动物肝脏DNA的提取

一、目的:了解分离提取DNA的一般原理,掌握从动物肝脏中提取DNA的方法。二、原理:在浓氯化钠(1—2mol·L-1)溶液中,脱氧核糖核蛋白的溶解度很大,核糖核蛋白的溶解度很小。在稀氯化钠(0.14mol·L-1 )溶液中,脱氧核糖核蛋白的溶解度很小,核糖核蛋白的溶解度很大。因此,可利用不同浓度的氯化钠溶液,将脱氧核糖核蛋白和核糖核蛋白从样品中分别抽提出来。将抽提得到的核蛋白用SDS(十二烷基磺酸钠)处理,DNA(或RNA)即与蛋白质分开,可用氯仿一异戊醇将蛋白质沉淀除去,而DNA则溶解于溶液中。向溶液中加入适量乙醇,DNA即析出。为了防止DNA(或RNA)酶解,提取时加EDTA(ethy-lenediamine tetracetic acid,乙二胺四乙酸)。三、器材及试剂:1.器材:①新鲜猪肝(一次用不完一定要冷冻保存)②匀浆器③离心机5000r·min-1④量筒50ml(×1)、10ml(×1)⑤水浴锅⑥纱布⑦真空......阅读全文

DNA提取仪

DNA提取仪也叫核酸纯化仪,是应用配套的核酸提取试剂来自动完成样本核酸的提取工作的仪器。

DNA怎么提取

DNA提取的几种方法(1).浓盐法利用RNP和DNP在电解溶液中溶解度不同,将二者分离,常用的方法是用1M 氯 纳提取化钠抽提,得到的DNP粘液与含有少量辛醇的 氯仿一起摇荡,使乳化,再离心除去蛋白质,此时蛋白质凝胶停留在水相及氯仿相中间,而DNA位于上层水相中,用2倍体积95%乙醇可将DNA 钠盐

DNA提取原则

1.保证核酸一级结构的完整性;2.核酸样品中不应存在对酶有抑制作用的有机溶剂和过高浓度的金属离子;3.其他生物大分子如蛋白质、多糖和脂类分子的污染应降低到最低程度;4.其他核酸分子,如RNA,也应尽量去除。

植物DNA提取中怎样检测提取到DNA质量

第一种方法是测量260/280的比例,判断是否有蛋白质的污染。在260nm和280nm处测定DNA溶液的光吸收,A260与A280之比应在1.75-1.80之间。低于此值表明制备物中残留蛋白质成分较高或含有酚,高于此值表明有RNA的残留。第二种方法是凝胶电泳分析,看有无断裂降解。影响DNA提取质量的

核酸提取——RNA提取与DNA的提取

核酸分为两大类:一类为核糖核酸(RNA),另一类为脱氧核糖核酸(DNA)。核酸的分子量极大,从数万到亿万。核酸是两性化合物,在一定的等电点溶于水,其水溶液呈酸性,不溶于乙醇等有机溶剂。细胞内的核酸常和蛋白质结合成核蛋白。核糖核蛋白和脱氧核糖核蛋白在不同浓度的电解质溶液中 的溶解度有显著区别,在一定浓

核酸提取——RNA提取与DNA的提取

核酸分为两大类:一类为核糖核酸(RNA),另一类为脱氧核糖核酸(DNA)。核酸的分子量极大,从数万到亿万。核酸是两性化合物,在一定的等电点溶于水,其水溶液呈酸性,不溶于乙醇等有机溶剂。细胞内的核酸常和蛋白质结合成核蛋白。核糖核蛋白和脱氧核糖核蛋白在不同浓度的电解质溶液中 的溶解度有显著区别,在一定浓

DNA提取方法DNA-提取后纯化:将-DNA-与色谱柱结合

离液盐对于裂解至关重要,而且对于将 DNA(或 RNA)与色谱柱结合也是如此。此外,为了增强和影响核酸与二氧化硅的结合,还添加了酒精。大多数情况下这是乙醇,但有时可能是异丙醇。乙醇百分比和体积有很大的影响。太多,你会带入大量降解的核酸和小物种,这会影响 A260 读数并降低你的一些产量。太少,可能难

种子DNA提取仪对云南紫苏的种子DNA提取

云南各地收集到20份紫苏品种并进行了多年的栽培和经济性状评估,发现在紫苏种内存在 着丰富的遗传变异,并且已用形态聚类分析的方法对云南境内紫苏的种下变异进行了探讨,将其分为5个变种。由于形态特征是基因型和环境相互作用的产物,紫苏 的形态聚类分析结果仅从表现型上间接地反映出了云南境内紫苏的遗传多样性。试

种子DNA提取仪是种子DNA提取的好方法

    随着社会和科技的发展,在种子研究等领域,快速而经济的从种子样品中提取高产量、高纯度的基因组DNA已经成为植物分子生物学研究的首要问题,过去传统的种子DNA提取方法非常复杂,需要用到大量的试剂,容器等,提取所需要花费的时间也非常长,因此是明显不符合现代科学研究的发展需要的,而种子DNA提取

DNA提取仪特点

大屏幕全中文操作 大屏幕全中文显示;触屏式操作,简单易用。 精确控制 内建工程用电脑,无需再连接个人电脑;单机操作节省更多的空间与能源,并提供高稳定度的自动化控制系统。 温度控制 可根据需求自定义裂解、洗脱温度。 自由编程 强大的程序编辑功能;灵活、高效地定义您的应用,可满足不同试剂要求。

DNA的提取实验

掌握核酸提取与纯化的方法,离心技术的合理使用.酚为有效的蛋白质变性剂,并且饱和的酚与水相有效的分开.因此,在含核酸的样品加入酚,可将样品中的蛋白质变性后形成沉淀层,本实验来源于牡丹江医学院 本科 5 年制检验专业实验指导实验方法原理酚为有效的蛋白质变性剂,并且饱和的酚与水相有效的分开.因此,在含核酸

DNA的提取实验

            实验方法原理 酚为有效的蛋白质变性剂,并且饱和的酚与水相有效的分开.因此,在含核酸的样品加入酚,可将样品中的蛋白质变性后形成沉淀层,位于水相与有机相的界画,从而达到纯化核酸的目的.但酚不能完全抑制RNA酶的活性,而且酚层中含有10-15%的水

血液DNA的提取

Part A: Purifying nuclear pellets.1) Add 50-60μl fresh, packed red blood cells (RBC) to 700μl PBS. Mix by inversion.2) Add 700-800μl Lysis buffer. Clo

λ噬菌体DNA提取

   λ噬菌体是最早使用的克隆载体,λ噬菌体的基因组是一长度约为50kb的双链DNA分子,它在宿主细胞有两种生活途径,其一是裂解生长,环状DNA分子在细胞内多次复制,合成大量噬菌体基因产物,装配成噬菌体颗粒,裂解宿主菌再进行下一次感染;其二是溶源性生长,即感染细胞内λ噬菌体DNA整合到宿主菌染色体D

动物DNA提取实验

标签:                                    动物肝脏                                    DNA                                    提取动物肝脏DNA提取可以:(1)用于法医学鉴定;(2)

植物DNA提取实验

机械法             实验方法原理 这是一种快速简便提取植物总DNA的方法。先将新鲜的叶片在液氮中研磨,以机械力破碎细胞壁,然后加入十六烷三甲基溴化铵分离缓冲液,使细胞膜破

真菌DNA的提取

  1.实验试剂  (1)DNA提取液:0.2M Tris-HCl(pH 7.5),0.5M NaCl,0.01M EDTA,1%SDS  (2)3M NaAc  (3)TE:10 mmol/L Tris-HCl pH8.0,1 mmol/L EDTA  (4)酚(pH8.0):氯仿:异戊醇(25:

质粒DNA提取实验

            实验方法原理 碱裂解法是基于DNA的变性与复性差异而达到分离目的的。碱性使质粒DNA变性,再将pH值调至中性使其复性,复性的为质粒DNA,而染色体DNA不会复性,缠结成网状物质,通过离心除去。

质粒DNA提取实验

碱解法SDS碱裂解法(试剂盒提取)实验方法原理碱裂解法是基于DNA的变性与复性差异而达到分离目的的。碱性使质粒DNA变性,再将pH值调至中性使其复性,复性的为质粒DNA,而染色体DNA不会复性,缠结成网状物质,通过离心除去。实验材料大肠杆菌                              

质粒DNA提取实验

实验方法原理 质粒多为一些双链、环状的DNA分子,是独立于细菌染色体之外进行复制和遗传的辅助性遗传单位。质粒是进行分子生物学实验操作,进行遗传工程改良物种等工作时最主要的DNA载体。 提取质粒的基本步骤分为三步:①细菌的培养和质粒的扩增②细菌菌体的裂解③质粒DNA的纯化实验材料 大肠杆菌试剂、试剂盒

DNA的提取实验

实验方法原理 酚为有效的蛋白质变性剂,并且饱和的酚与水相有效的分开.因此,在含核酸的样品加入酚,可将样品中的蛋白质变性后形成沉淀层,位于水相与有机相的界画,从而达到纯化核酸的目的.但酚不能完全抑制RNA酶的活性,而且酚层中含有10-15%的水,从而溶解一部分poly-(A)RNA。将酚与氯仿联合使用

质粒DNA提取技术

实验概要通过本实验,学习和掌握碱裂解法提取质粒的方法和技术。实验原理质粒是基因工程中常用的载体之一。质粒是染色体外小型双链环状的DNA,大小在1~200kb之间。碱裂解法提取质粒是根据共价闭合环状DNA与线性染色体DNA在拓扑学上的差异来分离它们的。在pH值介于12.0~12.5这个狭窄的范围内,线

植物DNA提取实验

实验方法原理 真核细胞基因组在提取过程中一般有以下几步,首先是机械法破细胞抽提;然后去除蛋白质,糖类等细胞内杂质污染;最后纯化出DNA。实验材料 幼嫩的植物材料试剂、试剂盒 液氮CTAB抽提缓冲液NaACTris-HCl EDTA氯仿异戊醇TE buffer仪器、耗材 瓷研钵离心管离心机实验步骤 一

DNA提取方法介绍

DNA提取主要是CTAB方法,其他的方法还有物理方式如玻璃珠法、超声波法、研磨法、冻融法。化学方式如异硫氰酸胍法、碱裂解法。生物方式:酶法。根据核酸分离纯化方式的不同有硅质材料、阴离子交换树脂等。

细菌DNA提取方案

细菌DNA提取方案:革兰氏阴性菌,如E.coli,一般有三种可以选择的方法。一、水煮模板法——主要用于PCR反应1、接种单菌落于LB或脑心平板,连续画线,37摄氏度培养18-24小时。2、刮取1~2接种环菌苔加入150微升三蒸水中,混匀,100摄氏度煮沸10分钟。3、12000转/分钟 离心10分钟

动物DNA提取实验

实验方法原理 在浓氯化钠(1-2 mol/L)溶液中,脱氧核糖核蛋白的溶解度很大,核糖核蛋白的溶解度很小,在稀氯化钠(0.14 mol/L)溶液中,脱氧核糖核蛋白的溶解度很小,核糖核蛋白的溶解度很大。因此,可利用不同浓度的氯化钠溶液,将脱氧核糖核蛋白和核糖核蛋白从样品中分别抽提出来。 将抽提得的

DNA-提取小技巧

很多人都有上面这样的想法吧?其实我当初也这样的,结果呢?怎么也提不好,一提提了好几个月呢。DNA 提取还真是说起来容易、做起来难。首先大家得明确一点,DNA 是遗传信息的载体,获得高分子量、高纯度的 DNA 是你开展后续测序、杂交等实验的前提。所以,注意了,要高分子量、高纯度哦。我相信肯定有很多人一

细菌DNA提取方案

细菌DNA提取方案:革兰氏阴性菌,如E.coli,一般有三种可以选择的方法. 一、水煮模板法——主要用于PCR反应1、接种单菌落于LB或脑心平板,连续画线,37摄氏度培养18-24小时.2、刮取1~2接种环菌苔加入150微升三蒸水中,混匀,100摄氏度煮沸10分钟.3、12000转/分钟离心10分钟

质粒DNA的提取

实验概要        通过本实验学习和掌握碱裂解法提取质粒。实验原理         碱裂解法提取质粒是根据共价闭合环状质粒DNA与线性染色体DNA在拓扑学上的差异来分离它们。在pH值介于12.0~12.5这个狭窄的范围内,线性的DNA双螺旋结构解开而被变性,尽管在这样的条件下,共价闭环质粒DNA

外周血DNA提取技术

方法一:1. 标本预处理:将1ml EDTA抗凝贮冻血液于室温解冻后移入5ml离心管中,加入1ml磷酸缓冲盐溶液(PBS),混匀,3500g离心15min,倾去含裂解红细胞上清。重复一次。用0.7ml DNA提取液混悬白细胞沉淀,37℃水浴温育1h。2. 消化:上述DNA提取液混悬白细胞,37℃水浴