand where you wish to  pour 

Phage-DNA

IntroductionThe phage lysate from the plate contains bacterial DNA and RNA, as well as phage DNA encased in the phage coat. The following procedure, d

DNA电泳

DNA电泳(主要内容如下)  Preparation of Agarose Gel and Electrophoresis  Extraction of DNA From Agarose Gel  Extraction of DNA from Acrylamide Gels  DNA Marker 

DNA转染

DNA转染·         Transfection of Mammalian Cells Using Lipofectamine (LTI)·         Guide to Eukaryotic Transfections with Cationic Lipid Reagents (PDF)

DNA测序

                自动测序法 双脱氧链末端终止法 非同位素银染 鸟枪法 Maxam-Gilbert化学修饰法             实验方法

DNA重组

目的:简单介绍了DNA重组技术的一些方法。包括重组质粒、PCR等。包括细胞结构、DNA,DNA如何改点等。

DNA测序

实验方法原理 ABI  PRISM 310型基因分析仪(即DNA测序仪),采用毛细管电泳技术取代传统的聚丙烯酰胺平板电泳,应用该公司ZL的四色荧光染料标记的ddNTP(标记终止物法),因此通过单引物PCR测序反应,生成的PCR产物则是相差1个碱基的3'末端为4种不同荧光染料的单链DN

DNA定量

Characterization of dnaLEVEL IMaterialsDNA sampleSSC bufferUV spectrophotometer 3 and quartz cuvettesProcedureDissolve a small quantity of your extrac

DNA-Laddering

I. Protocol1. Harvest cellsOptional: wash plate with 37°C PBS (gently, so as not to lose cells); check on microscope,after aspirate PBS or mediaPlace

DNA-Electrophoresis

What is Electrophoresis?Electrophoresis is a technique used in the laboratory that results in the separation of charged molecules. DNA is a negatively

DNA标记

DNA标记(主要内容如下)  DNA Labeling by Nick Translation  Random Primed Labeling  End-Labeling  Purification of Labeled DNA  Non-isotopic Labeling  OthersDNA L

蛋白质相互作用

Interaction Trap/Trap Two-Hybrid System·         Yeast Two-Hybrid System (Finley Lab)This is one of the most comprehensive and detailed guide to yeast

Retrovirus-Production

Material:Packaging Cells, e.g. Phoenix cells (an adenovirus Ad5-transformed human embryonic kidney cell line 293T, transfected with two MoMLV packagin

Modified-Yeast-Transformation

Inoculate cells from an overnight culture into 50 ml YEPD and incubate at 30°C with shaking. Typically, add 0.1 to 0.2 ml saturated culture in the eve

DNA指纹图谱分析[DNA-Fingerprinting-]

一. 实验目的1. 掌握DNA指纹图谱技术的概念、原理和基本操作过程2. 学习DNA的限制性酶切的基本技术3. 掌握琼脂糖凝胶电泳的基本操作技术,学习利用琼脂糖凝胶电泳测定DNA片段的长度,并能对实验结果进行分析。二. 实验原理1984年英国莱斯特大学的遗传学家Jefferys及其合作者首次将分离的