Omega真菌RNA提取流程
实验概要Omega真菌RNA提取试剂盒中文说明书(E.Z.N.A. Fungal RNA Kit)。主要试剂1. 取适量RB裂解液,按1ml裂解液加入20ul 2-疏基乙醇。该混合液可于室温放置一周。2. 用DEPC水配置一小瓶70%乙醇。3. 按下表用无水乙醇稀释RNA Wash Buffer II,并于室温保存。 R6840-00: 加入8ml无水乙醇 R6840-01: 加入48ml无水乙醇 R6840-02: 每瓶加入48ml无水乙醇实验步骤1. 称取50-100mg经液氮研磨成粉末状的真菌样品至1. 5ml离心管,立即加入500ul RB/2-Me, 剧烈涡旋。2. 室温14,000×g离心5min,小心转移上清至匀浆柱中。14,000×g离心2min。3. 转移收集管中的上清(注意不要吸到沉淀)至新离心管,加入......阅读全文
Omega真菌RNA提取流程
实验概要Omega真菌RNA提取试剂盒中文说明书(E.Z.N.A. Fungal RNA Kit)。主要试剂1. 取适量RB裂解液,按1ml裂解液加入20ul 2-疏基乙醇。该混合液可于室温放置一周。2. 用DEPC水配置一小瓶70%乙醇。3. 按下表用无水乙醇稀释RNA Wash Buffer I
Omega质粒小量提取流程
实验试剂1. 使用前,将RNase A全部加入Solution I中并于4度保存。2. 按下表用无水乙醇稀释DNA Wash Buffer,并于室温保存。 D6948-00B: 加入8ml无水乙醇 D6948-01B: 加入80ml无水乙醇 D6848-02B: 加入80ml无水乙
Omega质粒小量提取流程
实验概要Omega质粒小量提取试剂盒中文说明书(E.Z.N.A. EndoFree Plasmid Mini Kit I)。主要试剂1. 使用前,将RNase A全部加入Solution I中并于4度保存。2. 按下表用无水乙醇稀释DNA Wash Buffer,并于室温保存。 D6948-0
Omega质粒小量提取流程
实验试剂1. 使用前,将RNase A全部加入Solution I中并于4度保存。2. 按下表用无水乙醇稀释DNA Wash Buffer,并于室温保存。 D6948-00B: 加入8ml无水乙醇 D6948-01B: 加入80ml无水乙醇 D6848-02B: 加入80ml无水乙
Omega质粒大量提取流程
实验概要Omega质粒大量提取试剂盒中文说明书(E.Z.N.A. EndoFree Plasmid Maxi Kit I)。主要试剂1. 使用前,将RNase A全部加入Solution I中并于4度保存。2. 按下表用无水乙醇稀释DNA Wash Buffer,并于室温保存。 D6926-0
Omega质粒DNA中量提取流程
实验概要Omega质粒DNA中量提取试剂盒说明书(E.Z.N.A. EndoFree Plasmid Midi Kit)。主要试剂1. 使用前,将RNase A全部加入Solution I中并于4度保存。2. 按下表用无水乙醇稀释DNA Wash Buffer,并于室温保存。 D6915-01
Omega质粒DNA中量提取流程
实验概要Omega质粒DNA中量提取试剂盒中文说明书(E.Z.N.A. EndoFree Plasmid Midi Kit I)。主要试剂1. 使用前,将RNase A全部加入Solution I中并于4度保存。2. 按下表用无水乙醇稀释DNA Wash Buffer,并于室温保存。 D691
真菌RNA提取实验
实验方法原理 液氮研磨可裂解细胞,促使核蛋白体的解离,使RNA与蛋白质分离,并将RNA释放到溶液中。当加入氯仿时,它可抽提酸性的苯酚,而酸性苯酚可促使RNA进入水相,离心后可形成水相层和有机层,这样RNA与仍留在有机相中的蛋白质和DNA分离开。 实验材料 菌丝体试剂、试剂盒 NaCl蒸馏水SDSTr
真菌RNA提取实验
真菌RNA的提取可以:(1)用于真菌RNA干扰机制研究;(2)用于cDNA文库构建等研究;(3)用于真菌分子生物学相应研究。实验方法原理液氮研磨可裂解细胞,促使核蛋白体的解离,使RNA与蛋白质分离,并将RNA释放到溶液中。当加入氯仿时,它可抽提酸性的苯酚,而酸性苯酚可促使RNA进入水相,离心后可形成
真菌RNA提取实验
液氮研磨法 实验方法原理 液氮研磨可裂解细胞,促使核蛋白体的解离,使RNA与蛋白质分离,并将RNA释放到溶液中。当加入氯仿时,它可抽提酸性的苯酚,而酸性苯酚
真菌DNA和RNA提取方法
真菌DNA和RNA提取方法一、真菌DNA的提取(方法一)实验试剂(1)DNA提取液:0.2M Tris-HCl(pH 7.5),0.5M NaCl,0.01M EDTA,1%SDS(2)3M NaAc(3)TE:10 mmol/L Tris-HCl pH8.0,1 mmol/L EDTA(4)酚(p
RNA提取实验方法流程
1、实验目的提取人体细胞的总RNA和mRNA。 2、本实验所需试剂 1)、 CNE-2细胞及培养细胞的一系列条件, 2)、PBS缓冲液, TRIZOL试剂, 3)、DEPC处理过的水、大、中、小Tip及1.5 ml EP管, 4)、新的氯仿、异丙醇和乙醇, 5)、mRNA分离
RNA提取实验方法流程
总RNA(total RNA)和信使RNA(mRNA)的抽提(自己的总结)1、实验目的提取人体细胞的总RNA和mRNA。 2、本实验所需试剂1)、CNE-2细胞及培养细胞的一系列条件,2)、PBS缓冲液, TRIZOL试剂,3)、DEPC处理过的水、大、中、小Tip及1.5 ml EP管,4)、新的
Omega胶回收流程
实验概要Omega胶回收试剂盒中文说明书(E.Z.N.A. Gel Extraction Kit)。主要试剂1. 调节水浴的温度为55-65°C。2. 按下表用无水乙醇稀释SPW Wash Buffer,并于室温保存。 D2500-00,D2501-00: 加入20ml无水乙醇 D250
真菌的DNA和RNA提取方法
一、真菌DNA的提取(方法一)1.实验试剂(1)DNA提取液:0.2M Tris-HCl(pH 7.5),0.5M NaCl,0.01M EDTA,1%SDS(2)3M NaAc(3)TE:10 mmol/L Tris-HCl pH8.0,1 mmol/L EDTA(4)酚(pH8.0):氯仿:异戊
真菌的DNA和RNA提取方法
一、真菌DNA的提取(方法一)1.实验试剂(1)DNA提取液:0.2M Tris-HCl(pH 7.5),0.5M NaCl,0.01M EDTA,1%SDS(2)3M NaAc(3)TE:10 mmol/L Tris-HCl pH8.0,1 mmol/L EDTA(4)酚(pH8.0):氯仿:异戊
真菌的DNA和RNA提取方法
搞真菌基因功能研究的不可避免的总要涉及到DNA和RNA提取,由于真菌中有较多的多糖成分影响到所提DNA和RNA的质量和后续的分析。因此一个高质量的、实惠的提取方法是我们的优先选择,在此分享一下我一直在用的提取方法,供大家参考。真菌DNA的提取(方法一)1.取真菌菌丝0.5g, 在液氮中迅速研磨成粉2
真菌的DNA和RNA提取方法
搞真菌基因功能研究的不可避免的总要涉及到DNA和RNA提取,由于真菌中有较多的多糖成分影响到所提DNA和RNA的质量和后续的分析。因此一个高质量的、实惠的提取方法是我们的优先选择,在此分享一下我一直在用的提取方法,供大家参考。真菌DNA的提取(方法一)1.取真菌菌丝0.5g, 在液氮中迅速研磨成粉2
真菌菌丝的总RNA的提取
试剂:RNA提取缓冲液(CTAB):2% CTAB(W/V),2% 聚乙烯吡咯烷酮PVP(W/V),100 mM Tris-HCl(pH8.0,DEPC处理的水配置),25mM EDTA, 0.5g/L 亚精胺Spermidine,2.0M NaCl,2%巯基乙醇(V/V,使用前加入)。由于在高温灭
真菌菌丝的总RNA的提取方法
1.实验试剂 (1)RNA提取缓冲液(CTAB):2% CTAB(W/V),2% 聚乙烯吡咯烷酮PVP(W/V),100mM Tris-HCl(pH8.0,DEPC处理的水配置),25mM EDTA,0.5g/L 亚精胺Spermidine,2.0M NaCl,2%巯基乙醇(V/V,使用前加入
cDNA文库组标准流程一:Total-RNA的提取
1.试剂配制准备工作:1、研钵、5ml/10ml/ 25ml移液管、100ml/250ml量筒、250ml/100ml容量瓶、药匙、 试剂瓶等玻璃制品均用锡纸包裹口部,置于烤箱内,180℃,烤6小时。2、50ml/1.5ml离心管、枪头等塑料制品用0.1‰DEPC水浸泡过夜后,121℃ 20mins
真菌菌丝的总RNA的提取的操作方法
试剂:RNA提取缓冲液(CTAB):2% CTAB(W/V),2% 聚乙烯吡咯烷酮PVP(W/V),100 mM Tris-HCl(pH8.0,DEPC处理的水配置),25mM EDTA, 0.5g/L 亚精胺Spermidine,2.0M NaCl,2%巯基乙醇(V/V,使用前加入)。由于
RNA提取心得(组织RNA提取和培养细胞的RNA提取)
一.组织RNA提取 1.最好新鲜组织,这样RNA提取的效果比较好,这是肯定的。 2. 如果不是新鲜的(最好在半年之内,-80℃或者液氮中冻存的)组织,注意不要反复冻融,从冰冻状态拿到0-4℃,注意不要拿到常温,待组织解冻后,用 DEPC泡过的剪刀剪一小块组织,称重后,放到预冷的匀浆器中,然后
RNA提取
RNA提取(主要内容如下)Tips for Handing RNA Total RNA IsolationmRNA IsolationrRNA IsolationOthersQ & A posted in the Method Forum Basic Procedures for Handing
真菌DNA的提取
1.实验试剂 (1)DNA提取液:0.2M Tris-HCl(pH 7.5),0.5M NaCl,0.01M EDTA,1%SDS (2)3M NaAc (3)TE:10 mmol/L Tris-HCl pH8.0,1 mmol/L EDTA (4)酚(pH8.0):氯仿:异戊醇(25:
总RNA提取(Trizol提取)
在收集到生物材料之后,最好能即刻进行RNA 制备工作。若需暂时储存,则应以液氮将生物材料急速冷冻后,储存于-80℃冷冻柜。在制备RNA 时,将储存于冷冻柜的材料取出,立即以加入液氮研磨的方式打破细胞,不可以先行解冻,以避免RNase 的作用。1. 提取组织RNA 时,每50~100mg 组织用1ml
RNA的提取
【实验原理】Trizol 试剂是直接从细胞或组织中提取总RNA 的试剂。它在破碎和溶解细胞时能保持RNA 的完整性。加入氯仿后离心,样品分成水样层和有机层。RNA存在于水样层中。收集上面的的水样层后,RNA 可以通过异丙醇沉淀获得。【实验仪器】1. 匀浆机2. 低温离心机3. 涡旋器【试剂及配制】1
RNA提取原理
RNA抽取一般使用Trizol法抽提:Trizol是一种总RNA抽提试剂,内含异硫氰酸胍等物质,能迅速裂解细胞,抑制细胞释放出的核酸酶活性。目前常用Trizol法进行提取组织或细胞中的RNA。Trizol作用原理:在匀质化或溶解样品中,Trizol试剂可保持RNA的完整性,同时能破坏细胞及溶解细胞成
RNA提取原理
RNA抽取一般使用Trizol法抽提:Trizol是一种总RNA抽提试剂,内含异硫氰酸胍等物质,能迅速裂解细胞,抑制细胞释放出的核酸酶活性。目前常用Trizol法进行提取组织或细胞中的RNA。Trizol作用原理:在匀质化或溶解样品中,Trizol试剂可保持RNA的完整性,同时能破坏细胞及溶解细胞成
RNA的提取
一、准备试剂:氯仿,异丙醇,75℅乙醇,无RNase的水或0.5℅SDS(溶液均需用DEPC处理过的水配制)。二、操作步骤:1. 匀浆处理:a. 组织 将组织在液氮中磨碎,每50-100mg组织加入1ml TRIzol,用匀浆仪进行匀浆处理。样品体积不应超过TRIzol体积10℅。b. 单层培养细胞