Cosmid提取技术

Day OneStart overnight cultures of Cosmid in fresh L-Broth + 25 ug/ml kanamycin. 4 x 250 ml each, inoculate each with metal loop from frozen glycerol stocks.Grow cultures for 12 hours(do not let go for more than 14 hrs.)Day TwoSpin down cultures in 250 ml bottles in Beckman JA-17 rotor at 6,000 rpm for 15 min.Pour off sups, freeze pellets at -20°C for 10 min.Resuspend in 10 ml GET solution + 1 mg/ml lysozyme each, tr......阅读全文

动物肝脏DNA的提取

一、目的:了解分离提取DNA的一般原理,掌握从动物肝脏中提取DNA的方法。二、原理:在浓氯化钠(1—2mol·L-1)溶液中,脱氧核糖核蛋白的溶解度很大,核糖核蛋白的溶解度很小。在稀氯化钠(0.14mol·L-1 )溶液中,脱氧核糖核蛋白的溶解度很小,核糖核蛋白的溶解度很大。因此,可利用不同

中药提取的现代方法

  近年应用于中药提取分离中的高新技术有:超临界流体萃取法、膜分离技术、超微粉碎技术、中药絮凝分离技术、半仿生提取法、超声提取法、旋流提取法、加压逆流提取法、酶法、大孔树脂吸附法、超滤法、分子蒸馏法等。  膜提取分离技术  膜分离技术是近几十年来发展起来的分离技术,其分离基本原理是利用化学成分分子量

香菇多糖的提取方法

香菇多糖属于极性大分子化合物,其特定的结构与免疫活性密切相关。一般认为:增加多糖溶解度有利于提高其生理活性;中等相对分子质量多糖的活性超过过高的或过低的相对分子质量多糖;可溶于热水的多糖被证实有抗肿瘤活性。目前香菇多糖的提取多采用热水及稀碱溶液,避免在强酸、碱溶液中进行,否则极易造成多糖中糖苷键断裂

核酸提取仪如何选择

  生物技术的发展日新月异,随着PCR技术和基因测序技术在各个领域的应用,包括医学方面疾病检测、农业方面转基因检测以及其他很多方面的应用等,高通量的样本核酸提取已经变得极为迫切,很多公司推出了全自动核酸提取的仪器,各种原理的都有,乱花渐欲迷人眼。如何选择一款合适的核酸自动提取仪,需要细细分析。  

DNA提取方法有哪些

DNA提取的几种方法(1).浓盐法利用RNP和DNP在电解溶液中溶解度不同,将二者分离,常用的方法是用1M 氯 纳提取化钠抽提,得到的DNP粘液与含有少量辛醇的 氯仿一起摇荡,使乳化,再离心除去蛋白质,此时蛋白质凝胶停留在水相及氯仿相中间,而DNA位于上层水相中,用2倍体积95%乙醇可将DNA 钠盐

单萜的-提取分离方法

环烯醚萜苷的提取,一般采用溶剂法,提取时常在植物材料中拌入碳酸钙或氢氧化钡以抑制酶的活性和中和植物酸,常用水、甲醇、乙醇、稀丙酮溶液、正丁醇、乙酸乙酯等作为提取溶剂。可采用冷渗液法和热回流提取法。在同一植物中,往往含有多种结构相似的环烯醚萜苷,欲进一步分离单一成分,可采用硅胶、氧化铝等制备性薄层或柱

马铃薯淀粉提取筛-保养

淀粉离心筛设计特点简介:1. 淀粉离心筛主体接触材料部分部选用不锈钢制作,有效提高物料的质量。2. 设备表面采用不同的处理工艺,美观大方,耐油耐脏。3. 淀粉离心筛的筛篮动平衡精度等级G6.3,确保了设备的稳定运行。4. 整体处理量大,动力配置合理,淀粉筛分效率高,设备易于安装。5. 配备自动控制(

核酸提取与纯化介绍

  核酸提取是分子生物学的基本组成部分,因高质量的核酸是分子生物学上的应用至关重要。  我们将会总结一些现用核酸提取技术和针对样品类型选择正确提取方法的小建议;也会提及评估核酸浓度和质量,以及核酸提取过程中的常见问题。  a. 为什么需要核酸提取?  核酸提取为大量广泛研究和应用提供了答案(例如:克

索氏提取器原理

索氏提取器就是利用溶剂回流及虹吸原理,使固体物质连续不断地被纯溶剂萃取,既节约溶剂,萃取效率又高。利用溶剂回流及虹吸原理,使固体物质连续不断地被纯溶剂萃取,既节约溶剂萃取效率又高。萃取前先将固体物质研碎,以增加固液接触的面积。然后将固体物质放在滤纸套内,置于提取器中,提取器的下端勺盛有溶剂的圆底烧瓶

脂肪细胞RNA提取原理

氯仿是分子量比较大的有机溶剂,在提取RNA时,氯仿可以有效的使有机相和无机相迅速分离。DNA提取过程 有机相中主要是酚和蛋白结合,从而使得蛋白和DNA脱离,DNA进入水相。但是在RNA的提取过程就要避免蛋白和DNA脱离,否则DNA会释放到水相。不管有酚也好,没有酚也好,氯仿本身也对蛋白有变性作用,剧

组织总蛋白提取原理

关键词:脑组织 目的:熟练进行脑组织蛋白质的提取 背景知识:无 原理:无 具体内容: 脑组织总蛋白质提取方法 1.将低温保存的样本称重。 2.加入裂解液。样本与组织比例=1:3~3.5 w/v,一般为150~170mg:500μl。加入50×Cocktail蛋白酶抑制剂。可利用振荡器、加样器,将组织

线粒体的提取与观察

线粒体是细胞中重要的细胞器,存在于绝大多数生活细胞中,它的主要功能是提供细胞内各种物质代谢所需要的能量。正由于这样,对线粒体膜,呼吸链酶及线粒体DNA等成分的结构,功能以及物理化学性质的研究已经成为细胞生物学研究中的重要课题,所以提取线粒体的技术已经成为线粒体研究中必不可少的手段,线粒体大量存在于代

胶原蛋白的提取方法

胶原蛋白的提取一般有三种方法:一是高压辅助的物理方法;二是用溶剂预处理结合低温或热水抽提的化学方法,根据溶剂的不同,可分为热水浸提法、酸法、碱法、盐法;三是用酶的生物化学法。一般来说,高压辅助和热水抽提针对明胶的提取,而低温抽提和酶法针对胶原的提取,但其基本原理都是根据胶原蛋白的特性改变蛋白质所在的

组织RNA提取方法介绍

1. 最好新鲜组织,这样RNA提取的效果比较好,这是肯定的。2. 如果不是新鲜的(最好在半年之内,-80℃或者液氮中冻存的)组织,注意不要反复冻融,从冰冻状态拿到0~4℃,注意不要拿到常温,待组织解冻后,用DEPC泡过的剪刀剪一小块组织,称重后,放到预冷的匀浆器中,然后加入一定量的TRIZOL试剂,

生物样本细胞的提取

1.细胞的破碎当待测组分(主要是各种多肽激素、各种酶以及各种基因工程的产物如胰岛素、生长激素等)存在于生物体细胞内及多细胞生物组织中时,需在分析测定之前将细胞和组织破碎,使这些待测组分充分释放到溶液中去,不同的生物体或同一生物体的不同组织,其细胞破碎的难易程度不一样,使用的方法也不完全相同。如动物胰

核酸提取的主要步骤

提取纯化核酸总的来说分为四大步骤:样品的前处理、细胞破碎、除去与核酸结合的蛋 白质及多糖脂等杂质、核酸的沉淀浓缩,除去其他杂质核酸,获得均一的样品。1.样品准备新鲜的动植物组织材料,经清洗去掉非组织材料杂质。少量样品可用液氮冻结,然后快速碾磨成粉末状。动物细胞培养物有的需用胰酶消化,再离心沉淀,必要

简述提取核酸的步骤

一、DNA的分离利用核蛋白溶于水和高盐溶液,但不溶于生理盐溶液的性质进行分离。流程:破细胞→浓盐溶液提取→生理盐溶液沉淀→苯酚变性除蛋白→水相DNA用冷乙醇沉淀。

酪蛋白(Casein)的提取

一、实验目的1、掌握一种提取蛋白的方法。2、掌握一种检测牛乳质量的方法。二、 实验原理酪蛋白是乳蛋白质中最丰富的一类蛋白质,约占乳蛋白的80~82%,酪蛋白不是单一的蛋白质,是一类含磷的复合蛋白质混合物,以一磷酸酯键与苏氨酸及丝氨酸的羟基相结合。它还含有胱氨酸和蛋氨酸这两种含硫氨基酸,但不含半胱氨酸

索氏提取法原理

原理编辑利用溶剂回流和虹吸原理,使固体物质每一次都能为纯的溶剂所萃取,所以萃取效率较高。萃取前应先将固体物质研磨细,以增加液体浸溶的面积。然后将固体物质放在滤纸套内,放置于萃取室中。如图安装仪器。当溶剂加热沸腾后,蒸汽通过导气管上升,被冷凝为液体滴入提取器中。当液面超过虹吸管最高处时,即发生虹吸现象

微波提取的优缺点

选择性高、操作时间短、溶剂消耗量少,但设备泄漏的微波辐射会给人体造成慢性损伤。(微波法和超声波法提取目前仅限于少量提取实验,还不具备工业化大生产)

SDS法提取小麦DNA

在提取DNA的过程中SDS的主要作用裂解细胞以及是蛋白质与核酸分离。在提取核酸的过程中,经常会用到高温(一般65-70摄氏度)加SDS一起裂解细胞,这样会让核酸释放的更快,更彻底;高温也是裂解细胞的一种方法。但加热本身对SDS没有任何辅助作用。但在低温条件下SDS的溶解度没有那么高,所以会有一定的沉

糖类的提取与澄清

一.提取常用溶剂有:水和乙醇,在提取糖类时,先将样品磨碎浸泡成溶液,若有脂肪的样品用石油醚提取,撤去其中的脂肪和叶绿素。1.      水作提取剂用水作提取剂,温度控制在45-50℃,利用水作提取剂时,还有pro、氨基酸、多糖、色素干扰,影响过滤时间,所以用水作提取剂应注意三个的注意:1)温度过高:

微波提取的优缺点

选择性高、操作时间短、溶剂消耗量少,但设备泄漏的微波辐射会给人体造成慢性损伤。(微波法和超声波法提取目前仅限于少量提取实验,还不具备工业化大生产)

Omega真菌RNA提取流程

实验概要Omega真菌RNA提取试剂盒中文说明书(E.Z.N.A. Fungal RNA Kit)。主要试剂1. 取适量RB裂解液,按1ml裂解液加入20ul 2-疏基乙醇。该混合液可于室温放置一周。2. 用DEPC水配置一小瓶70%乙醇。3. 按下表用无水乙醇稀释RNA Wash Buffer I

提取酪蛋白的方法

从米糠中提取酪蛋白的基本原理酪蛋白是一种两性电解质,但是具有明显的酸性。因为酪蛋白分子中合有的酸性氨基酸远较碱性氨基酸多,所以在化学上常把酪蛋白看作是一种酸性物质。在米糠中,酪蛋白是与一部分礴酸钙结合而成的,酪蛋白酸钙一磷酸钙的结合物胶位。酪蛋白胶粒对PH值的变化是很敏感的。当在其溶渡中加酸调节PH

自动核酸提取仪简介

作为体外检测的一大巨头,美国贝克曼库尔特有限公司当然不会放过开发核酸提取装备。该公司针对不同的工作量,提供了两种可供选择的提取仪器:SPRI-TE作为小型化的自动提取,提供高质量,高效率,可重复的磁珠核酸提取,专门为小实验室设计。Vidiera NsP则更倾向于血站,CDC,大型医院实验室等大客户。

mRNA提取注意事项

1.RNA的提取RNA的提取其实原理很简单:通过变性剂破碎细胞或者组织,然后经过氯仿等有机溶剂抽提RNA,再经过沉淀,洗涤,晾干,最后溶解。但是由于RNA酶无处不在,随时可能将RNA降解,所以实验中有很多地方需要注意,稍有疏忽就会前功尽弃。1.1 分离高质量RNA成功的cDNA合成来自高质量的RNA

全血RNA快速提取

操作步骤:(实验前请先阅读注意事项)提示: 第一次使用前请先在漂洗液RW瓶和70%乙醇瓶中加入指定量无水乙醇! 使用前将10X红细胞裂解液RLB用DEPC处理水稀释到1X。 操作前在裂解液RLT中加入β-巯基乙醇至终浓度1%,如1 ml RLT 中加入10μl β-巯基乙醇。此裂解液最好现用现

几种常见的提取方法

在化学分析中,一般分析仪器的要求都是溶液状态,所以把固体和半固体中待测物质提取到溶液中是几乎所有方法都要遇到的过程。其实在我们日常生活中,也无时无刻都在发生着提取的过程,比如泡茶、煮鸡汤就是一个提取的过程。今天的科普讲座就与大家聊聊常见的几种提取方法。索氏提取法 索氏提取法是一种经典萃取方法,在

马铃薯淀粉提取筛保养

淀粉离心筛设计特点简介:1. 淀粉离心筛主体接触材料部分部选用不锈钢制作,有效提高物料的质量。2. 设备表面采用不同的处理工艺,美观大方,耐油耐脏。3. 淀粉离心筛的筛篮动平衡精度等级G6.3,确保了设备的稳定运行。4. 整体处理量大,动力配置合理,淀粉筛分效率高,设备易于安装。5. 配备自动控制(